Hợp chất A18 thu được từ phân đoạn cao acetone của loài địa y Parmotrema tsavoense là chất bột, màu trắng.
Phổ 1H-NMR, 13C-NMR (Acetone - d6, phụ lục 11, 12)
Phổ HSQC, HMBC (Acetone - d6, phụ lục 13, 14a, 14b).
Phổ HR-ESI-MS (phụ lục 15). Biện luận cấu trúc
Phổ 1H-NMR ở vùng từ trường yếu cho thấy sự hiện diện của một nhóm hydroxyl kiềm nối tại δH 11.31 (1H, s), hai tín hiệu proton của nhóm olefin mũi đôi tại δH 8.11 (1H, d, J = 16.5Hz), δH 7.23 (1H, d, J = 16.5 Hz) ghép đôi với nhau với hằng số ghép J = 16.5Hz giúp xác định cấu hình trans của chúng. Ngoài ra phổ còn cho thấy hai tín hiệu của hai proton gắn trực tiếp vào vòng thơm tại δH 6.69 (1H, s) và δH 6.58 (1H, s), một tín hiệu của nhóm methylene mũi đơn tại δH 4.09 (2H, s), một tín hiệu của nhóm methoxy mũi đơn tại δH 3.86 và năm tín hiệu của nhóm methyl mũi đơn tại δH 2.49 (3H, s), 2.34 (3H, s), 2.31 (3H, s), 2.11 (3H, s), 2.08 (3H, s).
Phổ 13C-NMR kết hợp với phổ HSQC cho thấy hợp chất A18 có sự hiện diện của hai carbon olefin (δC 133.0 và 131.2), hai carbon methine thơm (δC 115.8 và 113.0), một nhóm methylene (δC 21.5), một nhóm methoxy (δC 51.1) và năm nhóm methyl (δC 27.6, 19.3, 18.4, 17.3 và 8.7) và các carbon tứ cấp khác.
Phổ 1H-NMR kết hợp với phổ HSQC giúp xác định hai tín hiệu proton olefin ghép
trans với nhau với hằng số ghép 16.5 Hz tại δH 8.11 (δC 133.0, C-8) và δH 7.23 (δC 131.3, C-10). Ngoài ra phân tích độ dịch chuyển hóa học của 2 proton này chứng tỏ phải có sự cộng hưởng với nhóm C=O lân cận (–CH=CH-C(O)-).
của vòng B và C nhưng có sự khác nhau trên vòng A. Đó là sự biến mất của nhóm aldehyde ở ví trí C-8 và đồng thời xuất hiên thêm các tín hiệu của một nhóm but-1-en- 3-onyl. Trên phổ HMBC nhận thấy sự tương quan của proton H-8 với những carbon tại δC 114.0 (C-3), 162.9 (C-4), 197.2 (C-11) và proton nhóm methyl CH3-12 tương quan với những carbon tại δC 131.2 (C-10) và 197.2 (C-11) giúp xác định sự hiện diện của nhóm thế but-1-en-3-onyl (-CH=CH-C(O)-CH3-) tại C-3.
Ngoài ra, khối phổ phân giải cao của hợp chất A18 xuất hiện mũi ion giả phân tử tại
m/z bằng 547.1605, tương ứng với công thức phân tử C30H27O10. Theo tính toán dựa trên cấu trúc đã xác định, nhận thấy ion [M-H]- có giá trị m/z là 547.1600, chênh lệch 0.5‰. Từ đó giúp khẳng định một lần nữa cấu trúc của hợp chất A18. Vậy hợp chất A18 có cấu trúc được xác định như hình 3.3 và được đặt tên là parmosidone H.
Hình 3.3: Cấu trúc hóa học và một số tương quan HMBC của A18
3.4.Khảo sát cấu trúc hợp chất 6C
Hợp chất 6C thu được từ phân đoạn cao acetone của loài địa y Parmotrema tsavoense là chất bột, màu trắng đục.
Phổ 1H-NMR, 13C-NMR (Acetone-d6, DMSO-d6, phụ lục 16, 17).
Phổ HMBC (DMSO-d6, phụ lục 18a, 18b).
Phổ HR-ESI-MS (phụ lục 19). Biện luận cấu trúc
Phổ 1H-NMR của hợp chất 6C ở vùng từ trường yếu cho thấy sự hiện diện hai tín hiệu của nhóm aldehyde tại δH 10.77 (1H, s), δH 10.28 (1H, s). Ngoài ra phổ 1H-NMR còn cho thấy một tín hiệu cộng hưởng của một proton gắn với vòng thơm mũi đơn tại δH 6.74 (1H, s), một tín hiệu của nhóm methylene mũi đơn tại δH 4.01 (2H, s) và một tín hiệu của một proton của một nhóm methoxy mũi đơn tại δH 3.83. Bên cạnh đó, còn có
(1H, s), δH 2.43 (1H, s).
Phổ 13C-NMR cho thấy hợp chất 6C có sự hiện diện của một carbon methine thơm (δC 117.4), một nhóm methylene (δC 21.2), một nhóm methoxy (δC 52.4) với một nhóm methyl (δC 18.8) và các carbon tứ cấp khác.
So sánh dữ liệu phổ 13C-NMR của hợp chất 6C và acid furfuric cho thấy có sự tương đồng của vòng A và B nhưng có một sự khác nhau ở vòng C. Đó là sự thay thế của nhóm 3″- CHO (δH 10.28) trong 6C cho nhóm 3″- CH3 trong 10.15 trên nhân thơm C. Trên phổ HMBC cho thấy proton của nhóm aldehyde CHO-8″ và proton của nhóm methylene tương quan với carbon tại δC 162.9 (C-4″) giúp xác định vị trí của nhóm này tại C – 3″ trên nhân thơm C.
Ngoài ra, khối phổ phân giải cao của hợp chất 6C xuất hiện mũi ion giả phân tử tại
m/z bằng 565.0987, tương ứng với công thức phân tử C28H22O13. Theo tính toán dựa trên cấu trúc đã xác định, nhận thấy ion [M-H]- có giá trị m/z là 565.1000, chênh lệch 1.3‰. Từ đó giúp khẳng định một lần nữa cấu trúc của hợp chất 6C. Vậy hợp chất 6C có cấu trúc được xác định như hình 3.4 và được đặt tên là parmosidone L.
A18 (Acetone - d6) 10.15 (CDCl3) Vị trí carbon δH (ppm) J (Hz) δC (ppm) δH (ppm) J (Hz) δC (ppm) 1 114.3 112.5 2 - 165.3 3 114.0 111.8 4 162.9 165.4 5 6.69 (s) 115.8 6.65 (s) 117.2 6 145.5 153.7 7 - - 8 8.11 (d, 16.5) 133.0 10.66 (s) 193.6 9 2.11 (s) 18.4 2.34 (s) 21.7 10 7.23 (d, 16.5) 131.3 - 11 197.2 - 12 2.34 (s) 27.6 - 1′ 6.58 (s) 113.0 6.48 (s) 114.6 2′ 152.6 151.7 3′ 117.4 117.2 4′ 143.9 142.8 5′ 144.3 143.3 6′ 128.5 128.2 7′ 4.09 (s) 21.5 4.11 (s) 21.1 8′ 2.31 (s) 17.3 2.31 (s) 17.3 1″ 106.2 107.3 2″ - 159.8 3″ 109.3 108.2 4″ 159.2 156.1 5″ 118.0 116.7 6″ 107.9 138.5 7″ 173.3 172.3 8″ 2.08 (s) 8.0 2.12 (s) 8.0 9″ 2.49 (s) 19.3 2.54 (s) 19.1 7″- OCH3 3.86 (s) 51.1 3.89 (s) 51.9 2′- OH 11.31 (s) - - - 4 - OH - 12.12 (s) 2″- OH - 11.42 (s)
6C (DMSO - d6) Acid furfuric (Acetone - d6) Vị trí carbon δH (ppm) J (Hz) δC (ppm) δH (ppm) J (Hz) δC (ppm) 1 112.5 112.7 2 - 164.0 3 - 111.7 4 164.6 163.7 5 6.74 (s) 117.5 6.76 (s) 116.9 6 151.9 151.6 7 - 160.7 8 10.77 (s) - 10.55 (s) 191.7 9 2.43 (s) 20.3 2.25 (s) 20.4 1′ 130.5 142.5 2′ - 145.4 3′ - 113.7 4′ 146.4 155.9 5′ 142.2 118.5 6′ 114.3 134.7 7′ 4.01 (s) 21.2 3.97 (s) 21.4 8′ 2.76 (s) - 2.23 (s) 14.4 9′ - 171.0 1″ 113.7 109.5 2″ - 157.2 3″ - 113.7 4″ 162.9 156.6 5″ 118.2 119.7 6″ 146.8 128.6 7″ 168.4 171.1 8″ 10.28 (s) - 1.96 (s) 9.9 9″ 2.62 (s) 18.8 2.43 (s) 17.8 7″- OCH3 3.83 (s) 52.4 3.86 (s) 51.7
4.1. KẾT LUẬN
Việc khảo sát và nghiên cứu thành phần hóa học trong cao acetone của địa y
Parmotrema tsavoense đã thu được những kết quả sau:
Sử dụng các phương pháp trích ly, chiết xuất, sắc kí đã cô lập được từ cao acetone bốn hợp chất được kí hiệu là T1A, 10.15, A18, 6C.
Bằng các phương pháp phổ nghiệm và so sánh với tài liệu tham khảo, các hợp chất trên được đề nghị là:
Các hợp chất trên đều là những hợp chất mới lần đầu được tìm thấy trong địa y
Parmotrema tsavoense.
4.2. KIẾN NGHỊ
Trong phạm vị của luận văn, tôi chỉ mới phân lập đươc 6 hợp chất trong cao acetone. Trong thời gian tới, nếu đủ điều kiện, tôi sẽ tiếp tục khảo sát những phân đoạn khác của cao acetone với hi vọng phân lập được nhiều hợp chất khác.
[1] Ahmadjian V., Nilsson S. Swedish Lichens. Yb. Am. Swed. Hist. Fdn., 1963. [2] Atalay F., Halici M. B., Mavi A., Cakir A., Odabasoglu F., Kazaz C., Aslan A.,
Kufrevioglu O. I., “Antioxidant phenolics from Lobaria pulmonaria (L.) Hoffm and Usnea longissima Ach. lichen species”, Turk J. Chem., 35, pp. 647–661, 2011.
[3] Barrington E. J. W., Willis A. J., “The biology of lichens: Contemporary biology”, 2nd edition, Edward Arnold, London, 10, pp. 159–163, 1974.
[4] Boustie J., Grube M., “Lichens - a promising source of bioactive secondary metabolites”, Plant Genetic Resources, 3, pp. 273 – 287, 2005.
[5] Boustie J., Tomashi S., Grube M., “Bioactive lichen metabolites: alpine habitats as an untapped source”, Phytochemistry Review, 10(3), pp. 287–307, 2011. [6] Bui T. L. A., Duong T. H., “Chemical constituents of the lichen Parmotrema
tsavoense (Krog & Swincow) Krog & Swincow”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, 78, pp. 119 125, 2015.
[7] Bui T. L. A., Duong T. H., “Some phenolic compounds from the lichen
Parmotrema-sancti-angelii”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, 64, pp. 3541, 2015.
[8] Bugni T. S., Andjelic C. D., Pole A. R., Rai P., Ireland C. M., Barrows L. R., “Biologically active components of a Papua New Guinea analgesic and anti- inflammatory lichen preparation”, Fitoterapia, 80, pp. 270–273, 2009.
[9] David F., Elix J. A., Binsamsudin M. W., “Two new aliphatic acids from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale”, Australian Journal of Chemistry, 43, pp. 1297–1300, 1990.
[10] Devehat F. L.L., Tomasi S., Elix J. A., Bernard A., Rouaud I., Uriac P., Boustie J., “Stictic acid derivatives from the lichen Usnea articulate and their antioxidant activities”, J. Nat. Prod, 70, pp. 1218–1220, 2007.
[11] Duong T. H., “A new monoaromatic compound from the lichen Parmotrema tsavoense (Krog & Swinscow) Krog & Swinscow (Parmeliaceae)”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh,14 (3), pp. 1217, 2017.
phenolic compounds of the lichen Parmotrema planatilobatum (Hale) Hale (Parmeliaceae)”, Journal of Science and Technology Development, 14(6), pp. 5– 10, 2011.
[13] Duong T. H., Huynh B. L. C., Ha X. P., Tuong L. T., Ton T. Q., Boustie J., Nguyen K. P. P., “New diphenyl ether from lichen Parmotrema planatilobatum
(Hale) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, 50(4A), pp. 199–202, 2012.
[14] Duong T.H., Beniddir M.A., Grégory G.J., Thammarat A. , Marylène C. K., Boustie J., Ferron S., Sauvager A., Nguyen H.H., Nguyen K.P.P., Chavasiri W., and Pogam P.L., “Tsavoenones A–C: unprecedented polyketides with a
1,7-dioxadispiro[4.0.4.4]tetradecane core from the lichen Parmotrema
tsavoense”, Org. Biomol. Chem., 16, pp. 5913–5919, 2018.
[15] Duong T. H., Tran T. T. T., “Collatolic acid derivatives from lichen Parmotrema planatilobatum (Hale) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, 64, pp. 3541, 2014.
[16] Duong T. H., Tran T. T. T., “Some hopanes and ergostanes from the lichen
Parmotrema-sancti-angelii”, Tạp chí khoa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, 67, pp. 1320, 2015.
[17] Duong T. H., Ha X. P., Warinthorn C., Mehdi A. B., Jouve G. G., Boustie J., Krugler M. C., Ferron S., Nguyen H. H., Bohari M. Y., Huynh B. L. C., Pierre L. P., Nguyen K. P. P., “Santis A-C: Three Racemic Procyanidin Analogues from The Lichen Parmotrema sancti-angelii”, Eur.J.Org.Chem, pp. 2247-2253, 2018.
[18] Duong T. H., Warinthorn C., Boustie J., Nguyen K. P. P., “New meta-depsidones and diphenyl ethers from the lichen Parmotrema tsavoense (Krog & Swinscow) Krog & Swinscow, Parmeliaceae”, Tetrahedron, 71, pp. 96849691, 2015. [19] Fazio A. T., Bertoni M. D., Adler M. T., “Culture studies on the mycobiont
isolated from Parmotrema reticulatum (Taylor) Choisy: metabolite production under different conditions”, Mycological Progress, 8(4), pp. 359–365, 2009.
Lopes T. I. B., Misutsu M. Y., Beatriz A., Bruma R. L., Leite C. Q. F. “Antimycobacterial activity of lichen substances”, Phytomedicine, pp. 1−5, 2009.
[21] Huneck S., “The significance of lichens and their metabolites”, Naturwissenschaften, 86, pp. 559 – 570, 1999.
[22] Huynh B. L. C., Duong T. H., Do T. M. L, Pinnock T. G., Pratt L. M., Shigeki Y., Hitoshi W., Takao T., Nguyen K. P. P., “New γ-lactone carboxylic acids from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale, Parmeliaceae”, Rec. Nat. Prod., 10(3), pp. 332−340, 2016.
[23] Huynh B. L. C., Duong T. H., Takao T., Nguyen K. P. P., “Two new compounds from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale (Parmeliaceae)”,
Vietnam Journal of Science and Technology, 49(5B), pp. 430−435, 2011. [24] Huynh B. L. C., Le H. D., Yukiko T., Takao T., Nguyen K. P. P., “New phenolic
compounds from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale (Parmeliaceae), Parmeliaceae”, Magn. Reson. Chem., 51, pp. 84−87, 2016. [25] Javaprakasha G. K., Rao L. J., “Phenolic constituents from the lichen
Parmotrema stuppeum (Nyl.) Hale and their antioxidant activity”, Zeitschrift für Naturforschung [C], 55, pp. 1018−1022, 2000.
[26] Keogh M. F., “Malonprotocetraric acid from Parmotrema conformatum”,
Phytochemistry, 16(7), pp. 1102, 1997.
[27] Kharel M. K., Rai N. P., Manandhar M. D., Elix J. A., Wardlan J. H. “Dehydrocollatolic acid, a new depsidone from the lichen Parmotrema nilgherrense”, Australian Journal of Chemistry, 53, pp. 891−892, 2000.
[28] Micheletti A. C., Beatriz A., Lima D. P. de, Honda N. K., “Chemical constituents of Parmotrema lichexanthonicum Eliasaro & Adler – Isolation, structure modification and evaluation of antibiotic and cytotoxic activities”, Química Nova, 32, pp. 12−20, 2009.
[29] Le H. D., “Chemical study of common lichens in the south of Vienam”, A thesis for Doctor of Philosophy, Kobe Pharmaceutical Univ., pp. 7−29, 2012.
Microbiology and Biotechnology, 56, pp. 9−16, 2001.
[31] Neeraj V., Behera B. C., Parizadeh H., Bo S., “Bactericidal activity of some lichen secondary compounds of Cladonia ochrochlora, Parmotrema nilgherrensis and Parmotrema sancti-angelii”, International Journal of Drug Development and Research, 3(3), pp. 222−232, 2011.
[32] O’Donovan D. G., Robert G., Keogh M. F., “Structure of the β-orcinol depsidones, connorstictic acid and consalazinic acid”, Phytochemistry, 19, pp. 2497−2499, 1980.
[33] Ramesh P., Shere E., Baig A., “Chemical investigation of South Indian lichen: Parmelia praesorediosa (Nyl.) and Parmelia reticulate (Tayl.)”, Indian Journal of Heterocyclic Chemistry, 3(3), pp. 211−212, 1994.
[34] Sakurai A., Goto Y., “Chemical studies on the lichen. I. The structure of isolecanoric acid, a new ortho-depside isolated from Parmelia tinctorum
Despr.”, Bulletin of the Chemical Society of Japan, 60, pp. 1917−1918, 1987. [35] Santos L. C., Honda N.K., Carlos I. Z., Vilegas W., “Intermediate reactive
oxygen and nitrogen from macrophages induced by Brazilian lichens”,
Fitoterapia, 75, pp. 473−439, 2004.
[36] Yit H. C., “Generic potential of lichen-forming fungi in polyketide biosynthesis”, A thesis for Doctor of Philosophy, RMIT University, pp. 10-15, 2008.
[M
-H]
-