3. CÁC ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA:
3.29. Khả năng làm dịch hóa Gelatin
· Môi trường:
Pepton 5 g
Gelatin 100-150 g
Nước cất 1000 ml pH = 7,2-7,4
Phân môi trường vào các ống nghiệm (4-5 ml), khử trùng ở 115 0C trong 20 phút.
· Cấy vi khuẩn mới hoạt hoá (18-24 giờ) chích sâu vào môi trường
gelatin, giữ 2 ống không cấy làm đối chứng, nuôi ở 20 0C trong thời
gian 2,7,10,14,30 ngày.
· Quan sát khả năng làm dịch hoá gelatin tại nhiệt độ phòng từ 20 0C trở xuống. Nếu bề mặt môi trường gelatin không lõm xuống, gelatin
vẫn ở trạng thái ổn định là phản ứng âm tính (không sinh gelatinaza); nếu một phần hay toàn bộ gelatin hóa lỏng thì là phản ứng dương tính.
Nếu so với đối chứng âm tính thấy vi khuẩn đã mọc, gelatin chưa hóa
lỏng nhưng bề mặt lõm xuống thì cũng vẫn coi là dương tính (mức độ
dịch hóa thấp). Nếu vi khuẩn hoàn toàn không sinh trưởng thì có thể là không mọc được trên gelatin hoặc môi trường cơ sở chưa thích hợp.
· Chú ý:
- Nếu vi khuẩn chỉ sinh trưởng ở nhiệt độ trên 20 0C, lúc quan sát gelatin hoá lỏng cần đặt ống nuôi cấy một lúc vào nước lạnh rồi so sánh
- Khử trùng ở nhiệt độ quá cao hay quá thấp đều ảnh hưởng đến kết
quả, nên khử trùng ở 115 0C trong 15 phút.
- Gelatin chất lượng không đều nhau, lượng dùng khó thống nhất, nên chọn nồng độ tạo đông tốt ở 20 0C là được. Nên dùng thống nhất một
loại gelatin cho toàn bộ thí nghiệm.
Hình 3.7. Ví dụ minh hoạ kết quả kiểm tra khả năng làm dịch hoá gelatin (sinh
gelatinaza), Escherichia coli- âm tính, Pseudomonas aeruginosa-
dương tính.