I – Thu nhận và phân lập vi khuẩn acetic.
2- Phân lập chủng vi khuẩn acetic
a. Thành phần môi trờng gồm: Pepton: 10g
Sữa bột : 10g Agar : 20g Nớc:1000ml
b. Quy trình tạo môi trờng vô trùng nuôi vi khuẩn acetic.
Kết quả:
- Tạo ra môi trờng dinh dỡng vô trùng tuyệt đối, đạt tiêu chuẩn
- Bảo quản ở tủ lạnh đợc lâu dài trong nhiều tháng, trong suốt quá trình nghiên cứu.Từ đó phân lập đợc chủng vi khuẩn thuần khiết.
Đun nóng, khuấy tan Lọc
Nút ống nghiệm, bình tam giác bằng bông, bao bằng giấy không thấm nước
Thanh trùng ở 1 atm, 30 phút
Tạo ống thạch nghiêng và phân phối vào đĩa petri vô trùng
Cho vào các bình tam giác và ống nghiệm vô trùng
Cân chính xác, đầy đủ các loại hoá chất trên
c. Nuôi cấy vi khuẩn trên môi trờng đĩa thạch. Quy trình:
Dung dịch váng giấm Đĩa thạch vô trùng
Đem vào buồng cấy đã vô trùng bằng tia tử ngoại
Cấy vào đĩa thạch
Nuôi trong tủ ấm ở điều kiện 300C
Theo dõi sự hình thành và phát triển của khuẩn lạc
Kiểm tra khuẩn lạc của vi khuẩn acetic
Cấy truyền sang ống nghiệm
Kết quả:
Phân lập từ váng giấm cho thấy:
Các chủng vi sinh vật bị nhiễm nhiều loại .
Vi sinh vật lên men acetic có nhiều loại nh A.aceti, A.pasteurianum, A.xylium, A.subooxydans. Trong số vi khuẩn lên men làm sao hạn chế đợc sự có mặt của A.perooxydaza và A. pasteurianum vì những vi khuẩn
này lên men acetic tích luỹ tạm thời. Lên men acetic, ngời ta thờng chọn giống vi sinh vật A.aceti, A.subooxydans để lên men có hiệu suất cao. ở đây cần tìm một chủng có khả năng lên men hiệu quả nhất – Acetobacter aceti.
Từ đó phân lập chủng này để tiếp tục nghiên cứu.