Chuẩn bị huyền phù hồng cầu thỏ 2 %. Máu được rửa từ 3 đến 5 lần với 50 lần thể tích dung dịch NaCl 0,15 M. Sau khi rửa, cho dung dịch enzyme trypsin 0,5 % (w/v) vào huyền phù hồng cầu, trộn đều và ủ ở 37 oC trong 60 phút. Sau khi ủ, hồng cầu các mẫu máu được rửa từ 3 đến 5 lần với dung dịch muối và hòa lại bằng dung dịch đệm phosphate 0,02 M có chứa NaCl 0,15 M, pH = 7,2. Ta thu được huyền phù hồng cầu các mẫu máu 2 % đã xử lý enzyme trypsin [37].
Hoạt tính của lectin được xác định dựa trên phương pháp ngưng kết hồng cầu [37]. Các thí nghiệm phân tích hoạt tính của lectin được thực hiện trong đĩa 96 giếng đáy chữ V. Đầu tiên, cho 25 µL dung dịch đệm phosphate 0,02 M có chứa NaCl 0,15 M, pH = 7,2 vào mỗi giếng của đĩa 96 giếng đáy chữ V. Tiếp đến cho 25 µL mẫu dịch chiết lectin cần phân tích hoạt tính ngưng kết hồng cầu vào giếng đầu tiên, trộn đều, pha loãng sang các giếng tiếp theo và giữ ở nhiệt độ phòng trong khoảng thời gian 1 giờ. Sau đó, tiếp tục thêm 25 µL hồng cầu 2 % vào tất cả các giếng, lắc nhẹ hỗn hợp và giữ ở nhiệt độ phòng trong 2 giờ.
48
Kết quả dương tính được thể hiện khi hình thành một lớp chất keo đồng nhất trên bề mặt giếng. Kết quả thử nghiệm là âm tính khi tất cả hồng cầu lắng xuống đáy giếng thành chấm nhỏ. Hoạt tính của lectin (HU/mL) được thể hiện như là một tiêu chuẩn, và là giá trị nghịch đảo của độ pha loãng lớn nhất mà dịch chiết lectin còn có khả năng làm ngưng kết hồng cầu cho vào phản ứng.