Chitin thô thu được có màu hồng nhạt do còn sắc tố astaxanthin. Do chitin
ổn định với các chất oxy hoá như thuốc tím (KMnO4), oxy già (H2O2), nước javen (NaOCl+NaCl), Na2S2O3, CH3COCH3,…lợi dụng tính chất này chúng tôi
đã sử dụng KMnO4, H2O2để khử màu cho chitin. • Cách 1:
Dùng hỗn hợp KMnO4 1% + C2H2O4 1% để tẩy màu. Trước tiên chúng tôi cho chitin thô (phân lập từ 40g vỏ tôm) vào cốc thuỷ tinh, sau đó cho dung dịch KMnO4 1% (10ml) vào, khuấy đảo sao cho toàn bộ chitin đều ngấm dung dịch KMnO4 1%, để ở nhiệt độ phòng trong thời gian 1 giờ. Hỗn hợp được rửa sạch, sản phẩm chitin lúc này có màu tím của KMnO4. Để loại màu tím chúng tôi sử
dụng 50ml axit oxalic 1% ((COOH)2), để tăng nhanh khả năng tẩy màu chúng tôi
đun nóng hỗn hợp dung dịch ở nhiệt độ 50 - 600C đến khi chitin có màu trắng hoàn toàn.
Theo cách này một số tác giả rằng sản phẩm của phản ứng có tạo ra Mn2+, mà trong chitin - chitosan có nhóm –NHCOCH3 và nhóm –NH2, do đó các nhóm này có thể tạo phức với Mn2+ gây ra hiện tượng khâu mạch làm ảnh hưởng đến phản ứng chuyển hoá tiếp theo.
• Cách 2:
Dùng H2O2 1% để tẩy màu. Chitin thô (phân lập từ 40g vỏ tôm) cho vào cốc thuỷ tinh, sau đó cho 60ml dung dịch H2O2 1% vào ngập toàn bộ chitin, để
qua đêm ở nhiệt độ phòng. Chitin thu được có màu trắng phớt hồng. Chúng tôi dùng H2O2 với nồng độ <1,5% để tránh hiện tượng oxy hoá phá mạch phân tử
http://www.ebook.edu.vn
chitin - chitosan. Với phương pháp này chitin thu được vẫn còn màu phớt hồng, nếu đem đun nóng nhẹ lên khoảng 50 - 600C thì thu được chitin trắng hơn.
Chitin sau quá trình tẩy màu được rửa sạch bằng nước thường và được rửa lại với nước cất. Sấy khô ở nhiệt độ 600C, thu được chitin khô sạch có màu trắng. Lượng chitin thu được dao động từ 10,87g – 14,33g (27 – 36%).
4.2. Điều chế chitosan
Phương trình phản ứng điều chế chitosan từ chitin :
O NHCOCH3 OH CH2OH * O * n nNaOH 50% 110-1200C O NH2 OH CH2OH * O * n + nCH3COONa
Quá trình điều chế chitosan từ chitin thực chất là quá trình deacetyl hoá (deacetylation) chitin, chuyển hoá nhóm –NHCOCH3 thành nhóm –NH2 và loại bỏ nhóm acetyl -CH3CO, chuyển hoá thành muối natri (CH3COONa). Để thực hiện được quá trình deacetyl hoá hoàn toàn, chúng tôi sử dụng NaOH đậm đặc 50%, thời gian là 4 giờ với nhiệt độ ở 110 - 1200C. Ở đây dựa vào tính chất chitosan tan được trong dung dịch axit loãng tạo thành dung dịch keo trong suốt, trong khi đó chitin không tan do đó chúng tôi sơ bộ kiểm tra mức độ chuyển hóa chitin thành chitosan bằng cách lấy một ít sản phẩm cho vào CH3COOH 1%, nếu sản phẩm tan tạo thành dung dịch keo trong suốt là được. Sau đó rửa trung tính và sấy khô, chitosan thu được có màu trắng sáng. Quá trình điều chế chitosan từ
chitin cho hiệu suất tương đối cao (63,3 – 74,7%).