PHẦN I MỞ ĐẦU
PHẦN III NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4. Phương pháp nghiên cứu
3.4.1. Phương pháp chẩn đoán bệnh viêm ruột truyền nhiễm do Parvovirus
3.4.1.1. Chẩn đoán lâm sàng
Dựa vào phương pháp chẩn đoán cơ bản của Chu Đức Thắng (2007) [10] chúng tôi tiến hành chẩn đoán như sau:
Khi chó được mang đến phòng khám chúng tôi tiến hành hỏi bệnh từ chủ vật nuôi kết hợp với quan sát tình trạng sức khỏe của chó bệnh thấy chó có biểu hiện một số triệu chứng như sau:
Mệt mỏi, ủ rũ, bỏ ăn, chó bị nôn mửa, tiêu chảy;
Quan sát phân thấy phân có lẫn máu tươi, lẫn niêm mạc ruột, phân có mùi tanh khắm đặc trưng giống như ruột cá mè phơi nắng.
Sau đó chúng tôi tiến hành đo thân nhiệt cho chó bệnh thấy chó có biểu hiện sốt. Trên cơ sở đó, chúng tôi kết luận sơ bộ chó bị nhiễm bệnh viêm ruột truyền nhiễm do Parvovirus.
3.4.1.2. Chẩn đoán huyết thanh học bằng test thử CPV (Canine Parvovirus One- Step Test Kit).
Sau khi có kết luận sơ bộ từ chẩn đoán lâm sàng, đối với những chó nghi mắc bệnh chúng tôi tiến hành chẩn đoán huyết thanh học bằng test thử CPV.
Tại phòng khám thú y Sky Pet chúng tôi sử dụng bộ test thử CPV của công ty Quicking Biotech Co. Ltd; Sản xuất năm 2016; có độ nhạy là 97%; độ đặc hiệu là 100%.
Nguyên lý
Phản ứng này dựa vào nguyên lý của phản ứng ELISA để phát hiện kháng nguyên của virus Parvo trên chó từ các mẫu bệnh phẩm là phân. Hai kháng thể (KT) đơn dòng trong thiết bị kết hợp với các điểm quyết định kháng nguyên của virus parvo. Sau khi cho bệnh phẩm thấm vào vị trí đệm cellulozo của thiết bị, các kháng nguyên của virus Parvo có trong bệnh phẩm sẽ di chuyển về điểm gắn kháng thể (vạch C và T) để kết hợp với hợp chât thể keo màu vàng chứa kháng thể đơn dòng kháng virus tạo thành phức hợp “KN - KT”. Sau đó, phức hợp này kết hợp với kháng
21
thể đơn dòng kháng virus Parvo khác trong màng nitơ - cellulozo của thiết bị, để tạo thành phức hợp kẹp hoàn chỉnh KT - KN - KT”. Kết quả xét nghiệm có thể được biểu lộ qua sự xuất hiện các vạch C và T do thiết bị sử dụng “phép sắc ký miễn dịch”.
Tiến hành:
Lấy mẫu bệnh phẩm cần xét nghiệm là phân của chó nghi mắc bệnh viêm ruột truyền nhiễm do Parvovirus bằng phương pháp ngoáy bông tăm trực tiếp ở trực
tràng. Bệnh phẩm sau khi thu được cần làm xét nghiệm ngay. Trong trường hợp cần thiết có thể bảo quản ở 2oC trong vòng 24h. Tuy nhiên, trước khi làm xét nghiệm cần nâng nhiệt độ của mẫu bệnh phẩm lên nhiệt độ phòng (22 - 25oC).
Đưa bông tăm chứa bệnh phẩm vào lọ chứa 1ml dung dịch chất pha loãng, khuấy động xoay tròn que trong chất pha loãng. Sau đó nhỏ 3 - 4 giọt dung dịch chứa mẫu vào thiết bị xét nghiệm, sau đó đọc kết quả xét nghiệm trong vòng 3-5 phút. Nếu thấy trên test thử xuất hiện 1 vạch đỏ C chó âm tính với Parvovirus, trên test thử xuất hiện 2 vạch đỏ C và T, chó dương tính với Parvovirus.
22
Một số hình ảnh minh họa cách làm xét nghiệm Tets thử CPV
Hình 9. Bộ Kit test CPV
Hình 10. Lấy mẫu phân test CPV Hình 11. Tiến hành test CPV
23