L ỜI CẢM ƠN
4. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài
2.3.6. Phương pháp thử tính kháng khuẩn của vật liệu nano Đồng
Sau khi kết thúc thí nghiệm tại catot xuất hiện kết tủa nano Cu màu xanh da trời. Thử tính kháng khuẩn của nano đồng thu được sau khi ly tâm dung dịch ở catot tại các nồng độ 10/25/50/100/200ppm đối với hai chủng vi khuẩn
Xanthomonas axonopodis và Ralstonia solanacearum bằng phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch và phương pháp đo mật độ quang xác định IC50.
Để xác định khả năng ức chế sinh trưởng của nano đồng đến vi khuẩn, đĩa thủy tinh có đường kính 10 cm chứa môi trường thạch LBvà được cấy đều vi khuẩn lên bề mặt thạch. Sau đó, đĩa LB được để khô ủ ở nhiệt độ thích hợp khoảng 370C và được đục các lỗ nhỏ có đường kính 1cm. Hạt nano đồng ở các nồng độ khác nhau được nhỏ vào những lỗ đục sẵn trên, dung dịch nano đồng
sẽ khuếch tán từ trong lỗ ra xung quanh và ức chế khả năng sinh trưởng phát triển của vi khuẩn. Để nano đồng khuếch tán ra xung quanh, tiến hành giữ ủ đĩa thạch ở 370C trong thời gian 24h để vi khuẩn phát triển thành các đám khuẩn lạc. Nếu dung dịch nano đồng có tác dụng thì sau một thời gian vi khuẩn sẽ không phát triển được ở vùng xung quanh lỗ thử.
Ngược lại nếu thuốc không có tác dụng thì vi khuẩn vẫn phát triển bình thường, và vùng vi khuẩn không phát triển được có thể nhận biết ở màu sắc các vùng đó không giống nhau. Bằng cách đo đường kính của vòng tròn ức chế sinh trưởng của vi khuẩn xung quanh lỗ thử ta có thể xác định được khả năng kháng khuẩn của nano đồng ở các mức nồng độ khác nhau.
Hoạt tính ức chế của nano đồng đối với vi khuẩn được đánh giá bằng cách đo bán kính (BK) vòng ức chế vi sinh vật theo công thức:
BK (mm) = D – d; Trong đó: D: đường kính vòng vô khuẩn,
d: đường kính lỗ khoan thạch.
Thí nghiệm được lặp lại ba lần và lấy giá trị bán kính trung bình.
IC50 (nồng độ ức chế tối đa một nửa) là một thước đo trong việc ức chế một chức năng sinh học hoặc hóa sinh đặc biệt. Giá trị IC50 của nano đồng được tính bằng phần mềm SciDAVis trên thuật toán Scaled lavenberg marquartr.
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN