L ỜI CẢ MƠ N!
3.3.4.Các chỉ tiêu theo dõi
3.3.4.1. Các chỉ tiêu sinh trưởng phát triển
- Chiều cao cây (cm): ño từ ñỉnh thân hành ñến mút lá cao nhất (mỗi dòng giống ño 5 cây, ño khi cây bắt ñầu ra hoa).
- Chiều dài, chiều rộng lá ñể so sánh các giống khác nhau: mỗi dòng giống ño 3 cây, mỗi cây ño 3 lá ổn ñịnh về hình thái.
- ðường kính thân hành (cm): mỗi giống ño 5 cây. Cách ño: dùng thước Palme ño ñường kính thân hành khi cây ra hoa ñối với cây bố và các cây con ở các tổ hợp lai.
- ðộ dày lá (mm): mỗi giống lấy 3 cây, mỗi cây ño 1 lá và ño 30 lần. Dùng dao lam
cắt một lát mỏng ở giữa phiến lá, ñặt lên lam kính, soi trên kính hiển vi (có thước ño thị kính) ở vật kính 4. ðo ở vị trí dày nhất của lá và ñếm số vạch nhỏ trên thước ño thị kính. ðộ dày lá ñược tính như sau:
ðộ dày lá = số vạch trên thước ño thị kính x 25 (µm)
Trong ñó, 25 (µm) là chiều dài một vạch của thước ño thị kính ở vật kính 4. Kết quả ñược kế thừa theo phương pháp tính của bộ môn Thực vật – Trường ñại học Nông nghiệp Hà Nội.
3.3.4.2. Các chỉ tiêu về cơ quan sinh sản
- Chiều dài ngồng hoa (cm): ño bằng thước thẳng, mỗi dòng giống tiến hành ño 5 cây, mỗi cây ño 2 ngồng.
- ðường kính ngồng hoa (cm): ño bằng thước Palme, theo dõi mỗi dòng
giống 5 cây, mỗi cây ño 2 ngồng hoa.
- Màu sắc hoa; màu sắc gốc cánh hoa: quan sát và mô tả - Màu sắc chỉ nhị và bao phấn: quan sát và mô tả
- Lông ở gốc cánh hoa: quan sát và mô tả - Số hoa trên cụm hoa: quan sát và ghi chép
- ðường kính hoa khi hoa nở hết: ño bằng thước thẳng (cm)
- Kích thước cánh hoa: Mỗi dòng giống tiến hành ño chiều dai, chiều rộng 5 cây, mỗi cây ño 1 hoa, mỗi hoa ño 3 cánh vòng trong và 3 cánh vòng ngoài.
- Chiều dài nhị, kích thước bao phấn (cm): mỗi dòng giống ño 5 cây, mỗi cây ño 2 hoa.
- ðường kính bầu nhụy (µ); chiều dài bầu nhụy (cm); chiều dài vòi nhụy (cm): mỗi dòng giống tiến hành ño 5 cây, mỗi cây ño 2 hoa.
- ðộ bền cụm hoa: quan sát ghi chép (tính từ khi hoa ñầu tiên bắt ñầu nở ñến lúc hoa cuối tàn), tiến hành theo dõi 5 cây mỗi dòng giống, 1 cây theo dõi 2 hoa.
- Thời gian hoa nở trong năm (tháng) : quan sát và ghi chép
- ðộ dày cánh hoa (mm): mỗi giống lấy 3 cây, mỗi cây ño 1 lá và ño 30 lần. Làm tương tự như ño ñộ dày lá, cắt lát mỏng ở phần giữa và phần mép của cánh
hoa, ñặt lên lam kính rồi quan sát dưới kính hiển vi ở vật kính 4. Cách tính ñộ
dày cánh hoa cũng tương tự như cách tính ñộ dày lá.
- Thời gian nở hoa trong ngày, thời gian chín của nhị, nhụy sau khi hoa nở, chênh lệch thời gian chín giữa nhị và nhụy của các giống: quan sát ghi chép sau hoa nở
- Sức sống hạt phấn khi vừa tung phấn; Sức sống hạt phấn khi nhụy chín ở cùng một hoa; Sức sống hạt phấn trong thời gian bảo quản (ñược xác ñịnh bằng
phương pháp nhuộm màu với I-KI 1%). Tiến hành quan sát 5 trường kính mỗi dòng giống ñể xác ñịnh sức sống hạt phấn.
- Tỉ lệ ñậu quả (%): số quả ñậu/ tổng số lần lai của một tổ hợp lai ( 5 lần). - Sự tăng trưởng kích thước quả, ñặc ñiểm hình thái quả khi chín : ño kích thước của 10 quả ñối với mỗi dòng giống bằng thước Palme.
- Tỷ lệ hạt chắc, hạt lép trong quả lai, ñặc ñiểm hạt lai: Tiến hành ñếm 10 quả trên một dòng giống khi quả chín.Tỷ lệ hạt chắc theo công thức:
Số hạt chắc × 100 Tỉ lệ hạt chắc(%) =
Tổng số hạt Tỉ lệ hạt lép(%) = 100 - Tỉ lệ hạt chắc
- Khả năng nảy mầm của hạt ở một số tổ hợp lai: ñếm tỷ lệ nảy mầm của hạt, xác ñịnh thời ñiểm bắt ñầu nảy mầm, thời gian nảy mầm tập trung của hạt, thời gian kết thúc nảy mầm. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.3.4.3. Các chỉ tiêu trong phòng
- Hình thái hạt phấn: lấy phấn tươi (khi bao phấn vừa nứt) làm tiêu bản hạt phấn quan sát dưới kính hiển vi quang học rồi mô tả.
Xác ñịnh sức sống hạt phấn bằng phương pháp nhuộm màu với dung dịch I -
KI 1%, theo phương pháp tiếp thu của Bộ môn Di truyền giống - ðHNN Hà Nội.
+ Cách pha dung dịch I - KI 1%:
Cân 0.25g I2 cho vào 10 ml cồn 96o, lắc kỹ cho tan hết
Cân 0.25g KI cho vào 15 ml nước cất, lắc cho tan hết
Trộn lẫn 2 dung dịch với nhau, lắc ñều ñược dung dịch I - KI 1%. + Làm tiêu bản hạt phấn:
Nhỏ một giọt dung dịch I-KI 1% lên lam kính sạch
Dùng kim mũi mác nhẹ nhàng lấy hạt phấn hoà vào giọt dung dịch, khẽ hoà ñều cho hạt phấn tách rời nhau. ðậy lamen sao cho tiêu bản không có bọt
- Kích thước hạt phấn (µm): tiến hành ño kích thước hạt phấn ở vật kính 40. Xoay thước ño thị kính sao cho thước ño trong trường kính trùng với chiều
dài hạt phấn ñể ño chiều dài hạt phấn và vuông góc với chiều dài ñể ño chiều
rộng hạt phấn. ðếm số vạch nhỏ trên thước ño thị kính. Kích thước hạt phấn
ñược tính theo công thức:
Kích thước hạt phấn = số vạch trên thước ño thị kính × 2,5(µm)
Trong ñó 2,5 (µm) là ñộ dài một vạch trên thước ño thị kính ở vật kính 40.
- Xác ñịnh sức sống hạt phấn khi vừa tung phấn; qua các thời gian bảo
quản khác nhau; khi nhụy chín: quan sát tiêu bản hạt phấn, ñếm số hạt phấn bắt màu xanh sẫm, số hạt phấn không bắt màu, số hạt phấn bắt màu nhạt và hạt phấn dị dạng ở 5 trường kính khác nhau của 1 dòng giống hoa Loa kèn, sau ñó tính tỉ lệ hạt phấn có sức sống theo công thức:
Số hạt phấn bắt màu sẫm × 100 Số hạt phấn có sức sống tốt (%) =
Tổng số hạt phấn