CHƯƠNG 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Phương pháp nghiên cứu
2.4.2. Phương pháp bào chế và đánh giá đặc tính bột đông khô chứa nano
2.4.2.1. Phương pháp bào chế bột đông khô chứa nano paclitaxel, dihydroartemisinin - glucosamin
Công thức bột đông khô:
+ Hoạt chất: Hỗn dịch nano polyme – lipid chứa PTX và DHA – GLU
+ Tá dược tạo khung: manitol, lactose, saccarose, sorbitol
Phương pháp đông khô:
Lựa chọn hỗn dịch nano chứa PTX và DHA-GLU thu được sau khi tối ưu hóa theo phương pháp trình bày ở mục 2.4.1 tiếp tục bào chế dạng bột đông khô. Phối hỗn dịch nano với tá dược tạo khung (manitol, lactose, saccarose…) ở các nồng độ khác nhau để tạo bánh bột. Tiến hành đông khô trên thiết bị đông khô.
- Giai đoạn tiền đông: Nhiệt độ: -86oC. Thời gian: 6 giờ. - Giai đoạn sấy sơ cấp
Nhiệt độ: -60oC Thời gian: Khảo sát. - Giai đoạn sấy thứ cấp:
Nhiệt độ: 30oC. Thời gian: Khảo sát.
- Thu bột vào bảo quản trong lọ kín.
2.4.2.2. Phương pháp đánh giá bột đông khô chứa nano paclitaxel,
dihydroartemisinin - glucosamin
Đánh giá một số đặc tính bột đơng khơ:
26
- Thời gian phân tán lại: Hút chính xác 10 ml nước cất pha tiêm cho vào mỗi đơn
vị liều bột đông khô rồi quan sát. 10 giây quan sát 1 lần.
- Hình thức sau khi pha: Thử bằng cảm quan.
- KTTP và phân bố KTTP sau khi pha: tương tự mục 2.4.1.2.
- Khả năng giải phóng in vitro: Tiến hành tương tự mục 2.4.1.2. Mẫu thử là 2,0
g bột đông khô được phân tán trong 2 ml nước.
- Hàm lượng DHA-GLU và PTX: tương tự mục 2.4.1.2. Mẫu thử được chuẩn bị
theo phương pháp sau: Cân chính xác khoảng 100 mg bột đơng khơ cho vào bình định mức 5 ml, thêm 2 ml ACN, lắc kỹ, đậy kín và siêu âm trong khoảng 15 phút. Để nguội, bổ sung ACN đến vạch, lắc đều. Lọc qua màng lọc 0,45 µm thu được dung dịch thử.
- Đánh giá tương tác dược chất – tá dược và trạng thái vật lý của dược chất trong
bột đông khô chứa nano PTX và DHA-GLU: Sử dụng phổ hồng ngoại IR
+ Thiết bị: máy đo phổ hồng ngoại FTIR-IS
+ Mục đích: khảo sát và dự đốn các tương tác hóa lý có thể xảy ra giữa các thành phần trong công thức để đảm bảo các tá dược được lựa chọn tương thích với dược chất.
+ Mẫu phân tích: dược chất, tá dược, bột đơng khơ.
+ Tiến hành phân tích mẫu: Cân khoảng 2 – 5 mg mẫu phân tích, trộn đều và nghiệm mịn với KBr theo tỉ lệ 1:100, ép bằng máy ép thủy lực thành viên mỏng gân như trong suốt. Quét phổ của mẫu đã chuẩn bị trong phạm vi số sóng từ 400 đến 4000 cm-1, lấy tín hiệu trung bình trên 20 lần quét.
2.4.2.3. Phương pháp bước đầu đánh giá độ ổn định của bột đông khô
Bột đông khô nano PTX và DHA-GLU: Tiến hành theo dõi ở 2 điều kiện: điều
kiện phịng thí nghiệm (nhiệt độ 18 – 35 oC, hàm ẩm 55 – 85 %), trong tủ lạnh (nhiệt độ 2 – 8 oC). Tiến hành đánh giá cảm quan, hàm lượng dược chất, KTTP và phân bố KTTP.
Bột đông khô nano PTX và DHA-GLU sau khi pha: Tiến hành theo dõi ở 2 điều
27
lạnh (nhiệt độ 2 – 8 oC). Tiến hành đánh giá cảm quan, hàm lượng dược chất, KTTP và phân bố KTTP.