Dựa vào ñặc ñiểm hình thái ñể thu mẫu, ñịa ñiểm thu mẫu, số mẫu ñược phân tích hình thái và ADN ñược trình bày ở Bảng 3.1 và Hình 3.1.
Hồ Thác Bà là hồ chứa lớn nên mẫu cá Tiểu bạc ñược thu từ 10 ñiểm ñại diện vùng nước nông, sâu, bãi ñẻ... mỗi ñiểm thu 30 mẫu cá. Mẫu ñược thu vào ban ñêm bằng phương pháp cất vó kết hợp với ánh sáng ñèn hoặc kéo lưới vét vào ban ngày.
Mẫu ñược thu với 2 mục ñích ñó là dùng ñể phân loại hình thái và phân loại bằng giải mã trình tự ADN .
- Thu mẫu cá Tiểu bạc ñể phân loại hình thái
+ Cách thu mẫu: Mẫu ñược thu ở 10 ñiểm trên hồ bằng cách cất vó kết hợp với ánh sáng ñèn vào ban ñêm, diện tích của vó là 400m2. Ngoài ra một số ñiểm ở hồ Thác Bà có ñộ sâu của nước thấp (vùng nước nông) có thể dùng lưới vét ñể thu cá Tiểu bạc vào ban ngày. Mỗi ñiểm ñược thu 30 mẫu cá, tổng 10 ñiểm thu 300 mẫu.
+ Cách bảo quản mẫu: Mẫu cá dùng ñể phân loại hình thái ñược bảo quản trong bình thủy tinh dung tích 500ml, mỗi ñiểm một bình. Dung dịch
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 19
bảo quản mẫu là formol nồng ñộ 4%. Các ñiểm ñược ñánh dấu riêng ñể tránh nhầm lẫn.
- Thu mẫu cá Tiểu bạc ñể giải mã trình tự ADN.
+ Cách thu mẫu: Mẫu dùng ñể giải trình tự ADN ñược tiến hành lấy một lượng thịt cá khoảng 0,2g trên cơ thể cá bằng kéo cắt, yêu cầu cá vẫn còn tươi, sống và ñược lấy trực ở hồ Thác Bà. Mẫu dùng ñể giải trình tự ADN ñược lấy ngẫu nhiên 5 mẫu trong 30 mẫu ở mỗi ñiểm thu mẫu. Tổng số mẫu dùng ñể giải trình tự ADN là 50 mẫu.
+ Cách bảo quản mẫu: Mẫu thịt cá dùng ñể giải trình tự ADN ñược bảo quản trong ống Eppendoft dung tích 1.500µl, dung dịch bảo quản là cồn tuyệt ñối nồng ñộ 99%. Phần còn lại dùng ñể phân loại hình thái ñược bảo quản trong bình thủy tinh dung tích 250ml có chứa dung dịch formol nồng ñộ 4% ñể bảo quản. Các ñiểm, các mẫu dùng giải trình tự ADN ñược ñánh dấu riêng ñể tránh nhầm lẫn.
Tổng 300 mẫu dùng ñể phân loại hình thái và giải trình tự ADN ñược bảo quản, vận chuyển về Phòng thí nghiệm - Trường cao ñẳng thủy sản ñể tiến hành phân tích.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 20
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 21
Bảng 3. 1. ðịa ñiểm, code mẫu, số lượng mẫu cá Tiểu bạc ở hồ Thác Bà
ñược phân loại bằng hình thái và giải trình tự ADN
STT ðịa ñiểm thu mẫu Code mẫu Số mẫu phân tích hình thái (mẫu) Số mẫu giải trình tự ADN (mẫu) 1 Xã Thịnh Hưng, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
ThH 30 5
2 Xã Tân Hương, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
TH 30 5
3 Xã Mông Sơn, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
MS 30 5
4 Xã Tân Phong, huyện
Yên Bình, tỉnh Yên Bái TP 30 5
5 Xã Phan Thanh, huyện
Yên Bình, tỉnh Yên Bái PT 30 5
6 Xã Tân Lập, huyện Lục Yên, tỉnh Yên Bái
TL 30 5
7 Xã Ngọc Chấn, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
NC 30 5
8 Xã Phúc Ninh, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
PN 30 5
9 Xã Mỹ Gia, huyện Yên Bình, tỉnh Yên Bái
MG 30 5
10 Xã Phúc An, huyện Yên
Bình, tỉnh Yên Bái PA 30 5
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 22