Cân 2g mẫu thử chính xác đến 5mg vào bình nĩn. Dùng pipet lấy 25ml dung dịch KOH 0,5N cho vào mẫu thử, đặt vào đĩ 1 hay hai viên đá bọt. Nối bình với bộ phận sinh hàn, đặt lên bếp cách thủy và đun sơi từ từ, thỉnh thoảng lắc nhẹ trong thời gian đun 60 phút. Trường hợp dầu mỡ cĩ điểm nĩng chảy cao và khĩ xà phịng hĩa thì đun 2h. Sau đĩ lấy bình nĩn ra khỏi hệ thống đun hồn lưu, thêm vào dung dịch đang nĩng, thêm vào 5 giọt Phenolphtalein và chuẩn độ với dung dịch HCl 0,5N đến khi má hồng của chất chỉ thị biến mất.
Tiến hành đồng thời với mẫu trắng
c) Tính kết quả
Chỉ số xà phịng hĩa được tính theo cơng thức:
SV=( ) G N V V2− 1 × ×56.11 Trong đĩ:
V2: thể tích dung dịch HCl 0,5N dùng cho mẫu trắng (ml). V1: thể tích dung dịch HCl 0,5N dùng cho mẫu thử (ml). N: nồng độ chính xác của dung dịch HCl (mol/l).
G: khối lượng mẫu thử,(g).
56.11 trọng lượng phân tử của kalihydroxyt
Kết quả thu được làm trịn đến số thập phân thứ nhất và là trung bình cộng của hai phép thử liên tiếp hoặc song song nhau. Chênh lệch kết quả của hai phép thử khơng vượt quá 0,5% giá trị trung bình cộng
2.2.10. Phương pháp xác định chỉ số iốt [12,17,18,23]
Chỉ số Iod cho biết mức độ chưa no của dầu mỡ, chỉ số iod càng cao thì Tryglycerit càng chứa nhiều nối đơi. Tuy nhiên nhược điểm của chỉ số Iod là chỉ số cho biết mức độ chưa no mà khơng cho biết chi tiết cấu trúc dầu mỡ và thành phần acid béo chưa no.
- Cân phân tích, độ chính xác 0,0001g.
- Bình nĩn 500ml cĩ nút mài, sạch và được sấy khơ.
- Thìa cân bằng thủy tinh.
- Các hĩa chất sử dụng phải là loại hĩa chất tinh khiết phân tích.
- Nước.
- Dung dịch Na2S2O3 0,1N.
- Tetra Clorua Carbon (chất độc).
- Dung dịch KI 10% hay 100g/l, khơng cĩ Iodat hay Iod tự do.
- Dung dịch hồ tinh bột 0,5%: trộn 5g tinh bột vào 30ml, hịa tan thêm nước sơi vào cho đủ 1000ml đun sơi trong 3 phút, làm nguội.
- Dung dịch thuốc thử Wijs. Cĩ thể sử dụng loại thương phẩm. Chuẩn bị dung dịch Wijs như sau:
Hịa tan 9g ICl3 trong một lít hỗn hợp dung mơi: 700ml acid acetic đậm đặc + 300ml CCl4. Hàm lượng Halogen trong dung dịch được xác định như sau: thêm vào 5ml dung dịch ICl3 vào bình nĩn, thêm vào 5ml dung dịch KI 10%, thêm 3ml nước cất. Chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0,1N với chất chỉ thị hồ tinh bột. Ghi lượng Na2S2O3 đã dùng.
Thêm vào dung dịch ICl3 ban đầu 10g Iod và lắc cho tan xác định hàm lượng Halogen trong dung dịch như phương pháp trên. Lượng Na2S2O3 cần dùng lần sau phải bằng 1,5 lần so với lần đầu thì dung dịch hồn tất. Để tránh phản ứng thay thế Hydro, dung dịch Wijs phải khơng cĩ ICl3. Để lắng dung dịch, gạn phần trong vào chai nâu cĩ nút kín.
b) Tiến hành thử
Khối lượng mẫu thử thay đổi theo chỉ số Iod dự kiến được quy định như sau
Chỉ số Iod dự kiến
Khối lượng mẫu thử (g) <5 5-20 21-50 51-100 101-150 3,00 1,00 0,4 0,2 0,13
151-200 0,10 Khối lượng mẫu thử cân chính xác 0,1mg.
Cân mẫu thử vào thìa cân sạch, khơ đã biết khối lượng, đặt thìa cân cĩ mẫu thử vào bình nĩn. Thêm 15ml dung dịch C6H12 + CH3COOH (tỉ lệ 1/1) để hịa tan dầu mỡ. Thêm chính xác 25ml dung dịch Wijs, đậy nắp và lắc mạnh. Dung dịch Wijs được lấy bằng pipet cĩ gắn quả bĩp cao su, tuyệt đối khơng được dùng miệng. Tiến hành đồng thời với mẫu trắng tương tự như trên.
Với mẫu cĩ chỉ số iod < 150 để bình trong bĩng tối 1h.
Với mẫu cĩ chỉ số Iod > 150 và các sản phẩm polyme hĩa hoặc sản phẩm bị oxy hĩa tương đối lớn thì để 2h.
Sau đĩ, thêm vào dung dịch 20ml KI 10% và 100ml nước cho mỗi bình. Chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0,1 N đến khi mất màu vàng của Iod. Thêm vài giọt hồ tinh bột tiếp tục chuẩn độ đến khi lắc mạnh bình thì màu xanh biến mất. c) Tính kết quả: Chỉ số Iod = ( 2 − 1)× ×0.1269×100 G N V V Trong đĩ:
V2 thể tích dung dịch Natri thiosunfat 0.1N dùng chuẩn độ mẫu trắng, ml V1 thể tích dung dịch Natri thiosunfat dùng dể chuẩn độ mẫu dầu, ml 0.1269 :mg đương lượng của Iốt
N: nồng độ đương lượng của natri thiosunfat G: khối lượng mẫu dầu
Kết quả lấy trung bình của 2 lần xác định song song. Chỉ số Iốt dưới 100, khơng sai khác quá 1
Chú ý:
- Trọng lượng dầu khơng vượt quá quy định ở bảng trên (cân chính xác đến 0.001g
- Ánh sáng và nước cĩ tác dụng với ICl nên dụng cụ thí nghiệm cần phải thật khơ và sạch, dung dịch Wijjs cần phải được đựng trong bình màu và bảo quản chỗ tối.
- Dung dịch Wijjs phải pha trong acid axetic tinh khiết nên sử dụng trong hai tháng kể từ lúc mới bắt đầu pha.
- Tốc độ cho dung dịch Wijjs vào bình nĩn ở mỗi thí nghiệm phải đều nhau.
2.2.11. Phương pháp xác định chỉ số peroxyt [12,17,18,24]
Chỉ số peroxyt (PoV) là số mg đương lượng của oxy hoạt hố cĩ trong 1kg mẫu thử. Chỉ số Peroxyt biểu thị cho sự oxy hố của chất béo. Kali Iodua trên kilogram mẫu dưới các điều kiện thao tác được qui định.
Nguyên tắc: Chỉ số Peroxyt tạo thành trong quá trình ơi hố của chất béo, trong mơi trường acid cĩ khả năng phản ứng với KI giải phĩng I2
Định phân Iốt tạo thành bằng dung dịch Natri thiosunfat Na2S2O3 + I2 2NaI + Na2S4O6
Chỉ số peroxyt được tính bắng số mili-đương lượng thiosunfat kết hợp với lượng I2 được giải phĩng