trên P. monodon
- Thử nghiệm lại quy trình In Situ hybridization trong việc chẩn đoán mầm bệnh WSSV trên tôm sú P. monodon một cách hiệu quả, từ đó cho thấy tính ổn định, độ nhạy và độ chính xác của phƣơng pháp này khi dùng trong chẩn đoán mầm bệnh đốm trắng trên tôm sú.
- Trong quá trình thực hiện thí nghiệm chúng tôi đã tìm đƣợc quy trình In Situ
hybridization tối ƣu để chẩn đoán WSSV áp dụng trong điều kiện phòng thí nghiệm tại Viện nhƣ sau:
Thay thế các hóa chất thông dụng nhƣ cồn, xylene và paraformaldehyde không có trong bộ kit bằng những hóa chất do Trung Quốc và Việt Nam sản xuất với giá thành tƣơng đối rẻ hơn, nên giảm đƣợc chi phí thực hiện chẩn đoán và phù hợp
điều kiện hiện tại của phòng thí nghiệm Mô học TTQGQTCBMT & PNDBTSKVNB của Viện.
Tìm đƣợc quy trình ISH áp dụng trong điều kiện phòng thí nghiệm nhƣ áp dụng kết hợp quy trình xử lý mẫu nhanh với việc biến tính mẫu và probe đồng thời trên lame trƣớc khi lai, đã giúp rút ngắn đƣợc thời gian chẩn đoán và thao tác đơn giản hơn quy trình của bộ kit.
- Ứng dụng quy trình vừa tìm đƣợc để phát hiện mầm bệnh đốm trắng trên tôm sú ở các giai đoạn khác nhau (postlarvae, tôm thƣơng phẩm) cho thấy độ nhạy, độ ổn định, độ đặc hiệu và chính xác cao của phƣơng pháp này.
- Thực hiện chẩn đoán so sánh phƣơng pháp ISH với phƣơng pháp mô học và PCR trong chẩn đoán mầm bệnh WSSV trên P. monodon, chúng tôi nhận thấy phƣơng pháp ISH có độ nhạy, độ ổn định và chính xác cao hơn phƣơng pháp mô học và PCR. Phƣơng pháp ISH khắc phục đƣợc nhƣợc điểm kém chính xác của mô học và khắc phục đƣợc nhƣợc điểm dƣơng tính giả của PCR.
- Chi phí phân tích một mẫu tôm bằng ISH khoảng 100.000 đồng/mẫu, đắc hơn mô học 50.000 đồng/mẫu nhƣng rẻ hơn PCR 140.000 đồng/mẫu. Kết hợp với những kết quả nhƣ trên, chúng tôi nhận thấy rằng phƣơng pháp ISH có khả năng ứng dụng chẩn đoán mầm bệnh do WSSV trên tôm sú P. mondon.