➢ Hóa chất: Các hóa chất được sử dụng trong nghiên cứu đều là hóa chất tinh khiết
được cung cấp bởi các hãng có uy tín trên thế giới như: Sigma, Merk, Fermantas, Biobasic, v.v...
- Chuẩn bị cơ chất:
+ Các hợp chất hydrocarbon thơm hầu như đều ít tan trong nước, được pha trong acetone, bảo quản trong lọ tối màu và bảo quản trong tối, tránh ánh sáng mặt trời. o Stock toluene 10.000 ppm: pha 200 μl toluene trong 20 ml acetone.
o Stock naphthalene 50.000 ppm: pha 0,5 g naphthalene trong 10 ml acetone. o Stock pyrene 50.000 ppm: cân 0,5g pyrene hòa tan trong 10 ml acetone.
+ Dầu diesel, dầu thô nguyên chất được xử lý sơ bộ qua giấy lọc có kích thước lỗ 8 μm, hãng sản xuất Whatman – Anh.
➢ Môi trường nuôi cấy
Môi trường DSMZ 27 ở dạng lỏng (nuôi dịch) và dạng rắn (có bổ sung agar 18-20 g/l) được dung để để phân lập, nuôi cấy và giữ giống [126]. Môi trường trước khi sử dụng được khử trùng ở 121oC trong 30 phút.
- Dung dịch vi lượng SL6(mg/l) [127]: H3BO3 0,3 g; MnCl2.2H2O 0,03g; CoCl2.6H2O 0,2g; ZnSO4.7H2O 0,1 g; CuCl2.2H2O 0,01 g; NiCl2.6H2O 0,02 g; NaMoO4.2H2O 0,03 g.
- Dung dịch vitamin B12: 10 mg trong 100 ml nước được khử trùng bằng màng lọc có kích thước lỗ 8 μm và bổ sung vào môi trường trước khi sử dụng (tỷ lệ 0,4 ml/l). - Môi trường DSMZ 27 cải tiến là môi trường DSMZ 27 trong đó nguồn carbon
được thay thế bằng các nguồn hydrocarbon khác nhau như phenol, naphthalene, pyrene, toluene ở nồng độ 50, 100, 150, 200, 250 và 300 ppm.