1.6.1. Nuơi cấy sơ cấp
Là phương pháp sử dụng các tế bào sau khi được tách từ các mảnh mơ và trước lần cấy chuyền đầu tiên. Quy trình được tiến hành bắt đầu từ lúc thu nhận các mẫu sinh thiết, các mảnh mơ sống. Sau đĩ, các mảnh mơ được xử lí sơ bộ để loại bỏ vi khuẩn, nấm cũng như các yếu tố khơng mong muốn khác. Sau đĩ, sẽ được tách thành dạng huyền phù với các tế bào đơn lẻ trước khi cho vào tủ nuơi tế bào [55]. Cĩ nhiều phương pháp để tách rời các tế bào thành dạng huyền phù nhưng khơng gây tổn thương đáng kể cho tế bào. Các tế bào trong khối mơ liên kết chặt chẽ với nhau và liên kết với chất nền ngoại bào nhờ các cầu nối protein hình thành giữa các tế bào với nhau. Để tách rời các tế bào khỏi khối mơ người ta thường dùng các tác động cơ học bẻ gãy những cầu nối hoặc/và dùng các enzyme để phân hủy các cầu nối trên. Tác động cơ học được thực hiện bằng cách cắt nhuyễn mơ, sau đĩ huyền phù trong dung dịch PBS và để lắng rồi thu dịch trong, dịch đĩ cĩ chứa tế bào đơn. Phương pháp này cho hiệu quả khơng cao, số lượng tế bào đơn thu nhận ít, vì vậy, thường áp dụng cho những mẫu mơ cĩ kích thước lớn và khơng khan hiếm. Tuy nhiên, việc tách bằng phương pháp cơ học sẽ thu được những tế bào cĩ khả năng sống cao. Trong phương
pháp tách tế bào bằng enzyme, các protease được sử dụng là những enzyme thủy phân protein như trypsine, collagenase, elactase, pronase, dispase hay một tổ hợp các enzyme khác nhau. Trên thực tế, việc cắt nhuyễn mơ thường dùng để làm tăng khả năng tiếp xúc của mơ với enzyme sau đĩ sẽ sử dụng enzyme để thu nhận được lượng tế bào tối đa [54].
1.6.2. Nuơi cấy thứ cấp
Được tiến hành sau khi tế bào được tạo dịng từ nuơi sơ cấp. Vì hầu hết các tế bào sau khi nuơi cấy sẽ được bảo quản đơng lạnh nên việc nuơi cấy thứ cấp được bắt đầu bằng việc giải đơng và nuơi cấy trong các mơi trường thích hợp.