2. Làm khan bằng Na2SO4 3 Lọc bỏ Na2SO
3.3. CẤU TRÚC MỘT SỐ CHẤT PHÂN LẬP ĐƯỢC.
3.2.1. Chất HCE1.
Chất HCE1 kết tinh trong hệ dung môi Diclometan/ Metanol (1/1; v/v), tinh thể màu trắng, Rf= 054 trong hệ Diclometan/ etyl axetat (5/1; v/v), không hiện UV, hiện màu tím hồng với thuốc thử vanilin trong H2SO4. Điểm nóng chảy là 307- 308°C.
Phổ khối lượng (EI-MS) chỉ ra pic phân tử m/z 456 M+ (C30H48O3) và các mảnh phân rã ở 248, 203, 189 tương ứng với sự phân rã retro Diels-Alder từ tritecpen urs-12-en với nhóm OH ở vòng A
Phổ 1H- và 13C-NMR cho thấy HCE1 có 48 proton và 30 nguyên tử cacbon. Như vậy công thức phân tử của HCE1 là C30H48O3.
Cấu trúc của HCE1 đã được xác định dựa vào các tín hiệu xuất hiện trên các phổ NMR. Phổ DEPT của HCE1 cho thấy trong 30 nguyên tử cacbon, có 7 nguyên tử cacbon bậc bốn, 5 nhóm CH, 10 nhóm CH2 và 7 nhóm CH3 và điều này phù hợp với nhận xét rằng chất HCE1 là một hợp chất tritecpen khung ursan. Trên phổ 1H- NMR có tín hiệu của proton của nhóm hidroxymetin δH 3,17 (1H, dd, J = 11,5; 5,0 Hz, Hα-3) tương ứng với tín hiệu cacbon ở δC 79,5 (C-3) trên phổ 13C-NMR và nhóm cacbonyl ở δC 181,6 ppm (C-28). Sự có mặt của nhóm metin olefinic thể hiện
qua tín hiệu ở δH 5,26 ppm (1H, t, J= 7,5 Hz, H-12) gắn vào nguyên tử C-12 (123,4 ppm) trên phổ 13C-NMR. Ngoài ra, tín hiệu của nhóm cacboxyl được phát hiện dễ dàng trong phổ 13C-NMR ở δ 180,94 ppm (s, C-28).
Trên cơ sở những phân tích trên cũng như so sánh với các số liệu phổ đã công bố[22] cho phép kết luận chất HCE1 phân lập được là axit oleanolic.
3.2.2. Chất HCE1.1.
Chất HCE1 có dạng bột màu trắng, tan trong hệ dung môi diclometan/ metanol, đun nóng. Hiện màu tím với thuốc thử H2SO4 10%, hơ nóng. Nhiệt độ nóng chảy 296- 298oC.
Từ những dự kiện vật lý trên chúng tôi giả thiết HCE1 là một steroit có tên là Daucosterol. Để khẳng định chắc chắn điều này chúng tôi đã HCE1 chạy sắc kí lớp mỏng và đồng sắc kí lớp mỏng với chất chuẩn là Daucosterol cho cùng một giá trị Rf. Từ đó chúng tôi rút ra kết luận hợp chất HCE1 là daucosterol.
H O C O O H