Hợp chất CS thu được có đặc điểm sau: màu trắng, kết tủa vô định hình, tan trong dung môi chloroform. Sắc ký lớp mỏng với hệ giải ly H : CHCl3 : AcOH (9 : 1 : 0.01) cho 1 vết không hấp thu UV, hiện màu bằng dung dịch vanillin/H2SO4 nung nóng cho màu hồng. Phổ 1H NMR của hợp chất CS (phụ lục 1.1) cho thấy sự xuất hiện của 7 tín hiệu proton nhóm methyl tại δH (ppm) 0.76 (3H, s), 0.81 (3H, s), 0.82 (3H, s), 0.85 (3H, s), 0.96 (6H,
s), 1.18 (3H, s), 1.21 (3H, s). Đây là các tín hiệu đặc trưng của khung lupan.
Phổ 13C NMR (phụ lục 1.2) cho thấy sự xuất hiện 1 tín hiệu carbon gắn với oxygen tại 𝛿𝐶 (ppm) 73.6, 6 tín hiệu carbon nhóm methyl tại 𝛿𝐶 (ppm) 33.4, 21.5, 16.1, 16.7, 17.0, 15.8 và các tín hiệu carbon nhóm methylene, carbon tứ cấp tại 𝛿𝐶 (ppm) 18.7 – 54.0.
Từ những dữ liệu phổ trên, kết hợp so sánh với tài liệu tham khảo của hợp chất 22-
hydroxyisohopane cho thấy có sự tương đồng. Vậy cấu trúc của hợp chất CS2 được đề
nghị là 22-hydroxyisohopane.
14
Bảng 2.1: Bảng dữ liệu phổ NMR của hợp chất CS so sánh với hợp chất 22- hydroxyisohopane trong dung môi chloroform-d.
Vị trí
CS2 22-hydroxyisohopane
δH (ppm) δC (ppm) δH (ppm) δC (ppm)
1
Tín hiệu của khung lupan (27H ở vùng δH
0.72 – 2.40)
40.3
Tín hiệu của khung lupan (27H ở vùng δH 0.72 – 2.40) 40.3 2 18.7 18.7 3 42.1 42.1 4 33.3 33.3 5 56.1 56.1 6 18.7 18.7 7 34.4 34.4 8 41.9 41.9 9 50.4 50.4 10 37.4 37.4 11 20.9 20.9 12 22.0 22.0 13 49.9 49.9 14 41.9 41.9 15 33.3 33.3 16 26.6 26.6 17 54.0 53.9 18 44.1 44.1 19 41.3 41.3 20 24.2 24.2 21 51.2 51.1 22 74.0 74.0 23 0.96 (6H, s) 33.4 0.95 (6H, s) 33.4 24 0.96 (6H, s) 21.6 0.95 (6H, s) 21.6 25 0.79 (3H, s) 16.1 0.79 (3H, s) 16.2 26 0.82 (3H, s) 16.7 0.81 (3H, s) 16.7 27 0.85 (3H, s) 17.0 0.81 (3H, s) 17.0 28 0.76 (3H, s) 15.8 0.76 (3H, s) 15.8 29 1.18 (3H, s) 30.8 1.18 (3H, s) 30.9 30 1.21 (3H, s) 33.4 1.21 (3H, s) 33.4
15
KẾT LUẬN
Trong đề tài nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành khảo sát thành phần hóa học phân đoạn P3 cao petroleum ether từ nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps sinensis). Bằng phương pháp sắc ký cột và sắc ký bản mỏng trên silica gel pha thường và pha đảo, sắc kí bản mỏng điều chế đối với các hệ dung môi giải ly khác nhau đã cô lập hợp chất ký hiệu là CS.
Thông qua các kết quả phân tích phổ nghiệm (1H NMR, 13C NMR) và so sánh với các tài liệu tham khảo, chúng tôi đã xác định được cấu trúc của hợp chất là: 22-hydroxyisohopane.
22-hydroxyisohopane
16
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Hui-Chen Lo,1 Chienyan Hsieh, 2 Fang-Yi Lin, 3 and Tai-Hao Hsu3, “A Systematic Review of the Mysterious Caterpillar Fungus Ophiocordyceps sinensis in Dong- ChongXiaCao (冬蟲夏草 Dōng Chóng Xià Cǎo) and Related Bioactive Ingredients”, J Tradit Complement Med, vol.3, no.1, pp. 16–32, 2013.
2. W. Chen, W. Zhang, W. Shen and K.Wang, “Effects of the acid polysaccharide fraction isolated from a cultivated Cordyceps sinensis on macrophages in vitro”, Cell. Immunol, vol. 262, no. 1, pp. 69-74, 2010.
3. J. S. Zhu, G. M. Halpern and K. Jones, “The Scientific Rediscovery of an Ancient Chinese Herbal Medicine: Cordyceps sinensis Part I”, J. Altern. Complement. Med, vol. 4, no. 3, pp. 289-303, 1998.
4. S. P. Li, F. Q. Yang and K. W. K. Tsim, “Quality control of Cordyceps sinensis, a valued traditional Chinese medicine”, J. Pharm. Biomed. Anal, vol. 41, no. 5, pp. 1571-1584, 2006. 5. J Wang, YM Liu, W Cao, KW Yao, ZQ Liu, JY Guo, “Anti-inflammation and antioxidant effect of cordymin, a peptide purified from the medicinal mushroom Cordyceps sinensis, in middle cerebral artery occlusion-induced focal cerebral ischemia in rats”, Metab Brain Dis, vol.27, pp. 159–65, 2012.
6. G.D. Wang, “Cordyceps: Ecology Culture and Application”, Science & Technology Documents Publishing House, Beijing, 1995.
7. ML Yang, PC Kuo, TL Hwang, TS Wu, “Anti-inflammatory principles from Cordyceps sinensis”, J Nat Prod, vol. 74, pp. 1996–2000, 2011.
8. H. John, C. Matt, M Inc Aloha, SantaCruz, California, U.S.A, “Cordyceps. Wasser SP Institute of Evolution”, University of Haifa, Mt.Carmel, Haifa, Israel, 2005, thesis.
9. M. G. Shaashidhar, P. Giridhar, K. Udaya Sankar and B. Manohar: “Bioactive principles from Cordyceps sinensis: A potent food supplement – A review”, J. Funct. Foods, vol. 5, no. 3, pp. 1013-1030, 2013.
17 10. J. C. Holliday, P. Cleaver, M. Loomis-Powers and D. Patel, “Analysis of quality and techniques for hybridization of medicinal fungus Cordyceps sinensis (Berk) Sacc (Ascomycetes)”, Int. J. Med. Mushroom, vol. 6, pp. 151-164, 2004.
11. C. H. Dong and Y. J. Yao, “In vitro evaluation of antioxidant activities of aqueous extracts from natural and cultured mycelia of Cordyceps sinensis”, LWT – Food Sci. Technol, vol. 41, no. 4, pp. 669-677, 2008.
12. FQ Yang, K Feng, J Zhao, SP Li, “Analysis of sterols and fatty acids in natural and cultured Cordyceps by one-step derivatization followed with gas chromatography-mass spectrometry”, J Pharm Biomed Anal, vol.49, no. 8, pp. 1172, 2009.
13. JH Xiao, “Current status and ponderation on preparations and chemical structures of polysaccharide in fungi of Cordyceps (Fr.) Link”, Chin Tradit Herb Drugs, vol.39, no. 60, pp. 454, 2008.
14. J. Guan and S. P. Li, “Discrimination of polysaccharide from traditional Chinese medicines using saccharide mapping-Enzymatic digestion followed by chromatographic analysis”, J. Pharm. Biomed. Anal, vol. 51, no. 3, pp. 590-598, 2010.
15. J. Guan, J. Zhao, K. Feng D. J. Hu and S. P. Li, “Comparision and characterization of polysaccharides from natural and cultured Cordyceps using saccharide mapping”, Anal. Bioanal. Chem, vol. 99, no. 10, pp. 3465-3474, 2011.
16. Y. Wu, N. Hu, Y. Pan, L. Zhou and X. Zhou, “Isolation and characterization of a mannoglucan from edible Cordyceps sinensis mycelium”, Carbohydr. Res, vol. 342, no. 6, pp. 870-875, 2007.
17. T. Miyazaki, N. Oikawa and H. Yamada, “Studies on Fungal Polysaccharides. XX. Galactomannan of Cordyceps sinensis”, Chem. Pharm. Bull, vol. 25, no. 12, pp. 3324-3328, 1977.
18. K. D. Shonkor, F. Shinya, M. Mina and S. Akihiko, “Efficient Production of Anticancer Agent Cordycepin by Repeated Batch Culture of Cordyceps militaris Mutant”, Lecture Notes in Engineering and Computer Science. vol. 38, pp.20-22, 2010.
18 19. J. Guan, F. Q. Yang and S. P. Li, “ Evaluation of carbohydrates in natural and cultured
Cordyceps by pressurized liquid extraction and gas chromatography coupled with mass spectrometry”, Molecules, vol. 15, no. 6, pp. 4227-4241, 2010.
20. S.P. Li a, F.Q. Yang a, Karl W.K. Tsim, “Quality control of Cordyceps sinensis, a valued traditional Chinese medicine”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, vol.41, pp.1571–1584, 2006.
21. S Zhong, H Pan, L Fan, Lv G, Y Wu, B Parmeswaran, et al. “Advances in research of polysaccharides in Cordyceps species”, Food Technol Biotechnol, vol.47, pp. 304-12, 2009. 22. R Singh, PS Negi, Z. Ahmed, “Genetic variability assessment in medicinal caterpillar fungi Cordyceps spp. (Ascomycetes) in central himalayas”, India. Int J Med Mushrooms., vol.9, no. 11, pp. 185, 2009.
23. R. Russell, M. Paterson, “Cordyceps – A traditional Chinese medicine and anotherfungal therapeutic biofactory” Phytochemistry, vol. 69, pp. 1469–1495, 2008.