khẩu
+ ðiều tra thành phần sâu mọt:
-Thực hiện theo quy trình kiểm dịch thực vật ñối với các lô hàng xuất khẩu căn cứ theo pháp lệnh Bảo vệ và KDTV của nước Cộng hoà xã hội chủ nghĩa Việt Nam năm 2001.
-Tiến hành ñiều tra, thu thập mẫu côn trùng tại các kho và trên mặt hàng xuất khẩu theo phương pháp lấy mẫu trung bình của tiêu chuẩn Việt Nam TCVN4731-89[1] Kiểm dịch thực vật - phương pháp lấy mẫu và của Bùi Công Hiển (1995)[36].
Thực hiện theo Tiêu chuẩn ngành: 10TCN 960/2006 Kiểm dịch thực vật – qui trình kiểm dịch thực vật [1].
Lấy mẫu theo tiêu chuẩn ngành: 10 TCN 336/2006 “ Kiểm dịch thực vật – Phương pháp kiểm tra củ, quả xuất nhập khẩu và quá cảnh” [2].
Lưu giữ sâu mọt theo tiêu chuẩn ngành: 10 TCN 956/2006, KDTV –qui trình lưu giữ và bảo quản mẫu vật [3].
Hình 2-2 Thu thập côn trùng và lấy mẫu trung bình
(Nguồn: Phạm ðức Anh 2010)
ðiều tra kho trung bình 10 ngày một lần và các lần phát sinh theo các lô hàng xuất khẩu từ tháng 12/2009 ñến tháng 7/2010.
- Tại mỗi kho, bắt toàn bộ cá thể mọt tìm thấy trong sắn lát, trên bao bì và trên sàn kho tại ñiểm ñiều tra.
-Bắt toàn bộ các cá thể mọt trong mẫu trung bình, phân tách các loài côn trùng kho và mọt râu dài Cryptolestes ferrugineus S. cho vào lọ thu mẫu, ghi nhãn: ñịa ñiểm thu thập, loại hình bảo quản của kho và loại hàng hoá ñược bảo quản
- Tất cả các mẫu thu thập ñược ở các ñịa ñiểm ñều ñược ñưa về phòng thí nghiệm giám ñịnh lại bằng kính lúp soi nổi và chụp ảnh tại phòng kỹ thuật của Chi cục kiểm dịch thực vật vùng 4, Cục Bảo vệ thực vật.
Hình 2-3 Giám ñịnh xác ñịnh thành phần sâu mọt
Xử lý mẫu côn trùng:
- ðối với côn trùng trưởng thành: giết chết bằng lọ ñộc (KCN) sau ñó sấy ở tủ ñịnh ôn ở nhiệt ñộ thấp rồi tăng dần nhiệt ñộ lên (sấy ở nhiệt ñộ 30- 40oC trong 2 ngày, sau ñó tăng lên 50-60oC trong 7-10 ngày, tùy theo kích thước của côn trùng).
- ðối với sâu non: ñể cho sâu nhịn ñói 1 ngày cho bài tiết sạch bụng, sau ñó cho vào ống nghiệm chứa khoảng 2-3 ml dung dịch KOH hoặc NaOH 10% ñun trên ngọn ñèn cồn (vừa ñun vừa lắc ống nghiệm) không ñể sôi, cho ñến khi khi sâu non dãn thẳng ra.
Bảo quản mẫu côn trùng:
- ðối với côn trùng trưởng thành: sau khi sấy ñể nguội cho vào lọ nút mài bảo quản ở nơi khô ráo.
- ðối với sâu non, nhộng: ngâm vào dung dịch Paml hoặc cồn 70%. Dung dịch Paml ñược pha chế theo tỷ lệ:
- Nước cất ……….. 30% - Cồn 96o ………15% - Formaldehyt 40%………..… 6% - Acid acetic ñậm ñặc ………..4% - Glyceryl ………... 5 giọt
Mẫu vật ñược tiến hành giám ñịnh trực tiếp bằng hình thái bên ngoài hoặc giám ñịnh bằng tiêu bản giải phẫu bằng mắt thường, kính lúp, kính lúp soi nổi có ñộ phóng ñại từ 40-70 lần theo khóa phân loại của Bousquet (1990) [1], Haines (1991) [33] Bùi Công Hiển (1995)[36]; Vũ Quốc Trung (1978)[15] ñể giám ñịnh. Dựa vào các kết quả giám ñịnh, thống kê số lượng từng loài thu ñược, lên danh mục côn trùng.
+ Theo dõi biến ñộng thành phần loài hại sắn lát, của mọt C.
ferrugineus. và mức ñộ phá hại sắn lát bảo quản.
- Thí nghiệm 1: Cất trữ sắn lát liên tục trong phòng lưu mẫu từ 4 tháng. Trước lúc cất trữ kiểm tra số lượng cá thể trong 2 kg mẫu trung bình. Sau ñó cứ mỗi lần ñiều tra ñịnh kỳ của ñề tài thì kiểm tra mọt trong 2kg mẫu, tính số liệu trung bình cho 1 kg sắn lát và kiểm tra trọng lượng, chất lượng của mẫu trung bình sau 4 tháng
-Thí nghiêm 2: Thực hiện tương tự thí nghiệm 1 nhưng thời gian theo dõi là 5 tháng và 2 thí nghiệm bố trí ñan xen nhau trong 7 tháng thực hiện ñề tài.
Hình 2-4 Lưu mẫu theo dõi biến ñộng thành phần loài và tác hại của sâu mọt
(Nguồn: Phạm ðức Anh 2010)
* Mật ñộ của loài ñược tính theo công thức: Con Mật ñộ mọt (con/kg) = ðơn vị lấy mẫu * Tần suất xuất hiện của ñối tượng ñiều tra: Sốñiểm (số mẫu) bắt gặp ñối tượng ñiều tra Tần suất xuất hiện (%) = x 100 Tổng sốñiểm (mẫu) ñiều tra
Tần suất xuất hiện phản ánh mức ñộ phổ biến của ñối tượng ñiều tra theo không gian.
Mức ñộ phổ biến ñược chia thành 4 cấp: + < 25% : rất ít phổ biến ++ 25 - 50%: ít phổ biến +++ 51 - 75%: phổ biến ++++ > 75% : rất phổ biến. Tổng số mỗi loài X 100 * Tỷ lệ thành phần các loài (%) =
Tổng số các loài thu ñược