5. Tính mới của đề tài
3.2.2.1. Ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng đến sự tạo phôi thứ cấp
Bảng 3.9. Ảnh hưởng của NAA và BA đến sự tạo phôi thứ cấp, ở môi trường lỏng SH, 30 NSC.
NAA BA Số phôi Đặc điểm hình thái, màu sắc phôi/ cụm phôi (mg/L) (mg/L) thứ cấp
0 0,25 0,00e* Không có hiện tượng tạo phôi thứ cấp; phôi sơ cấp phát triển với hình thái rễ, thân và lá mầm rõ rệt 1 0,25 15,23d Phôi thứ cấp nhỏ, dạng nốt tròn, màu hơi xanh; cụm
phôi ít rễ
2 0,25 17,30c Phôi thứ cấp nhỏ, dạng nốt tròn/thon dài, màu hơi xanh; cụm phôi ít rễ
3 0,25 19,37a Phôi thứ cấp to, màu hơi xanh; cụm phôi có nhiều rễ. Có hiện tượng sùi mô sẹo ở viền lá mầm phôi cấy ban đầu.
4 0,25 18,56b Phôi thứ cấp to, màu hơi xanh; cụm phôi có nhiều rễ. Có hiện tượng sùi mô sẹo ở viền lá mầm phôi cấy ban đầu và ở rễ
*Các chữ cái khác nhau trong một cột thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa ở mức p ≤ 0,05 trong phép thử LSD.
Từ kết quả trên, 04 nghiệm thức NAA (1; 2; 3; 4 mg/L) được tiếp tục sử dụng cho nghiên cứu tạo phôi thứ cấp trong môi trường lỏng vì ở nồng độ 5 mg/L NAA, phôi có lá mầm rất to, rễ rất to và rất dài có thể gây hạn chế quá trình nhân phôi. Kết quả cho thấy số phôi thứ cấp phát sinh từ phôi sơ cấp đơn nuôi cấy trong môi trường có 1; 2; 3; 4 mg/L NAA lần lượt là 15,23; 17,30; 19,37; 18,56 (Bảng 3.9) và phôi thứ cấp hình thành ở phần thân phôi sơ cấp (Hình 3.21D,E,F,G). Ở phôi nuôi cấy trong môi trường không bổ sung NAA, không ghi nhận hiện tượng tạo phôi thứ cấp (Hình 3.21C). Tuy số phôi ở nghiệm thức 2 mg/L NAA không nhiều như ở 02 nghiệm thức 3 mg/L và 4 mg/L NAA nhưng phôi thứ cấp hình thành có dạng nốt tròn/thon dài với