b. Gelatin
3.2.2Thắ nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của pH, nhiệt ựộ, nồng ựộ và thời gian ựến
ựến hoạt tắnh xúc tác của enzyme α- amylase trên nguyên liệu xoài
a. Khảo sát ảnh hưởng của pH và nhiệt ựộ ựến hoạt tắnh của α- amylase
Ớ Mục ựắch: Tìm ra nhiệt ựộ và pH tối ưu của α-amylase trong khoảng nhiệt ựộ 80-950C và pH 5,5-7,0. F1 F2 F3 F4 E4 Dịch pure xoài F1 F2 F3 F4 E1 E2 E3 Cân Chỉnh pH
Bổ sung enzyme α- amylase
F1 F2 F3 F4 F1 F2 F3 F4
Vô hoạt enzyme α-amylase
Bổ sung enzyme glucoamylase (kết quả thắ nghiệm 1) Vô hoạt enzyme glucoamylase
Phân tắch hàm lượng ựường khử
Ớ Bố trắ thắ nghiệm
Thắ nghiệm ựược tiến hành với 2 nhân tố, 2 lần lặp lại Nhân tố E: pH E1: 5,5 E3: 6,5 E2: 6,0 E4: 7,0 Nhân tố F: nhiệt ựộ F1: 800C F3: 900C F2: 850C F4: 950C Tổng số nghiệm thức: 4ừ4= 16. Tổng số thắ nghiệm : 4ừ4ừ2= 32 Ớ Tiến hành thắ nghiệm
Lấy xoài ra rã ựông dưới vòi nước lạnh. Mỗi mẫu lấy 40g pure xoài và 160g nước cất theo tỷ lệ 1:4. Sau ựó chỉnh pH 5,5; 6,0; 6,5; 7,0 và theo dõi ở 4 mức nhiệt ựộ như trên: 80, 85, 90, 950C trong thời gian 30 phút. Tiếp theo ta tiến hành bổ sung enzyme glucoamylase (pH, nhiệt ựộ, nồng ựộ, thời gian lấy từ kết quả thắ nghiệm 1). Sau ựó ta vô hoạt enzyme glucoamylase bằng cách gia nhiệt dịch thủy phân ựến 900C trong 5 phút và xác ựịnh hàm lượng ựường khử.
b. Khảo sát ảnh hưởng của nồng ựộ và thời gian thủy phân ựến hoạt tắnh của α- amylase.
G1 G2 G3 G4 H4 Dịch pure xoài G1 G2 G3 G4 H1 H2 H3 Cân
Chỉnh pH, nhiệt ựộ theo kết quả trên
Bổ sung enzyme α-amylase
G1 G2 G3 G4 G1 G2 G3 G4
Vô hoạt enzyme α-amylase
Bổ sung enzyme gluco-amylase (kết quả thắ nghiệm 1)
Vô hoạt enzyme gluco-amylase
Phân tắch hàm lượng ựường khử
Ớ Bố trắ thắ nghiệm
Thắ nghiệm ựược tiến hành với 2 nhân tố, 2 lần lặp lại. Mẫu ựối chứng (đC): không bổ sung enzyme.
Nhân tố G: nồng ựộ enzyme
G1: 0,01% G3: 0,03%
G2: 0,02% G4: 0,04% Nhân tố H: thời gian thuỷ phân
H1: 10 phút H3: 30 phút H2: 20 phút H4: 40 phút
Tổng số nghiệm thức: (4ừ4)+1= 17. Tổng số thắ nghiệm : 17ừ2 = 34
Ớ Tiến hành thắ nghiệm
Lấy xoài ra rã ựông dưới vòi nước lạnh. Mỗi mẫu lấy 40g pure xoài và 160g nước cất theo tỷ lệ 1: 4. Sau ựó chỉnh pH, nhiệt ựộ từ kết quả khảo sát trên rồi bổ sung enzyme α- amylase với các nồng ựộ 0,01; 0,02; 0,03; 0,04% và theo dõi ở 4 mức thời gian như trên: 10; 20; 30; 40 phút. Tiếp theo ta tiến hành bổ sung enzyme glucoamylase (pH, nhiệt ựộ, nồng ựộ, thời gian lấy từ kết quả thắ nghiệm 1). Sau ựó ta vô hoạt enzyme glucoamylase bằng cách gia nhiệt dịch thủy phân ựến 900C trong 5 phút và xác ựịnh hàm lượng ựường khử.