THỬ NGHIỆM KHÁNG HUYẾT THANH - Thử nghiệm và cách- 123docz.net

5. Thử nghiệm và cách Thử nghiệm và cách

THỬ NGHIỆM KHÁNG HUYẾT THANH

5.7

5.7 Thử nghiệm tự ngưng kết:Thử nghiệm tự ngưng kết:

a) Thực hiện: Kiểm tra khả năng tự ngưng kết

của vi khuẩn bằng cách nhỏ 1 giọt nước muối

sinh lý lên phiến kính sạch. Sau đó, dùng que

cấy vòng lấy một lượng sinh khối vừa đủ trên

môi trường TSA, trộn đều nhẹ nhàng trong vòng

30-60 giây thành huyền dịch, quan sát kết quả

trên nền tối, tốt nhất là sử dụng kính lúp.

5. Thử nghiệm và cách

nhận biết

b) Kết quả: nếu có những hạt ngưng kết thì

ngừng phản ứng, nếu huyền dịch vẫn đục đều

thì tiến hành thực hiện phản ứng kháng huyết

thanh với kháng nguyên O và H

5. Thử nghiệm và cách 5. Thử nghiệm và cách 5. Thử nghiệm và cách nhận biết nhận biết 5.8 Thử ngưng kết kháng nguyên O 5.8 Thử ngưng kết kháng nguyên O a)

a)Thực hiện: sử dụng khuẩn lạc thuần không có Thực hiện: sử dụng khuẩn lạc thuần không có

khả năng tự ngưng kết, tiếp tục qui trình giống

như thử nghiệm tự ngưng kết, thay thế giọt

nước muối sinh lý bằng kháng huyết thanh O

b)Kết quả: Phản ứng dương tính khi xuất hiện Kết quả: Phản ứng dương tính khi xuất hiện

những hạt nhỏ trắng li ti, phản ứng âm tính khi

huyền dịch vẩn đục

5. Thử nghiệm và cách 5. Thử nghiệm và cách 5. Thử nghiệm và cách nhận biết nhận biết 5.9 Thử ngưng kết kháng nguyên H 5.9 Thử ngưng kết kháng nguyên H

a) Thực hiện: sử dụng khuẩn lạc thuần không

có khả năng tự ngưng kết cấy vào môi trường

thạch mềm TSA ủ 37.0

thạch mềm TSA ủ 37.0 ±± 1 100C /24 C /24 ++ 3 giờ. Sau 3 giờ. Sau

khi ủ lấy sinh khối trên thạch mềm tiếp tục qui

5. Thử nghiệm và cách

nhận biết

b) Kết quả: Phản ứng dương tính khi xuất hiện

những hạt nhỏ trắng li ti, phản ứng âm tính khi

huyền dịch vẩn đục

LƯU Ý

Không thể kết luận dương tính hoặc âm tính

Salmonella

Salmonella spp. trong mẫu thử khi chỉ dựa vào spp. trong mẫu thử khi chỉ dựa vào

hoặc thử nghiệm sinh hóa hoặc thử nghiệm

huyết thanh kháng. Do:

a) Thử nghiệm sinh hóa không thể phát hiện tất

cả các serotype, ngoài ra các dòng

LƯU Ý

Nếu phản ứng ngưng kết kháng nguyên O là

dương tính, khi đó chưa thể kết luận là

Salmonella

Salmonella spp. được vì có một số loài khác spp. được vì có một số loài khác

(E.coli, Citrobacter, Shigella

(E.coli, Citrobacter, Shigella và và Enterobacter) Enterobacter)

hoặc có cùng chung một số kháng nguyên O

hoặc cũng có những kháng nguyên tương tự với

kháng nguyên của

LƯU Ý

b) Thử nghiệm huyết thanh kháng dựa vào phản

ứng ngưng kết kháng nguyên O, kháng nguyên

H. Tuy nhiên,

H. Tuy nhiên, Salmonella Salmonella spp. có thể thay đổi spp. có thể thay đổi

hình dáng khuẩn lạc từ trơn (smooth) sang nhăn

(rough).

(rough). Dạng nhăn là do đột biến do ngăn sự Dạng nhăn là do đột biến do ngăn sự

tổng hợp polysaccharide. Do đó, không có chuỗi

LƯU Ý

Nếu phản ứng ngưng kết kháng nguyên O là

dương tính, khi đó chưa thể kết luận là

Salmonella

Salmonella spp. được vì có một số loài khác spp. được vì có một số loài khác

(E.coli, Citrobacter, Shigella

(E.coli, Citrobacter, Shigella và và Enterobacter) Enterobacter)

hoặc có cùng chung một số kháng nguyên O

hoặc cũng có những kháng nguyên tương tự với

kháng nguyên của

LƯU Ý

Do đó, để kết luận mẫu dương tính hoặc âm tính

Salmonella

Salmonella spp., cần phải kết hợp kết quả của spp., cần phải kết hợp kết quả của

hai thử nghiệm sinh hóa và huyết thanh kháng để

kết quả đạt được là cao nhất, chính xác nhất.