L ỜI CẢM ƠN
3.7.1. Hàm lượng axit ferulic có trong các dịch chiết EtOAc
Lấy 1 lượng nhỏ (10 µl) dịch chiết các phân đoạn S1, S2, S3, S4, và dung dịch lớp D để phân tích bằng máy sắc ký lỏng cao áp HPLC nhằm xác định hàm lượng FA chứa trong lớp B và trong từng phân đoạn chiết. Dựa vào phép đo, tính toán hàm lượng FA chứa trong mỗi phân đoạn từ diện tích pic, đường chuẩn lập sẵn, ta thu được kết quả như bảng 3.5 sau:
Bảng 3.5. Khối lượng axit ferulic trong các dịch chiết EtOAc Dịch chiết Vc (ml) Nồng độ FA (ppm) Khối lượng FA trong dịch chiết (mg) Hiệu suất chiết (%) (Si/D)(i = 1-4) S1 25 1844.6 46.1 19.9 S2 100 963.4 96.3 41.7 S3 100 438.0 43.8 19.0 S4 100 224.0 22.4 9.7 Tổng S2+S3+S4 162.5 70.4 Tổng S1+S2+S3+S4 208.7 90.3 Lớp B 900 256.8 231.1
Từ số liệu bảng 3.5 ta nhận thấy, đối với dịch chiết S1, thể tích thu được tương
đối nhỏ so với các dịch chiết S2, S3, S4. Điều này có thể được giải thích do, trong dung dịch chứa kết tủa FA, vẫn còn 1 lượng EtOH đáng kể. Sự tồn tại của đồng dung môi EtOH, sẽ làm EtOAc khi thêm vào để chiết lần đầu tiên sẽ bị phân bố
phần lớn trong lớp dưới chứa EtOH và H2O, do vậy thể tích thu được của lớp chiết này trên thực tế chỉ còn 25 ml. Các dịch chiết lần 2, 3, 4 đều có thể tích bằng nhau và gần bằng 100 ml. Trước khi phân tích, các thể tích này được định mức về đúng
100 ml để đảm bảo quá trình tính toán khối lượng axit FA trong dịch chiết được chuẩn xác.
Sau 04 lần chiết, tổng hiệu suất thu hồi FA thô là 90.3 %, riêng đối với 03 lần chiết sau (S2, S3, S4) tổng hiệu suất chiết là 70.4 %. Sở dĩ gộp 03 lần chiết cuối lại với nhau, vì xét về mặt cảm quan ban đầu, 03 dịch chiết này có màu vàng nhạt, trong khi dịch chiết S1 có màu vàng nâu, do vậy, chúng tôi dự đoán gộp 03 dịch chiết cuối sẽ thu được mẫu có hàm lượng tạp chất ít hơn (Ta gọi dịch gộp 03 lần chiết cuối này là St).
Quá trình chiết theo quy trình hình 2.4 được lặp lại 03 lần và kết quả thu được thể hiện như hình 3.14 dưới đây:
Hình 3.14. Hiệu suất chiết trung bình của axit ferulic trong các dịch chiết S1, S2, S3, S4
Như vậy, từ bảng 3.5 và hình 3.14, ta thấy hiệu suất chiết FA thô từ các phân
đoạn chiết tương đối lớn, và phân đoạn S2 cho hàm lượng FA thô là cao nhất. Từ đây, chúng tôi tiếp tục khảo sát để kiểm tra độ tinh khiết của FA trong các dịch chiết này.