nảy mầm của khoai tõy củ bi in vitro
Sau khoảng thời gian 7- 8 tuần tạo củ, cõy khoai tõy trong bỡnh tạo củ cú thõn và lỏ hộo, ỳa vàng, chỳng tụi tiến hành thu hoạch củ. Củ bi sau khi thu hoạch được chia ra làm 2 loại kớch thước đường kớnh củ (>0,5cm và <0,5cm) và bảo quản trong phũng nuụi cõy (nhiệt độ 2720C). Những củ bị hỏng chuyển sang thõm ỳa, vỏ nhăn nheo và bị mềm. Theo dừi thời gian ngủ nghỉ của từng giống theo 2 loại kớch thước củ bằng cỏch giõm củ trờn khay cỏt và tưới nước hàng ngày. Sau thời gian ngủ nghỉ của củ, chỳng tụi tiến hành trồng
củ bi và theo dừi tỉ lệ nảy mầm ở 2 loại kớch thước củ trong 15-20 ngày sau khi trồng. Kết quả thu được ở bảng 3.4.
Bảng 3.4. Thời gian ngủ và mức độ hao hụt của củ bi trong bảoquản
Giống Củ cú đường kớnh <0,5 cm Củ cú đường kớnh >0,5 cm Tỷ lệ hao hụt/bỡnh (%) Tỷ lệ củ hỏng/bỡnh (%) Thời gian ngủ (ngày) Tỉ lệ củ khụng nảy mầm(%) Tỷ lệ củ hỏng/bỡnh (%) Thời gian ngủ (ngày) Tỉ lệ củ khụng nảy mầm (%) Solara 27,930,66 45 – 50 10,220,12 15,990,45 75 - 80 10,020,10 28,92 Diamant 25,910,09 45 – 50 9,010,05 12,990,16 82 - 85 8,450,22 24,75
Kết quả bảng 3.4 cho thấy, kớch thước củ bi ảnh hưởng lớn đối với chất lượng củ trong thời gian bảo quản. Kớch thước củ quỏ nhỏ sẽ khú khăn trong quỏ trỡnh bảo quản, tỉ lệ củ bị hao hụt do khụ hộo và thối cao. Như vậy củ bi kớch thước quỏ nhỏ sẽ bị hao hụt nhiều khi bảo quản nờn để tăng hiệu quả sử dụng củ bi in vitro, trong quỏ trỡnh tạo củ cần hạn chế sự xuất hiện củ cú kớch thước quỏ nhỏ <0,5cm). Tỉ lệ củ bi khụng nảy mầm khụng chịu ảnh hưởng rừ ràng của kớch thước củ, tỉ lệ này dao động từ 8,45%- 10,22%.
a) Nảy mầm của củ bi cú kớch
thước <0,5cm (sau 50 ngày)
b)Nảy mầm của củ bi cú kớch
thước >0,5cm (sau 80 ngày)
c) Cõy con mọc từ củ bi in vitro (sau khi trồng 20 ngày)
Hỡnh 3.4. Khả năng nảy mầm của củ bi in vitro
Theo nghiờn cứu của chỳng tụi, khoai tõy bi cú kớch thước <0,5cm cú thời gian ngủ nghỉ ngắn hơn khoai tõy củ bi cú kớch thước > 0,5cm. Giống Diamant
luụn cú thời gian ngủ nghỉ dài hơn giống Solara ở những củ cú kớch thước đường kớnh củ >0,5cm. Dựa vào kết quả của bảng 3.1 và bảng 3.4, chỳng tụi tớnh toỏn tỷ lệ củ thu được trong một bỡnh tạo củ cú thể sử dụng trồng ngoài đồng ruộng từ 71,08% - 75,25%.
* Nhận xột: Sử dụng mụi trường nuụi cấy đó được nghiờn cứu [39] chỳng tụi nhận thấy:
- Hiệu quả nuụi cấy cao nhất ở mật độ chồi 14-15 chồi/bỡnh tam giỏc 250ml và cú thể sử dụng mọi vị trớ đoạn cắt trờn cõy khoai tõy in vitro.
- Giai đoạn nhõn chồi: Với mụi trường MS cơ bản + aga 1%+ saccharose 2% + NAA 0,2 mg/ + BAP 1,5 mg/l [39] và cấy với mật độ 14 –15 chồi/bỡnh, thời gian cần thiết cho sự sinh trưởng của chồi là 2- 3 tuần.
- Giai đoạn tạo củ: Với mụi trường MS cơ bản+ nước dừa 15%+
sacchaose 8%+ 9- 9,5 mg/l [39] và cấy với mật độ 15 chồi/bỡnh thỡ thời gian cần thiết cho thu hoạch củ bi từ 7- 8 tuần.
- Giai đoạn ngủ nghỉ: Với điều kiện bảo quản củ trong phũng tối nhiệt độ phũng 270C20C và củ được dải trờn khay cỏt thỡ thời gian cho giai đoạn là
45- 85 ngày tuỳ thuộc vào từng giống và kớch thước củ bi.
Như vậy, thời gian cho cả quy trỡnh nuụi cấy in vitrođể cú củ giống trồng ngoài đồng ruộng (từ giai đoạn nhõn chồi đến hết giai đoạn ngủ của củ) là 15-
23 tuần tuỳ vào giống và kớch thước củ bi.