Gan tụy của các loài cua biển là một tổ chức kết hợp chức năng gan và túi mật, bộ phận này thƣờng tiết ra một khối lƣợng lớn các loại enzyme tiêu hóa có khả năng thuỷ phân protein, có phổ
đặc trƣng rất rộng với hoạt tính cao đặc biệt. Gan tụy thuộc loại nguyên liệu dễ kiếm, rẻ tiền và không độc, hiện nay từ gan tụy cua ngƣời ta có thể thu nhận những chế phẩm từ enzyme có độ sạch cao chứa các protease thuỷ phân colagen, aminopepitdase, trypsin, DNAase phụ thuộc canxi và magie [13].
Các chế phẩm enzyme hepatopancreas chủ yếu chứa chất xúc tác hydrolase cụ thể là protease phân huỷ colagen. Trong thành phần chế phẩm tổ hợp men có các protease phân huỷ colagen và các protease phụ thuộc kim loại có trọng lƣợng phân tử nhỏ hơn 30kDa, các men ribonuclease, deoxiribonuclease, photphodiesterase, photphotase, amilase, lipase và glicolase (protease, nuclease, glicozidase, lipase) [17].
Tại Liên bang Nga, loài cua vua (king crab) Paralithodes camtschatica
là loài động vật biển đƣợc các nghiên cứu nhiều nhất để thu nhận enzyme protease ứng dụng trong chế tạo băng gạc điều trị vết thƣơng, vết loét khó lành. Hiện nay trên thế giới đã chiết tách và ứng dụng thành công enzyme protease trong y tế trên đối tƣợng này. Các chế phẩm enzyme từ gan tụy cua
23
Số hóa bởi Trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
(hepatopancreas) chủ yếu chứa chất xúc tác hyđrolase cụ thể là protease phân huỷ colagen [30].
Cũng theo nghiên cứu này, ngƣời ta nhận thấy tổ hợp enzyme phân giải protein chứa nhiều men có khả năng thuỷ phân 4 lớp biopolime tự nhiên là protein, acid nucleic, polysacarit và lipit nhằm mục đích ứng dụng rộng rãi với hiệu quả cao. Kết quả của giải pháp là một chế phẩm chứa nhiều enzyme: enzyme phân huỷ colagen, enzyme phụ thuộc kim loại, ribonuclease, deoxiribonuclease, photphodiesterase, photphotase, amilase, lipase và glicolase. Thu nhận chế phẩm này bằng phƣơng pháp nghiền đồng nhất gan tuỵ cua biển trong dung dịch đệm, loại bỏ chất bã bằng ly tâm, keo tụ lipit bằng chitosan sau đó siêu lọc trên màng 15kDa lấy chế phẩm trên màng và lọc tiếp trên màng 50kDa. Tổ hợp enzyme thu đƣợc chứa một loại các protease phân huỷ colagen với trọng lƣợng phân tử từ 18-36kDa, DNAase kiềm (42kDa), DNAase acid (32kDa), RNAase (≤ 20kDa), photphodiesterase, glicozidase và lipase (≤ 35kDa). Hàm lƣợng protein trong chế phẩm không nhỏ hơn 80%. Chế phẩm không chứa các ion kim loại nặng, các tạp chất có hại [10].
Tóm lại chế phẩm tổ hợp men này chứa 4 loại hyđrolase thuỷ phân: protelase, nuclease, glicodase, lipase, nghĩa là có một phổ rộng về hoạt tính enzyme so với các chế phẩm đƣợc biết từ trƣớc và trong đó chỉ có một loại protease phân huỷ colagen. Vì vậy, chế phẩm này có thể đƣợc sử dụng trong y tế có hiệu quả hơn nhiều so với các chế phẩm đƣợc biết khác. Thí dụ có thể sử dụng chế phẩm này trong y học để điều trị các quá trình gây mủ-hoại tử gây ra bởi sự nhiễm virut và vi khuẩn. Hiệu quả điều trị của chế phẩm này đƣợc đảm bảo bởi sự kết hợp độc đáo giữa tác dụng thuỷ phân của colagenase, protease, nuclease và hiệu ứng kháng virut của DNAase và RNAase.
24
Số hóa bởi Trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trong quá trình thu nhận tổ hợp enzyme ngƣời ta có thể duy trì pH của dung dịch enzyme từ 4.5 - 10.5. Trong trƣờng hợp pH < 4.5 và pH > 10.5, hoạt tính của tổ hợp enzyme và của từng thành phần riêng biệt của nó giảm một cách đáng kể, còn trong trƣờng hợp pH < 4.5 và pH > 10.5 thì một phần enzyme sẽ bị vô hiệu hoá không thuận nghịch [29].