4. Kết quả khảo sát khả năng bảo quản sản phẩm khi sử dụng chất bảo quản Kali sorbate
1.4.Phân tích chỉ tiêu vi sinh vật tổng số
Ngành Công nghệ thực phẩm – Khoa Nông nghiệp & Sinh học ứng dụng 45
* Chuẩn bị môi trường
- Cân các môi trường nuôi cấy và hòa tan trong nước cất với hàm lượng xác định trong bình cầu (hoặc bình tam giác). Dùng bông gòn không thấm nước bịt kín miệng bình.
- Đun nóng môi trường để hòa tan hoàn toàn các thành phần môi trường trong nước.
- Pha loãng dung dịch nước muối nồng độ 0,85%. Dùng ống đong đong 9ml nước muối đã pha loãng cho vào ống nghiệm, vặn nắp ống nghiệm kĩ.
- Rửa sạch đĩa petri, các dụng cụ cấy vi sinh, pipet. Dùng giấy nhật trình gói tất cả các dụng cụ trên đểđưa vào tủ thanh trùng.
-Tiến hành thanh trùng ướt môi trường, dụng cụ thủy tinh, dụng cụ cấy vi sinh, nước muối sinh lí ở 121oC trong thời gian khoảng 45-60 phút.
* Chuẩn bị mẫu * Tiến hành cấy
Nguyên tắc: đếm số khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch dinh dưỡng từ một lượng mẫu xác định trên cơ sở mỗi khuẩn lạc hình thành từ một tế bào duy nhất.
Môi trường: Nutrient Agar hoặc Plate Count Agar.
Tiến hành: sử dụng phương pháp pha loãng mẫu và đếm đĩa ở những nồng độ pha loãng khác nhau. Mỗi mẫu tiến hành nuôi cấy ở 2 nồng độ pha loãng liên tiếp, mỗi nồng độ 2 đĩa.
Dùng pipet vô trùng lấy 1 ml mẫu pha loãng cho vào giữa đĩa petri, rót vào mỗi mẫu khoảng 15 ml thạch dinh dưỡng, lắc tròn đĩa xuôi và ngược chiều kim đồng hồ, mỗi chiều 5 lần, đặt đĩa lên mặt phằng ngang cho đông tự nhiên. Khi môi trường đã đông lật úp đĩa và đặt vào tủấm 37oC trong 24-48 giờ.
- Đọc kết quả: đếm số khuẩn lạc trên các đĩa, dùng những đĩa có số đếm phù hợp (25-250 theo FDA) để tính giá trị trung bình của các nồng độ pha loãng và quy ra lượng vi sinh vật trong 1 ml mẫu, kết quả được tính là số khuẩn lạc (cfu) trên 1ml mẫu.
- Kết quảđược tính theo công thức:
d n n n n C X i n ) 10 ... 10 10 ( ( 1) 3 2 2 1 1 − − − + + + + = ∑ Trong đó: X: số khuẩn lạc trên 1ml mẫu. ∑C: tổng số khuẩn lạc đếm được ở các đĩa.
n1: sốđĩa đếm được ở nồng độ pha loãng thứ nhất. n2: sốđĩa đếm được ở nồng độ pha loãng thứ hai.
Ngành Công nghệ thực phẩm – Khoa Nông nghiệp & Sinh học ứng dụng 46 ni: sốđĩa đếm được ở nồng độ pha loãng thứ i.
Ngành Công nghệ thực phẩm – Khoa Nông nghiệp & Sinh học ứng dụng 47