CHƢƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP
2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1. Phƣơng pháp tạo màng
Trong phạm vi phòng thí nghiệm, khi hòa tan màng CMC và PVA cần xác định lƣợng CMC, PVA thích hợp, hòa tan trong nƣớc, đun cách thủy trong nƣớc cho đến khi tan hoàn toàn. Sau đó, nhỏ lƣợng dung dịch lên giá thể, làm khô trong tủ sấy. Sau khi làm khô tạo một lớp màng film trong suốt trên bề mặt giá thể.
Đối với màng cellophane, nghiên cứu sử dụng màng cellophane dạng băng (tape) sẵn có trên thị trƣờng để thử nghiệm. Màng trong suốt có chiều dày 0,1mm gồm lớp chất dính bằng cao su tổng hợp.
2.2.2. Phƣơng pháp xác định nhóm máu
Phương pháp huyết thanh mẫu
- Dùng huyết thanh mẫu đã biết trƣớc kháng thể để tìm kháng nguyên nhóm máu trên màng hồng cầu.
- Trộn huyết thanh mẫu với máu ngƣời thử, dựa vào hiện tƣợng ngƣng kết hay không ngƣng kết mà ngƣời ra tìm ra kháng nguyên trên màng hồng cầu và từ đó xác định đƣợc nhóm máu.
Phản ứng chéo
Lấy hồng cầu rửa ngƣời cho trộn với huyết thanh ngƣời nhận vào trong một ống nghiệm và lấy huyết thanh ngƣời cho trộn với hồng cầu rửa ngƣời nhận vào
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
trong một ống nghiệm. Quan sát trên kính hiển vi hiện tƣợng ngƣng kết hồng cầu. Nếu không có hiện tƣợng ngƣng kết hồng cầu trong cả hai ống nghiệm thì kết luận hai nhóm máu là hoà hợp và truyền đƣợc cho nhau.
2.2.3. Phƣơng pháp tính toán
Độ nhạy: (Số mẫu dƣơng tính đúng/(số mẫu dƣơng tính đúng + số mẫu âm tính giả)) x 100
Độ đặc hiệu: (Số mẫu âm tính đúng/(số mẫu âm tính đúng + số mẫu dƣơng tính giả)) x 100
2.3. HƢỚNG DẪN SỬ DỤNG THẺ XÉT NGHIỆM
Nguyên lý của xét nghiệm là ngƣng kết, phát hiện sự có mặt của kháng nguyên trên hồng cầu. Các nhóm máu A, B, AB, O, Rh đƣợc xác định bởi sự có mặt hay không của các kháng nguyên trên bề mặt hồng cầu. Nếu các kháng nguyên có mặt trên hồng cầu, chúng sẽ ngƣng kết với các kháng thể tƣơng ứng (phản ứng dƣơng tính).
2.3.1. Lấy mẫu
Sử dụng máu lấy từ bệnh nhân để xét nghiệm ngay hoặc lấy máu có sử dụng chất chống đông EDTA bảo quản không quá 14 ngày trong oxalate hoặc heparin trong 2 ngày ở 2-80
C. Máu rã đông không sử dụng đƣợc trong xét nghiệm này. Loại bỏ những máu có vẩn đục, nhiễm khuẩn hoặc bị tủa. Mẫu giữ ở 2-80C cần để cân bằng đến nhiệt độ phòng mới sử dụng để xét nghiệm. Máu ngƣời cho bảo quản trong CPD, CPDA-1.