a) Tác động nhanh của hI :
)Nhóm đối chứng: được tiêm PBS có hàm lượng đường huyết tăng theo thời gian trong suốt 7,5h
)Nhóm tiêm insulin (NOVO) lượng đường huyết giảm mạnh sau 1,5h. Sau đó, hàm lượng đường lại tăng lên, trong 4,5h sau khi tiêm insulin hàm lượng đường huyết vẫn duy trì dưới ngưỡng 250mg/dl.
) Nhóm được tiêm hI tác động của insulin tương tự như insulin (NOVO).
⇒)hI có tác dụng làm giảm lượng đường huyết của chuột tiểu đường Type I STZ tương tự như insuin(NOVO)
b) Tác dụng lâu dài của hI:
)Nhóm chứng âm (chuột khỏe) vẫn duy trì hàm lượng đường huyết ổn định, khối lượng chuột tăng dần và 100% chuột duy trì sống sót.
)Nhóm chuột tiểu đường không tiêm insulin có hàm lượng đường huyết tăng dần theo ngày, sau 10 ngày lượng đường huyết luôn ở mức cao (>
500mg/dl) khối lượng cơ thể giảm mạnh. Sau 12 ngày 100% chuột chết.
)Nhóm được tiêm hI và insulin (NOVO) cho kết quả diễn biến bệnh tương tự nhau. 100% chuột sống sau 15 ngày quan sát, hàm lượng đường huyết duy trì ổn định. Bên cạnh đó khối lượng cơ thể chuột tăng dần.
⇒ hI có tác dụng tương đương insulin (NOVO) trong quá trình cải thiện tình trạng bệnh ở chuột tiểu đường TypeI STZ
4. Kết luận
• Với những kết quả đạt được đã thiết lập thành công hệ thống tế bào P.pastoris dùng cho biểu hiện hMPI trên quy mô nuôi cấy lắc và quy mô fermenter với hàm lượng protein đạt 150 μg/l và 1g/l.
• Phương pháp tủa protein sau lên men bằng (NH4 )2SO4 và tinh sạch protein bằng sắc ký lọc gel cũng được xây dựng với hiệu suất cao lên đến 90%.
• hI đã thể hiện hoat tính tốt, tương đương với sản phẩm insulin thương mại của NOVO
• Chọn Pichia pastoris là hệ thống phù hợp để biểu hiện protein người vừa cho năng suất cao, chi phí lên men thấp, trong khi protein được biểu hiện có hoạt tính tốt khi thử nghiệm in vivo.