Phân tích số liệu bằng phương pháp thống kê mô tả và phân tích phương sai ANOVA với mức ý nghĩa P<0,05. Phân tích ñược thực hiện trên phần mềm Microsoft Excel 2003.
Số cá cái ñẻ
Tỷ lệ cá ñẻ (%) = × 100 Tổng số cá cái ñược tiêm kích dục tố
Số trứng thụ tinh Tỷ lệ thụ tinh(%) = × 100 Tổng số trứng theo dõi Số cá bột Tỷ lệ nở (%) = × 100 Tổng số trứng thụ tinh
PHẦN 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1. ðặc ñiểm sinh học sinh sản cá Nhưng
Nghiên cứu ñã tiến hành thu mẫu và giải phẫu 80 con cá Nhưng trưởng thành (40 cá ñực và 40 cá cái) ñể nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học sinh sản và kết quả thu ñược như sau:
4.1.1. Tuổi, cỡ cá, ñặc ñiểm sinh dục phụ
* Tuổi và cỡ cá
Chiều dài của cá trong ao nuôi vỗ dao ñộng từ 15 – 27,2 cm tương ứng với khối lượng 128,6 – 375,5 g. Quan sát vảy cá thấy tuổi cá gồm 3 nhóm tuổi, thấp nhất là 0+ và lớn nhất là 2+.
Bảng 1. Cấu trúc tuổi và cỡ cá Nhưng
Nhóm tuổi Chiều dài (cm) Khối lượng (g) Số mẫu 0+ 16,1 ± 0,64 162 ± 19,25 21 1+ 21,1 ± 1,54 276 ± 32,67 42 2+ 24,7 ± 1,35 334 ± 27,17 17
Tổng 80
* ðặc ñiểm sinh dục phụ
ðặc ñiểm sinh dục phụ là những ñặc ñiểm giúp chúng ta phân biệt cá thể ñực cái. Vào mùa sinh sản, nếu chúng ta dùng tay sờ vào vây ngực cá ñực thấy hơi ráp còn vây ngực cá cái nhẵn. Lỗ sinh dục của con cái to và hơi lồi ra, vào mùa sinh sản nó có màu hồng ñỏ. Còn lỗ sinh dục cá ñực nhỏ và hơi lõm vào (hình 2).
Hình 2. Sự khác nhau giữa lổ sinh dục cá cái (♀) và cá ñực (♂)
4.1.2. Hình thái và cấu tạo tuyến sinh dục cá Nhưng
Tuyến sinh dục cá Nhưng cũng giống nhiều loài cá khác trong họ cá Chép, nó gồm một ñôi tuyến hình trụ nằm trong xoang bụng của cá, ở phía dưới bóng hơi và ñược màng noãn sào hoặc màng tinh sào treo vào thành lưng của xoang cơ thể. Hai phần của tuyến sinh dục cá Nhưng tương ñối ñồng ñều. Phía cuối của ñôi tuyến sinh dục nối với nhau bởi một ống chung và dẫn ra ngoài qua lỗ sinh dục.
* Cấu tạo tuyến sinh dục cá ñực (tinh sào)
Lúc còn non, tinh sào có dạng hình sợi áp sát vào cột sống. Khi thành thục, nó là 2 dải căng phồng và có màu trắng sữa, nếu ấn nhẹ hai bên lỗ niệu, tinh dịch có thể chảy ra ngoài qua lỗ niệu sinh dục.
Trong tinh sào có nhiều bóng nhỏ (ampull) sắp xếp không theo quy tắc. Trong ampull có chứa rất nhiều tinh bào, trong tinh bào có chứa rất nhiều tinh nguyên bào phát dục ñều ñặn như nhau. Khi cá thành thục sinh dục thì trong các tinh bào có chứa rất nhiều tinh trùng. Giữa hai tinh bào có màng follicul ngăn cách. Mỗi Ampull có một ống nhỏ dẫn ra ống chung nằm ở mặt lưng của tinh sào.
♀
Tinh trùng cá Nhưng cũng giống tinh trùng của nhiều loài cá nước ngọt khác, nó có dạng hình roi ñầu nhỏ, ñường kính 1,5 – 2,3µm, ñuôi dài khoảng 21µm.
Hình 3. Hình thái tuyến sinh dục ñực * Cấu tạo tuyến sinh dục cá cái (buồng trứng, noãn sào)
Noãn sào cá Nhưng có dạng hình túi do mô liên kết và mô trơn tạo thành. Toàn bộ noãn sào có một hệ thống mạch máu và dây thần kinh phân bố, bên trong có rất nhiều tế bào trứng (noãn bào). Trong noãn sào có các vách ngang – là nơi phát sinh ra tế bào trứng. Tùy thuộc vào giai ñoạn phát triển của noãn sào mà tế bào trứng có hình dạng và kích thước khác nhau, nhìn chung tế bào trứng có hình tròn. Khi cá thành thục sinh dục, noãn sào có kích thước rất lớn, chiếm gần hết xoang bụng.
4.1.3. Sự phát triển của tuyến sinh dục và tế bào sinh dục qua các tháng nghiên cứu nghiên cứu
Sự phát triển của tuyến sinh dục ở cá Nhưng cũng mang ñặc ñiểm chung của sự phát triển tuyến sinh dục ở các loài cá xương, nó trải qua các thời kỳ tạo trứng, sinh tinh và 6 giai ñoạn phát triển tuyến sinh dục.
4.1.3.1. Sự phát triển của tuyến sinh dục ñực
Nghiên cứu ñã giải phẫu 40 cá ñực và thấy tuyến sinh dục ñực cũng phát triển theo quy luật chung của các loài cá nước ngọt.
* Giai ñoạn II
Tinh sào là 2 sợi dây tròn, mỏng, có màu hồng nhạt do có nhiều mạch máu phát triển và phân bố ở bề mặt của tuyến sinh dục, chiều dài gần hết xoang bụng. Hệ số thành thục của cá ở giai ñoạn này dao ñộng từ 0,42 – 1,25% trung bình 0,68 ± 0,2%.
Khi quan sát tiêu bản mô học dưới kính hiển vi thấy ngoài sự có mặt của các tinh nguyên bào, xuất hiện các tinh bào cấp I tạo thành do sự phân chia của tinh nguyên bào.
Hình 5. Tiêu bản mô học của tinh sào giai ñoạn II (ðộ phóng ñại 100 lần) * Giai ñoạn III
Tinh sào có chiều dài gần bằng chiều dài xoang bụng, có màu hồng. Kích thước tinh sào khá lớn, thể tích của nó chiếm 1/2 xoang cơ thể. Lúc này hệ số thành thục vào khoảng 1,28 – 2,32%, trung bình 1,9 ± 0,4%.
Tinh nguyên bào
Quan sát tiêu bản mô học thấy sự hiện diện của các nhóm tiền tinh bào, các tinh bào cấp I, tinh bào cấp II.
Hình 6. Tiêu bản mô học của tinh sào giai ñoạn III (ðộ phóng ñại 100 lần) * Giai ñoạn IV
Tinh sào rất lớn, có màu trắng sữa chiếm phần lớn xoang cơ thể. Ở giai ñoạn này nếu ta dùng dao cắt ngang tinh sào thì thấy có sẹ ñặc chảy ra tại vết cắt. Hệ số thành thục của cá ñực giai ñoạn này dao ñộng từ 2,39 – 3,78%; trung bình 2,92 ± 0,33%.
Khi quan sát tiêu bản mô học tinh sào giai ñoạn IV dưới kính hiển vi ở ñộ phóng ñại 100 lần thấy một số lượng lớn tế bào tinh trùng có kích thước rất nhỏ, nằm trong các túi lớn. Bên cạnh ñó còn xuất hiện một số lượng nhỏ các tiền tế bào tinh, tinh bào cấp II có kích thước lớn.
Hình 7. Tiêu bản mô học của tinh sào giai ñoạn IV (ðộ phóng ñại 100 lần)
Tiền tinh bào
Tinh trùng Tinh bào cấp I
4.1.3.2. Sự phát triển của tuyến sinh dục và tế bào sinh dục cái
* Giai ñoạn II
Noãn sào trong suốt. Các noãn bào rất nhỏ, có thể quan sát kỹ bằng mắt thường, hoặc sử dụng kính lúp. Noãn sào có màu xanh nhạt. Ở giai ñoạn này nếu quan sát kỹ, thấy có một số mạch máu lớn và nhỏ phân bố trên bề mặt tuyến sinh dục. Hệ số thành thục của cá ở giai ñoạn này dao ñộng từ 2,61 – 5,44%; trung bình 4,34 ± 1,67%.
Quan sát tiêu bản mô học thấy phần lớn tế bào sinh dục giai ñoạn này là các noãn bào ñang ở thời kỳ sinh trưởng sinh chất. Lúc này màng nguyên sinh chất căng không ñều nên noãn bào có dạng hình ña giác. Tế bào chất bắt màu ñậm hơn, nhân bắt màu nhạt. Nhân của tế bào trứng tròn và có kích thước lớn, quan sát kỹ trên tiêu bản mô học thấy trong nhân có các tiểu hạch. ðường kính tế bào trứng giai ñoạn này trung bình 0,147 ± 0,022mm. ðường kính nhân tế bào trứng là 0,054 ± 0,011%, bằng 36,9% so với ñường kính tế bào trứng.
Hình 8. Tiêu bản mô học noãn sào giai ñoạn II (ðộ phóng ñại 100 lần) * Giai ñoạn III
Noãn sào ñã phát triển khá lớn, có màu xanh nhạt, bằng mắt thường có thể nhìn thấy rõ các noãn bào riêng biệt. Hệ số thành thục của cá giai ñoạn này khoảng từ 11,94 – 16,68% trung bình 14,31 ± 3,35%. Các mạch máu khá phát triển trên bề mặt noãn sào.
Tế bào chất
Nhân tế bào Trứng
Khi quan sát tiêu bản mô học của noãn sào giai ñoạn III có thể thấy sự khác biệt lớn về kích thước và các pha phát triển khác nhau của noãn bào ở thời kỳ tích lũy dinh dưỡng. Có những noãn bào kích thước lớn ñang ở pha tích lũy noãn hoàng và những noãn bào nhỏ lại ñang ở pha không bào hóa. Trên tiêu bản mô học cho thấy bên cạnh các tế bào trứng ở thời kỳ sinh trưởng dinh dưỡng còn có các tế bào trứng ở thời kỳ tổng hợp nhân và sinh trưởng sinh chất. Lúc này nhân tròn và nằm ở tâm tế bào trứng, ñường kính nhân trung bình 0,12 ± 0,022mm; ñường kính tế bào trứng trung bình 0,619 ± 0,15mm. Tỷ lệ giữa ñường kính nhân và ñường kính tế bào trứng là 19,42 %, nhỏ hơn so với giai ñoạn II.
Hình 9. Tiêu bản mô học noãn sào giai ñoạn III (ðộ phóng ñại 100 lần) * Giai ñoạn IV
Noãn sào ñạt kích cỡ cực ñại, chiếm phần lớn xoang bụng, có màu vàng xanh, quan sát bên ngoài thấy các hạt trứng gắn chặt vào các mô của trứng. Hệ số thành thục của cá giai ñoạn này khoảng 18,48 – 24,4%; trung bình 22,45 ± 1,84%. Mạch máu phát triển mạnh, phân bố khắp noãn sào. Các noãn bào chín có màu vàng xanh. Ngoài những noãn bào chín, trong noãn sào còn có một số ít noãn bào nhỏ hơn, màu xanh nhạt với nhiều kích cỡ nằm xen lẫn.
Trên tiêu bản mô học, buồng trứng giai ñoạn này thấy noãn bào ở thời kỳ chín với kích thước lớn, nhân của noãn bào có thể nằm ở giữa hoặc lệch về Không bào
Tế bào trứng giai ñoạn III
Tế bào trứng giai ñoạn II
phía cực ñộng vật tùy thuộc vào noãn sào ñang phát triển ở ñầu hay cuối giai ñoạn IV. Ngoài ra, trong noãn sào của cá lúc này còn có một số ít noãn bào ở pha không bào hóa và pha tích lũy noãn hoàng của thời kỳ sinh trưởng dinh dưỡng. Cá biệt có một lượng rất ít tế bào ñang ở thời kỳ sinh trưởng sinh chất. ðường kính tế bào trứng trung bình 0,998 ± 0,125mm, ñường kính nhân tế bào trứng trung bình 0,163 ± 0,01mm. Trong các mẫu nghiên cứu, chúng tôi gặp buồng trứng giai ñoạn IV ở những cá thể ở tuổi từ 0+ - 2+. Như vậy tuổi sinh sản lần ñầu của cá Nhưng là chưa ñến một tuổi.
Hình 10. Tiêu bản mô học noãn sào giai ñoạn IV (ðộ phóng ñại 100 lần) 4.1.4. Mùa vụ sinh sản của cá Nhưng
ðể xác ñịnh mùa vụ sinh sản, chúng tôi dựa vào sự biến ñộng hệ số thành thục và hệ số ñộ béo kết hợp với tỷ lệ phát triển tuyến sinh dục của cá qua các tháng nghiên cứu.
4.1.4.1. Hệ số thành thục và ñộ béo của cá
Kết quả nghiên cứu hệ số thành thục và hệ số ñộ béo của cá Nhưng ñực và cái ñược thể hiện ở bảng 2 và bảng 3.
Tế bào trứng giai ñoạn IV
Nhân tế bào trứng
Bảng 2. Biến ñổi hệ số thành thục của cá cái Giai ñoạn thành thục Tháng Khcá bối lỏượ nộng i quan (g) Khối lượng TSD(g) II III IV HSTT (%) 258,5 56,3 * 21,78 240,4 55,6 * 23,13 130,6 29,8 * 22,82 138,5 23,1 * 16,68 5 239 57,5 * 24,06 TB 21,69 ± 2,92 243 59,3 * 24,40 259,7 60,1 * 23,14 130,6 15,6 * 11,94 131,8 31,4 * 23,82 6 260 25 * 9,62 TB 18,59 ± 7,19 130,2 30,1 * 23,12 307,8 21,4 * 6,95 135,9 12,5 * 9,20 335,7 24 * 7,15 7 248,2 52,8 * 21,27 TB 13,54 ± 7,98 278,9 13,8 * 4,95 213,6 42,4 * 19,85 221,5 50,6 * 22,84 281,3 15,5 * 5,51 8 150,8 7,3 * 4,84 TB 11,6 ± 8,97 339,5 15,5 * 4,57 334,7 18,7 * 5,59 215,4 39,8 * 18,48 278,7 14,3 * 5,13 9 211,5 11,6 * 5,48 TB 7,85 ± 5,95 10 298,6 11,5 * 3,85
200,3 8,7 * 4,34 246,8 10,1 * 4,09 216,7 8,3 * 3,83 219,6 7,6 * 3,46 TB 3,92 ± 0,25 304,6 9,7 * 3,18 240,5 6,8 * 2,83 212,3 6,1 * 2,87 241,8 6 * 2,48 11 316,9 8,9 * 2,81 TB 2,84 ± 0,25 242,6 5,6 * 2,31 273,7 7,4 * 2,70 286,3 9,5 * 3,32 207,8 4,9 * 2,36 12 187,5 6,7 * 3,57 TB 2,85 ± 0,57
Qua số liệu ở bảng 2 cho thấy, trong các tháng chúng tôi nghiên cứu thì hệ số thành thục của cái cao nhất vào tháng 5 (21,69%) và tháng 6 (18,59%). Hệ số thành thục sinh dục của cá tháng 5 và tháng 6 cao là do ñây có thể ñang là mùa vụ sinh sản. Từ tháng 7 trở ñi, hệ số thành thục giảm dần. Kết quả này phù hợp với quy luật chung, vào mùa sinh sản tuyến sinh dục phát triển ñạt kích thước cực ñại nên hệ số thành thục của cá là cao nhất.
Bảng 3. Hệ số ñộ béo Fullton và Clack của cá Nhưng
ðộ béo Fulton (%) ðộ béo Klack (%)
Số mẫu Tháng Cá cái Cá ñực Cá cái Cá ñực 5 5,02 ± 0,97 4,95 ± 1,03 3,93 ± 0,77 4,52 ± 0,86 5 6 5,03 ± 1,75 4,94 ± 0,73 3,94 ± 1,43 4,55 ± 0,62 5 7 4,89 ± 1,35 4,92 ± 0,99 4,07 ± 0,84 4,57 ± 0,84 5 8 4,86 ± 1,77 4,90 ± 1,05 4,17 ± 1,61 4,56 ± 0,88 5 9 4,85 ± 1,69 4,89 ± 0,77 4,19 ± 1,32 4,59 ± 0,72 5 10 4,88 ± 1,15 4,88 ± 0,97 4,18 ± 0,94 4,61 ± 0,81 5 11 4,89 ± 0,50 4,90 ± 0,74 4,16 ± 0,35 4,58 ± 0,68 5 12 4,93 ± 1,04 4,93 ± 1,04 4,15 ± 0,89 4,57 ± 0.89 5 Tổng số mẫu 40
ðộ béo Fulton của cá ñực không có sự biến ñổi nhiều qua các tháng nghiên cứu, còn ở cá cái vào mùa sinh sản (tháng 5 và tháng 6) ñộ béo Fulton có phần cao hơn là do ở cá Nhưng có khối lượng buồng trứng tương ñối lớn. Ngược lại, hệ số ñộ béo Clack của cá thấp nhất vào tháng 5 và tháng 6, do lúc này các chất dinh dưỡng ñược huy ñộng cho sự phát triển tuyến sinh dục. Từ tháng 7 trở ñi ñộ béo Fullton của cá giảm dần, tháng 11 và 12 thì ñộ béo của cá có xu hướng tăng, có thể do ñây là thời ñiểm cá ñang bắt ñầu bước vào giai ñoạn tích lũy chất dinh dưỡng vào cơ và gan ñể chuẩn bị cho mùa vụ sinh sản tiếp theo.
Như vậy, hệ số thành thục và hệ số ñộ béo của cá cho chúng ta thấy rằng tháng 5 và tháng 6 ñang là mùa sinh sản của cá.
4.1.4.2. Tỷ lệ phát triển tuyến sinh dục của cá Nhưng qua các tháng nghiên cứu
Kết quả kiểm tra tỷ lệ phát triển tuyến sinh dục cá Nhưng ñược thể hiện qua hình 11 và hình 12.
0 20 40 60 80 100 120 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12 Tháng T ỷ l ệ % Giai ñoạn II Gai ñoạn III Giai ñoạn IV
Hình 11. Tỷ lệ các cá thể cái phát triển tuyến sinh dục từ tháng 5 - 12
0 20 40 60 80 100 120 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12 Tháng T ỷ l ệ p h ầ n t r ă m Giai ñoạn II Giai ñoạn III Giai ñoạn IV
Hình 12. Tỷ lệ các cá thểñực phát triển tuyến sinh dục từ tháng 5 - 12
Tỷ lệ thành thục tuyến sinh dục của cá ñực và cá cái là tương ñồng, Tuyến sinh dục phát triển ở giai ñoạn IV cao nhất vào tháng 5 (80%) và tháng 6 (cá cái 60%), sang tháng 7 trở ñi tỷ lệ thành thục sinh dục của cá giảm dần, tháng 10 ñến tháng 12 thì tuyến sinh dục ñã thoái hóa hoàn toàn và chuyển về giai ñoạn II.
qua các tháng nghiên cứu, kết hợp với tham khảo số liệu của ñề tài “Nghiên cứu sản xuất giống và thăm dò nuôi thương phẩm cá Nhưng” của Trung tâm Tư vấn thiết kế và chuyến giao công nghệ - Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 1 (theo kết quả của ñề tài thì vào tháng 1 chỉ thấy tuyến sinh dục phát triển ở giai ñoạn I, II; sang tháng 2 và tháng 3 xuất hiện tuyến sinh dục giai ñoạn III, ñến tháng 4 tỷ lệ phát triển tuyến sinh dục giai ñoạn IV là 66,67%). Chúng tôi thấy trong ñiều kiện nuôi vỗ, cá Nhưng có khả năng thành thục khá