Theo đặng đức Trạch, Nguyễn đỡnh Hường và cộng sự (1987) [39], khi cú bất kỳ virus, ký sinh trựng xõm nhập vào cơ thể cú thể chống lại chất lạ tạo ra miễn dịch cho cơ thể khi chất lạ xõm nhập lần saụ Thể hiện dưới hai hỡnh thức ủỏp ứng miễn dịch: miễn dịch dịch thể và miễn dịch qua trung gian tế bàọ
Vũ Triệu An (1997) [1], cho biết: ủỏp ứng miễn dịch dịch thể (humoral immunorseponse) giữ vai trũ bảo vệ cơ thể thụng qua những khỏng thể hoà tan cú trong mọi dịch sinh học của cơ thể. Khỏng thể cú bản chất là globulin, nờn cũn ủược gọi là globulin miễn dịch (Immunoglobulin - Ig). đú là sản phẩm của cỏc tương bào Plasma ở giai ủoạn cuối cựng của quỏ trỡnh biệt hoỏ tế bào lymphụ B.
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ21 Khi khỏng nguyờn tiếp xỳc với globulin miễn dịch cú trờn mặt tế bào lympho B thỡ ủược hoạt hoỏ thụng qua tế bào lympho T hỗ trợ (T.help - Th). Tế bào B ủược hoạt hoỏ sản xuất ra khỏng thể dịch thể tương ứng với từng loại khỏng nguyờn.
Theo Nguyễn Như Thanh (1996) [31], trong cỏc loại Ig thỡ IgG chiếm 75% và thường ủược truyền qua nhau thai, nờn con non sinh ra ủó ủược miễn dịch. đối với trõu, bũ do nhau thai cú 6 lớp màng nờn IgG khụng truyền qua ủược nhau thai, mà truyền qua sữa ủầu, vỡ vậy việc cho bờ, nghộ bỳ sữa ủầu sớm là rất quan trọng ủể tạo miễn dịch cho con non. đỏp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào (cell mediated immunoresponse). Thụng qua cỏc cơ quan tiếp nhận (recepter) mà ủại thực bào trỡnh diễn khỏng nguyờn cho lympho T. Sự kết hợp khỏng nguyờn ngay trờn bề mặt làm chỳng ủược hoạt hoỏ, kớch thớch tế bào tiết ra lymphokin ủúng vai trũ tương tỏc, ủiều hoà miễn dịch. Khi tế bào lympho T trở thành những tế bào hoạt hoỏ thành cỏc tế bào như tế bào T quỏ mẫn muộn, T ủộc, T cảm ứng. Cỏc lympho T tăng lờn nhanh chúng, nhanh chúng hoạt hoỏ ủại thực bào, bạch cầu ủể tiờu diệt khỏng nguyờn. Nhúm tế bào T là một quần thể hỗn tạp, nờn ủược phõn biệt theo chức năng, trong ủú chức năng ủiều hoà ủỏp ứng miễn dịch là tế bào T hỗ trợ, T ức chế. Tuy nhiờn, miễn dịch của ủơn bào khỏc với miễn dịch của virus, vi khuẩn. Với mỗi loài virus, vi khuẩn ủều cú những quyết ủịnh khỏng nguyờn phự hợp trờn bề mặt ủại thực bào, bạch cầu, do ủú sẽ tạo ra khỏng thể tương ứng, Interferon ủể tiờu diệt. Cũn với ủơn bào, chỳng cú ủặc tớnh chung là luụn luụn thay ủổi khỏng nguyờn bề mặt, do vậy khi cơ thể sản xuất khỏng thể tương ứng ủủ ủể trung hoà khỏng nguyờn thỡ khỏng nguyờn bề mặt lại biến ủổi tạo ra loại khỏng nguyờn khỏc, làm cho cơ thể rất khú tạo ra miễn dịch hoàn toàn bền vững, chống lại ủơn bàọ
Theo Zhao, J.Z, Yuan, C.H.G (1992) [72], thành phần C3 và C19 sinh ra từ biểu mụ phế quản gốc của thỏ ủược phõn bổ dọc theo niờm mạc, IgG cú
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ22 ở phổi, một ớt ở tuyến lệ. IgG mới sinh ra, ủược giải phúng cựng với IgG ủang cú ở tổ chức trờn. Khỏng nguyờn T. evansi khụng tỡm thấy ở mũi,, mắt, chứng tỏ ở ủú cú khỏng thể khỏng T. evansị
Weir. C et al (1986) [71], ủó nhận thấy những ủộng vật mẫn cảm, thời gian sinh khỏng thể khỏng Tiờn mao trựng chậm hơn những ủộng vật ớt mẫn cảm, tới khi Tiờn mao trựng ủó xuất hiện ở khắp cơ thể mà vẫn chưa xuất hiện khỏng thể Tiờn mao trựng, khi gõy nhiễm Trypanosoma brucei, lần thứ nhất chỉ xuất hiện IgG, gõy nhiễm lần thứ hai mới thấy xuất hiện IgG1, IgG2. Cỏc yếu tố vật lý cũng cú vai trũ trong khỏng bệnh tự nhiờn. Hàm lượng kẽm trong huyết thanh của loài ủộng vật mẫn cảm cao hơn của loài ủộng vật khụng mẫn cảm với Tiờn mao trựng. Giả thiết rằng kẽm tăng quỏ mức gõy cản trở sự hiện diện của khỏng nguyờn ủồng thời kỡm hóm kớch thớch tạo phõn chia tế bào lymphocyte ở ủộng vật mẫn cảm.
Theo Phạm Sỹ Lăng (1982) [14], những nghiờn cứu rừ nhất về miễn dịch học là sự ứng dụng cỏc phản ứng huyết thanh học trong chẩn ủoỏn ủối với T.evansị Jatkar. (1973), tại Trung tõm Thỳ y Nhiệt ủới ủó xỏc ủịnh lượng IgM, IgG tăng lờn trong huyết thanh lạc ủà nhiễm T.evansi ủó ứng dụng IFAT, ELISA ủó phỏt hiện khỏng thể ủặc hiệu trong huyết thanh lạc ủà bệnh. Cỏc phản ứng này ủược xem như chớnh xỏc hơn cỏc phản ứng chẩn ủoỏn huyết thanh học trước ủõy (phản ứng Formol, phản ứng Chlorremercure), nhưng chưa ủược ứng dụng rộng rói, dụng cụ ủắt tiền, cồng kềnh.
Theo Lương Văn Huấn, Lờ Hữu Khương (1997) [10], ký sinh trựng ký sinh trong mỏu kớch thớch hệ thống miễn dịch của cơ thể gia sỳc sinh ra khỏng thể chống lại ký sinh trựng, khỏng thể xuất hiện làm ngưng kết hoặc tiờu tan ký sinh trựng. Quỏ trỡnh này làm giảm sự sinh sụi, hạn chế quỏ trỡnh phỏt triển của ký sinh trựng, khỏng thể xuất hiện với nồng ủộ cao làm ký sinh trựng suy yếu cú thể gõy nờn thể bệnh món tớnh, hoặc gia sỳc tự khỏi bệnh. Qua nhiều
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ23 nghiờn cứu về miễn dịch của ký sinh trựng ủường mỏu, người ta nhận ủịnh về cơ chế ủỏp ứng miễn dịch của cơ thể, sự lẩn trỏnh ủỏp ứng miễn dịch của Tiờn mao trựng như sau: ủỏp ứng miễn dịch khụng hoàn toàn ủối với cỏc loại ký sinh trựng núi chung cú tớnh miễn dịch yếụ điều này khụng ủỳng trong trường hợp ký sinh trựng cú tớnh khỏng nguyờn ủầy ủủ, nhưng khi ký sinh trong mỏu của ủộng vật chủ. Tiờn mao trựng ủó tạo ra một cơ chế cho phộp chỳng tồn tại trước sự ủỏp ứng miễn dịch của cơ thể. Tuy nhiờn, cũng giống cỏc phần tử khỏng nguyờn khỏc, Tiờn mao trựng cú thể kớch thớch cơ thể sản sinh khỏng thể dịch thể, khỏng thể tế bàọ Khỏng thể phục vụ chủ yếu việc kiểm soỏt số lượng ký sinh trựng cú tự do trong mỏu, trong dịch mụ, cũn khỏng thể tế bào cú thể trực tiếp chống lại ký sinh trựng ở trong tế bàọ Khỏng thể dịch thể ức chế trực tiếp cỏc khỏng nguyờn bề mặt của Tiờn mao trựng khụng chuyển ủộng ủược. Khỏng thể cựng với chất tiết của tế bào (cytotoxit) cú thể giết chết Tiờn mao trựng. Mặt khỏc, khỏng thể cú thể ức chế hoạt ủộng của cỏc men tham gia vào quỏ trỡnh sinh sản của Tiờn mao trựng (sao chộp). Song bản thõn Tiờn mao trựng cũng cú cơ chế ủể chống lại ủỏp ứng miễn dịch của vật chủ rất mạnh. Nhưng cỏch thức hoạt ủộng của nú chưa ủược làm sỏng tỏ, một số quan ủiểm cho rằng: Tiờn mao trựng cũng cú khởi ủộng sự phỏt triển của những tế bào ức chế (Suppresser cells) hoặc hệ thống tế bào lympho B. Trong khi ủú một số nhà nghiờn cứu lại cho rằng: Tiờn mao trựng giải phúng ra cỏc yếu tố ức chế miễn dịch, Tiờn mao trựng cũn cú 2 phương thức lẩn trỏnh ủỏp ứng miễn dịch rất cú hiệu quả. Thứ nhất là trở thành tớnh khỏng nguyờn thấp (hypoantigenis) hoặc khụng cú tớnh khỏng nguyờn (nolmmunogenie). Cỏch thức thứ hai là cú khả năng thay ủổi khỏng nguyờn bề mặt rất mạnh, giữ ủược khỏng nguyờn cũ. Trypanosoma theileri ở trõu, bũ,
Trypanosoma lewisi ở chuột, cả hai loài này ủều là Trypanosoma khụng gõy bệnh. Cho nờn chỳng cú thể sống ủược trong mỏu của cỏc ủộng vật bị nhiễm.
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ24 Bởi vỡ chỳng ủược bao phủ một lớp proteine huyết thanh của vật chủ, do ủú chỳng khụng ủược nhận biết như là một vật lạ.
Trong ủiều kiện thớ nghiệm, Tiờn mao trựng phỏt triển trong mụi trường nuụi cấy tế bào, cũng cho ta thấy những trường hợp biến ủổi khỏng nguyờn lẻ tẻ. Bằng kớnh hiển vi ủiện tử cú thể quan sỏt thấy sự biến ủổi khỏng nguyờn, hỡnh thành một lớp bao phủ trờn bề mặt của Tiờn mao trựng. Khi sự thay ủổi khỏng nguyờn xảy ra, cỏc protein ở lớp bao phủ cũ mất ủi, ủược thay thế bởi loại protein cú tớnh khỏng nguyờn khỏc. Sự phõn tớch di truyền của quỏ trỡnh này chỉ ra rằng: Tiờn mao trựng cú một số lượng gen rất lớn ủể chi huy tổng hợp loại protein ủú, sự biến ủổi tớnh khỏng nguyờn xảy ra là do kết quả của việc gen sắp xếp lại, chọn lọc, Chard, K., Sinett, R.P (1970) [45].
Chớnh vỡ những lý do trờn, việc chẩn ủoỏn Tiờn mao trựng cũn gặp nhiều khú khăn nhất là trong thời kỳ Tiờn mao trựng khụng xuất hiện ở mạch mỏu ngoại vị Bởi vậy việc tỡm ra một phương phỏp chẩn ủoỏn chớnh xỏc, nhanh nhạy ủang là một vấn ủề ủược cỏc nhà khoa học quan tõm ủến. đối với bệnh Tiờn mao trựng do T.evansi gõy ra, từ lõu một số nhà khoa học cú nhận xột: sau một cơn bệnh cấp tớnh con vật tiếp tục mang trựng trong nhiều thỏng, ủến cả nhiều năm, chỉ phỏt hiện ký sinh trựng khi tiờm truyền cho ủộng vật mẫn cảm.
Lờ Ngọc Vinh (1992) [41], ủó nghiờn cứu ứng dụng phản ứng ngưng kết trực tiếp ủể chẩn ủoỏn bệnh Tiờn mao trựng trõu, bũ ủạt tỷ lệ phỏt hiện 80 - 85% lại nhanh, thuận tiện, ủồng thời cũng sử dụng qui trỡnh phũng trị bệnh của Trịnh Văn Thịnh (1982) [36] và Phạm Sỹ Lăng (1982) [14], ủó cụng bố cho kết quả tốt.
Lờ Ngọc Vinh (1992) [41], khi nghiờn cứu về bệnh Tiờn mao trựng cho biết: trõu gõy nhiễm T.evansi sau 24 ủến 30 ngày hàm lượng khỏng thể xuất hiện trong mỏu cao nhất, giảm dần sau 90 ngàỵ Sau khi ủiều trị một
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ25 tuần bằng Trypamidium với liều 1 mg/kg thể trọng, hàm lượng khỏng thể khỏng T.evansi vẫn cũn cao trong mỏu, bắt ủầu giảm dần sau từ 2 ủến 3 tuần ủiều trị. Bũ sau khi ủiều trị 3 thỏng, hàm lượng khỏng thể khỏng T.evansi vẫn cũn tồn tại trong mỏụ
Lờ Ngọc Mỹ (1991) [20], Lương Tố Thu và cộng sự (1994) [37], Lương Tố Thu, Lờ Ngọc Mỹ (1995) [38], sử dụng kỹ thuật ELISA phỏt hiện khỏng thể khỏng T.evansi trong mỏu trõu nhiễm T.evansi cho biết, khỏng thể lưu hành ủược phỏt hiện trong vũng 7 - 14 ngày sau gõy nhiễm. Hàm lượng khỏng thể trong mỏu trõu gõy nhiễm Tiờn mao trựng sau 2 - 5 tuần là cao nhất. Lờ Ngọc Mỹ, Lương Tố Thu, Vũ đỡnh Hưng (1994) [19], Lờ Ngọc Mỹ, Vương Lan Phương, Phạm Sỹ Lăng (2001) [21], Lờ Ngọc Mỹ (1991-1994) [20], Trần đỡnh Từ, Hoàng Thạch và cộng sự (1987) [41] ủó sử dụng kỹ thuật ELISA ủể xỏc ủịnh khỏng nguyờn ở những trõu gõy nhiễm thấy rằng, khỏng nguyờn lưu hành ủược phỏt hiện trong vũng 7 - 14 ngày sau khi gõy nhiễm và sau 83 ngày sau khi ủiều trị khỏi bằng Berenil.
Lờ Ngọc Mỹ, Nguyễn Thị Giang Thanh, Lờ Minh Hà, Phạm Thị Tõm, Nguyễn Anh Dũng (2001) [22], cho biết: bũ sau khi nhiễm bệnh Tiờn mao trựng, hai tuần trong mỏu xuất hiện khỏng thể khỏng Tiờn mao trựng lưu hành, hàm lượng khỏng thể bắt ủầu cao dần ở tuần thứ 4 ủạt hàm lượng cao nhất ở tuần thứ 7 sau khi nhiễm bệnh. Bờ sau khi ủiều trị bệnh Tiờn mao trựng bằng Trypamidium với liều 1 mg/kg thể trọng trong một tuần, hàm lượng khỏng thể vẫn cũn cao trong mỏu (0,90), bắt ủầu giảm dần ở tuần thứ hai, tuần thứ ba nhưng vẫn cũn tồn tại trong mỏu kộo dài sau khi ủiều trị 2 - 3 thỏng.
Weir C.et a (1986) [71], Uilenberg, G (1988) [68], cho biết: Glycoprotein chịu trỏch nhiệm về sự thay ủổi tớnh khỏng nguyờn của T.evansị
Cấu trỳc khỏng nguyờn, ủặc tớnh, chức năng của Glycoprotein bề mặt là khú hiểu nhất của một khỏng nguyờn ký sinh trựng. Giai ủoạn nhõn lờn của
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ26
T.evansi ở trong mỏu dài hơn, cũn giai ủoạn Trypamastigote ngắn ngủị Sự nhõn lờn của T.evansi tiếp tục tới khi ký chủ cú khỏng nguyờn sản sinh khỏng thể làm ngưng kết, tiờu tan T.evansi. Khỏng thể xuất hiện làm số lượng
T.evansi giảm tụt xuống. T.evansi mới ủược xuất hiện lần ủõu, ngay sau ủú
T.evansi ủợt mới bị khỏng thể tiờu diệt, tới khi T.evansi phỏt triển giai ủoạn thứ bạ Quỏ trỡnh phỏt triển nhịp nhàng của T.evansi , khỏng thể của ký chủ ủó làm T.evansi suy yếu, trở nờn dạng chỉ cú thể gõy nờn thể bệnh món tớnh. Chu kỳ xuất hiện variants thường là bảy ngàỵ Sự thay ủổi tớnh khỏng nguyờn là do cú sự thay ủổi ủộ dày chất bề mặt của T.evansi.
Phạm Sỹ Lăng, Vương Lan Phương, Lờ Ngọc Mỹ (2001) [16] cho biết: khi bị bệnh do T.evansi, gia sỳc chứa một lượng lớn cỏc khỏng nguyờn khỏc nhau, hàng trăm glycoprotein khỏc nhau về tớnh khỏng nguyờn ủược gõy nhiễm một lần. Sự khỏc nhau của glycoprotein bề mặt trong thời gian gõy nhiễm là ngẫu nhiờn, mặc dầu khụng phải là tuyệt ủốị Những sự thay ủổi khỏng nguyờn ủặc biệt tạo ra tần số trong những khoảng thời gian cú thể sớm, muộn hay trung bỡnh. Khi gõy nhiễm T.evansi, trong thời gian xuất hiện khỏng thể của ký chủ, T.evansi biến ủộng cú lựa chọn hơn là vai trũ kớch thớch của khỏng thể. Thường cú khoảng 104 - 105 khỏng nguyờn T.evansi khỏc nhaụ
Garcia, F, Also, P.M (1992) [50], khi nghiờn cứu trờn ngựa gõy nhiễm cho biết, ngựa gõy nhiễm 106 T.evansi dạng Trypamastigote hai lần, mười ngày gõy nhiễm một lần, thời gian ủầu mật ủộ T.evansi giảm xuống, sự ngưng kết cú thay ủổi, chứng tỏ ký sinh ủó sản sinh khỏng thể khỏng T.evansi.
Lờ Ngọc Vinh (1992) [41] khi theo dừi về sự biến ủộng khỏng thể
T.evansi trong mỏu ủộng vật gõy nhiễm cho biết, trõu gõy nhiễm từ ngày 24 Ờ 30 thỡ nồng ủộ khỏng thể cao nhất, sau 90 ngày khỏng thể giảm dần, sau ủiều trị 4 Ờ 5 thỏng khỏng thể khụng cũn trong mỏụ Thỏ gõy nhiễm sau 4 Ờ 5 ngày khỏng thể T.evansi bắt ủầu xuất hiện, 8 Ờ 15 ngày khỏng thể cao nhất, sau 65
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ẦẦẦ27 ngày khỏng thể thấp dần.
Theo Turner (1984) [66], lứa tuổi cũng cú quan hệ ủến sức ủề khỏng bệnh Tiờn mao trựng. Bờ từ hai thỏng ủến một năm cú khỏng nguyờn sản sinh khỏng thể khỏng Tiờn mao trựng cao với bũ già.
Authie, E (1974) [43], cũng cho biết: trong cựng một giống gia sỳc, sự mẫn cảm của cỏc loài Tiờn mao trựng cũng khỏc nhaụ Ở Chõu Phi, bũ Taurine như Baoule, NỖdama, Muturu vẫn sống ủược ở những vựng cú mật ủộ cụn trựng gõy nhiễm cao, trong khi ủú bũ Zebu bị chết do bệnh Tiờn mao trựng. Sự gõy nhiễm tự nhiờn rất quan trọng, thậm chớ ủến ủời thứ ba của ủộng vật mẫn cảm cũng khụng cú khỏng nguyờn sống sút ở những vựng gõy nhiễm nặng.
Phan Lục (1996) [12], miễn dịch mang trựng ở bũ cú thể kộo dài 6 - 10 thỏng số ký sinh trựng ấy chết ủi thỡ con vật lại cú thể tỏi nhiễm. Nếu con vật tiếp tục nhiễm bệnh rồi lại qua khỏi nhiều lần thỡ sức miễn dịch ủú càng ủược củng cố.