Đến khả năng nhân nhanh loài Rễ gió. loài Rễ gió

Một phần của tài liệu Nghiên cứu khả năng nhân nhanh loài rễ gió (aristolochia contorta bunge) bằng phương pháp in vitro (Trang 27 - 32)

H2O2 H2O2 H2O2

Chỉ tiêu theo dõi: Tiến hành theo dõi sau 7 ngày các chỉ tiêu tỷ lệ mẫu sống, tỷ lệ mẫu sống nhiễm, tỷ lệ mẫu chết.

3.4.3.2. Nội dung 2:: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến khả năng tái sinh chồi loài Rễ gió từ đoạn thân mang chồi ngủ.

Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến khả năng tái sinh chồi loài Rễ gió từ đoạn thân mang chồi ngủ.

Mẫu sau khi khử trùng, sau một tuần theo dõi không bị nhiễm được cấy chuyển sang các môi trường nuôi cấy khác nhau với chất bổ sung Đường 30g/L + Agar 5,5g/L + Nước dừa 150 ml/L + Inositol 100mg/l để nghiên cứu ảnh hưởng của một số môi trường đến khả năng tái sinh chồi loài Rễ gió.

Công thức thí nghiệm được bố trí như sau:

CT Môi trường

1 Muashige & Skoog (MS)

2 Gamborg’s (B5)

3 Woody Plant Medium (WPM)

-Mẫu có kích thước tương đồng sau khi khử trùng được đưa vào môi trường tái sinh, sau đó đặt trong phòng nuôi cấy với điều kiện thích hợp. Tiến hành theo dõi, quan sát chồi tái sinh và chất lượng chồi tái sinh.

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ tái sinh chồi và chất lượng chồi tái sinh sau 40 ngày nuôi cấy.

3.4.3.3.Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của một số Cytokinine đến khả năng nhân nhanh loài Rễ gió.

- Chồi tái sinh được tách và cấy chuyển sang môi trường nhân nhanh gồm: Môi trường nền, có bổ sung chất kích thích sinh trưởng (BA, Kinetin) để theo dõi khả năng nhân chồi của mẫu.

- Theo dõi, quan sát số chồi, chất lượng chồi.

Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng nhân nhanh của loài Rễ gió.

- Sử dụng môi trường nền gồm thành phần khoáng đa lượng, vi lượng, vitamin là thành phần của môi trường MS bổ sung: đường 30 g/l + nước dừa 150 ml/l + agar

5,5 g/l + inositol 100mg/l, pH 5,6 - 5,8. Môi trường hấp khử trùng ở nhiệt độ 1210C, áp suất 1,0 atm từ 15-20 phút.

- Bổ sung BA với nồng độ khác nhau trong từng công thức thí nghiệm.

- Mẫu có kích thước tương đồng sau khi khử trùng được đưa vào môi trường nuôi cấy bề mặt, sau đó đặt trong phòng nuôi cấy với điều kiện thích hợp. Tiến hành theo dõi, quan sát chồi tái sinh và chất lượng chồi tái sinh.

Thí nghiệm được bố trí như sau:

CT 1 (Đ/c): MT nền + BA 0,0 mg/l CT 2: MT nền + BA 0,5 mg/l CT 3: MT nền + BA 1 mg/l CT 4: MT nền + BA 1,5 mg/l CT 5: MT nền + BA 2 mg/l

Chỉ tiêu theo dõi: Tổng số mẫu bật chồi, hệ số nhân chồi và chất lượng chồi sau 30 ngày nuôi cấy.

Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của BA kết hợp với Kinetin đến khả năng nhân nhanh chồi của loài Rễ gió.

Các chồi được tạo thành từ môi trường tái sinh sẽ được tách ra và cấy chuyển sang môi trường nhân nhanh gồm: Môi trường nền + A (nồng độ BA thích hợp nhất cho quá trình tái sinh chồi ở thí nghiệm 3) + Kinetin ở các nồng độ khác nhau để theo dõi khả năng nhân chồi của mẫu.

Thí nghiệm được bố trí như sau:

CT 1 (Đ/c): MT nền + A + Kinetin 0,0 mg/l CT 2: MT nền + A + Kinetin 0,3 mg/l CT 3: MT nền + A + Kinetin 0,5 mg/l CT 4: MT nền + A + Kinetin 1,0 mg/l CT 5: MT nền + A + Kinetin 1,5 mg/l

Chỉ tiêu theo dõi: Tổng số chồi thu được, hệ số nhân chồi và chất lượng chồi sau 30 ngày nuôi cấy.

3.4.3.4.Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA và than hoạt tính đến khả năng ra rễ loài Rễ gió.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu khả năng nhân nhanh loài rễ gió (aristolochia contorta bunge) bằng phương pháp in vitro (Trang 27 - 32)

Tải bản đầy đủ (DOCX)

(73 trang)
w