- Hoặc các loại nhân quang điện photomultiplier tube detector), hiện nay là các mảng giọt (diode array),
Biểu thức liên hệ giữa hệ số phân giải với độ hiệu nghiệm, độ chọn lọc và dung
độ hiệu nghiệm, độ chọn lọc và dung lượng cột
• Trong đĩ:
• : số hạng biểu diễn sự phụ thuộc vào độ hiệu nghiệm của cột.
•
• : số hạng biểu diễn sự phụ thuộc vào độ chọn lọc. –
– : số hạng biểu diễn sự phụ thuộc vào dung lượng của cột. ' 2 s ' 2 K N α-1 R = 4 α 1+K N 4 α-1 α ' 2 ' 2 1 K K
Cơng thức tính số đĩa lý thuyết cần thiết để đạt được hệ số phân giải cho trước RSđối với cột nhất định với các giá trị cho K’,cho trước 2 ' 2 2 2 s 2 ' 2 1+K α N=16R × K α-1 507 Bài tập áp dụng
•Phân tích một hỗn hợp Metil ester bằng phương pháp sắc ký khí với pha tĩnh khơng phân cực. Trên sắc ký đồ cĩ 2 mũi ứng với tR1= 88s , tR2= 88.4s. Biết rằng tM(thời gian để pha động đi qua cột) là 40s.
•a. Tính K’1, K’2và độ chọn lọc .
•b. Khi RS= 1.3 thì 2 mũi tách ra hồn tồn. Tính số đĩa lý thuyết cần thiết.
•c. Nếu trong PTN cĩ một cột mao quản dài 50 m, chiều cao của một đĩa lý thuyết là 100 m, với cột này cĩ thể tách 2 mũi trên được
Sắc ký hấp phụ(absorption chromatography)
Sự tách do ái lực khác nhau của các chất đối với chất hấp phụ rắn (pha tĩnh)
•Pha tĩnh: là các chất hấp phụ như SiO2, Al2O3cĩ khả năng hấp phụ.
•Pha động: cĩ thể lỏng hoặc khí.
3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
Phân loại các PPSK theo cơ chế của quá trình tách
509
Sắc ký phân bố(distribution chromatography)
Sự tách dựa vào sự phân bố khác nhau giữa các chất với pha tĩnh và pha động.
•Pha tĩnh: là chất lỏng(được giữ bởi chất mang rắn).
•Pha động: cĩ thể lỏng hoặc khí.
Sắc ký phân bố pha thường (Normal phase chromatography) : pha tĩnh cĩ độ phân cực cao
Sắc ký phân bố pha đảo (Reversed phase chromatography) : pha tĩnh cĩ độ phân cực thấp.
Phân loại các PPSK theo cơ chế của quá trình tách
5103.2. Phân loại các phương pháp sắc ký 3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
Sắc ký trao đổi ion(ion exchange chromatography)
Sự tách xảy ra do ái lực khác nhau của các ion trong dung dịch đối với các trung tâm trao đởi ion trên chất rắn là pha tĩnh.
•Pha tĩnh: là các chất rắn cĩ chứa ion linh động.
•Pha động: nước hoặc hỗn hợp gồm nước và dung mơi hữu cơ.
Phân loại các PPSK theo cơ chế của quá trình tách
5113.2. Phân loại các phương pháp sắc ký 3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
Sắc ký rây phân tử(molecular sieve chromatography) Sự tách xảy ra do kích thước phân tử khác nhau.
•Pha tĩnh: làcác vật liệu rắn cĩ độ xốp lớn, cĩ các lỗ với kích thước nhất định để rây chọn lọc các cấu tử tùy theo kích thước và hình dạng phân tử.
•Pha động: cĩ thể lỏng hoặc khí.
3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
Phân loại các PPSK theo cơ chế của quá trình tách
Sắc ký khí(gas chromatography-GC)
Cĩ pha động là chất khí và mẫu đưa vào thiết bị phân tích ở dạng khí. Trong trường hợp này pha tĩnh cĩ thể là chất rắn hoặc chất lỏng.
Sắc ký lỏng(liquid chromatography-LC)
Cĩ pha động là chất lỏng và mẫu đưa vào thiết bị phân tích ở dạng lỏng. Trong trường hợp này cũng cĩ thể là chất rắn hay lỏng
Phân loại các PPSK theo tính chất của pha động
3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
Sắc ký khí(gas chromatography-GC)
Thường áp dụng cho chất khí, lỏng hoặc rắn dễ bay hơi và bền ở nhiệt độ cao (M<500).
Sắc ký lỏng(liquid chromatography-LC)
Thường áp dụng cho chất lỏng hoặc rắn cịn lại (M<2000).
Phân loại các PPSK theo tính chất của pha động
3.2. Phân loại các phương pháp sắc ký
3.2.1. Sắc ký giấy
515Sắc ký giấy:phân tách các thành phần ưa nước như amino acid, Sắc ký giấy:phân tách các thành phần ưa nước như amino acid, đường,..
Pha tĩnh là một tờ giấy bằng cellulose. Các lọai giấy này cĩ tính ái nước nên trên thực tế, pha tĩnh là một lớp nước (H2O) thật mỏng đã được che phủ lên trên bề mặt của tờ giấy.
Pha động là chất lỏng( dung mơi/hỗn hợp dung mơi).
Lỗ hỗng của cellulose: chất phân tích khuếch tán hoặc khơng di chuyển được
3.2.1. Sắc ký giấy
Sắc ký bản mỏngdựa chủ yếu vào hiện tượng hấp thu trong đĩ pha động là dung mơi hoặc hỗn hợp các dung mơi, di chuyển ngang qua một pha tĩnh là một chất trơ (thí dụ như: silicagel hay oxid alumin).
Pha tĩnh được tráng thành một lớp mỏng, đều, phủ lên nền phẳng như tấm kiếng, tấm nhơm hay tấm plastic. Do chất hấp thu được tráng thành một lớp mỏng nên phương pháp này được gọi là sắc ký bản mỏng.
3.2.2. Sắc ký bản mỏng
517