Hợp chất RG3: Acteoside
Hợp chất RG3 phân lập đƣợc dạng màu trắng, vô định hình. Công thức phân tử là C29H36O15 ứng với khối lƣợng phân tử 624 đvC.
Hình 3.19. Cấu trúc hóa học của hợp chất RG3
Trên phổ 1H-NMR của hợp chất RG3 thấy xuất hiện các tín hiệu proton đặc trƣng cho 2 vòng thơm thuộc hệ tƣơng tác spin-spin ABX tại H 6.72 (brs), 6.74 (d, J = 8.5 Hz) và 6.59 (d, J = 8.5 Hz); 7.08 (brs), 6.80 (d, J = 8.5 Hz) và 6.98 (d, J = 8.5 Hz). Ngoài ra phổ 1H-NMR còn có tín hiệu của 2 proton
33
olefin tại H 7.62 (d, J = 16.0 Hz) và 6.30 (d, J = 16.0 Hz). Đồng thời cũng xuất hiện tín hiệu của 2 proton anome tại H 4.39 (d, J = 7.5 Hz) và 5.21 (brs) và 1 nhóm methyl bậc hai tại H 1.12 (d, J = 6.5 Hz).
Hình 3.20. Phổ 1H-NMR của hợp chất RG3
34
Phổ 13C-NMR và HSQC của hợp chất RG3 xuất hiện tín hiệu của 29 carbon,
trong đó có 7 carbon không liên kết trực tiếp với hydro tại C 168.3, 149.8, 146.8, 146.1, 144.6, 131.5 và 127.7; 18 carbon methine tại C 148.0, 123.2, 121.3, 117.1, 116.5, 116.3, 115.3, 114.7, 104.2, 103.0, 81.6, 76.2, 76.0, 73.8, 72.3, 72.1, 70.6 và 70.4; 3 carbon methylene tại C 72.2, 62.4 và 36.5 cùng 1 carbon của nhóm methyl tại C 18.4.
Phân tích các số liệu phổ 1H, 13C-NMR gợi ý hợp chất RG3 là một phenolic glycoside. Giá trị của H và C tƣơng ứng đƣợc quy kết dựa vào tƣơng tác trên phổ HSQC. Trên phổ HMBC xuất hiện tƣơng tác giữa H-5 (H 6.74) với C-1 (C 131.5) / C-3 (C 144.6) / C-4 (C 146.1) / C-6 (C 121.3); giữa H-2 (H 6.72) với C-4 (C 146.1); giữa H-6 (H 6.59) với C-2 (C 117.1) / C-4 (C 146.1) / C-5 (C 116.3) gợi ý vị trí của 2 nhóm hydroxyl tại C-3 và C-4 của nhóm Phe.
35
Hình 3.23. Phổ HMBC của hợp chất RG3
Bảng 3.3. Số liệu phổ NMR của hợp chất RG3 và hợp chất tham khảo
C δC# δCa,b δHa,c (mult., J = Hz) Phe 1 131.5 131.5 - 2 116.6 117.1 6.72 (brs) 3 144.7 144.6 - 4 146.1 146.1 - 5 117.2 116.3 6.74 (d, 8.5) 6 121.3 121.3 6.59 (d, 8.5) α 72.4 72.2 3.75 (m)/4.07 (m) β 36.6 36.5 2.82 (m) Caf 1' 127.6 127.7 - 2' 114.6 115.3 7.08 (brs) 3' 149.8 149.8 - 4' 146.8 146.8 -
36 5' 116.4 116.5 6.80 (d, 8.5) 6' 123.4 123.2 6.98 (d, 8.5) α' 148.0 148.0 7.62 (d, 16.0) β' 115.3 114.7 6.30 (d, 16.0) C=O 168.3 168.3 - Glu 1" 104.2 104.2 4.39 (d, 7.5) 2" 76.0 76.2 3.42 (t, 8.5) 3" 81.7 81.6 3.85 (t, 9.0) 4" 70.4 70.6 4.94 (t, 9.0) 5" 76.2 76.0 3.55 (m) 6" 62.4 62.4 3.53 (d, 12.0) 3.62 (d, 12.0) Rha 1"' 103.0 103.0 5.21 (brs) 2"' 72.1 72.3 3.94 (brs) 3"' 72.3 72.1 3.60 (brd, 9.0) 4"' 73.8 73.8 3.32 (t, 9.0) 5"' 70.6 70.4 3.58 (m) 6"' 18.5 18.4 1.12 (d, 6.5)
a)Đo trong CD3OD, δC#
của Acteoside đo trong CD3OD [32]
Vị trí của các nhóm hydroxyl tại C-3 và C-4 của nhóm cafeoyl (Caf) đƣợc xác định dựa trên tƣơng tác HMBC giữa H-6 (H 6.98) với C-2 (C 115.3) / C-4 (C 146.8), giữa H-2 (H 7.08) với C-3 (C 149.8) / C-4 (C 146.8). Tƣơng tác HMBC giữa H-β (H 2.82) với C-1 (C 131.5) / C-2 (C 117.1) / C-6 (C 121.3) / C-α (C 72.2); giữa H-α (H 3.75/4.07) với C-β (C 36.5) / C-1 (C 131.5) / C-1 (C 104.2) cho biết vị trí của 2 nhóm methylene và phân tử glucose tại nhóm methylene α. Vị trí đƣờng rhamnose tại C-3 của đƣờng glucose đƣợc xác định thông qua tƣơng tác giữa rha H-1 (H 5.21) với glu
37
C-3 (C 81.6). Tƣơng tác HMBC giữa H-2 (H 7.08) với C-4 (C 146.8) / C- 6 (C 123.2) / C-β (C 114.7); giữa H- (H 7.62) với C-1 (C 127.7) / C-2
(C 115.3) / C-6 (C 123.2) / C=O (C 168.3); giữa H-β (H 6.30) với C-1 (C 127.7) / C=O (C 168.3) và tƣơng tác HMBC giữa H-3 (H 3.85) với C-3
(C 81.6) / C-5 (C 76.0) / C-6 (C 62.4) / C=O (C 168.3); đồng thời giá trị hằng số tƣơng tác của 2 proton olefin J = 16.0 Hz cho thấy cấu hình nhóm
caffeoyl của hợp chất RG3 có dạng trans và nhóm caffeoyl với đƣờng
glucose tại C-3. Dựa trên các dữ liệu phổ của hợp chất RG3, kết hợp so sánh với hợp chất tham khảo, cấu trúc của hợp chất RG3 đƣợc xác định là một hợp chất phenylpropanoid glycoside đã biết có tên là acteoside [32].
Hình 3.24. Một số tƣơng tác HMBC chính của hợp chất RG3