• Môi trường: Lactoza 10 g Cao men 1 g Thạch 20 g Nước cất 1000 ml pH = 7,0-7,2
Khử trùng ở 115 0C trong 20-30 phút, đổ đĩa Petri.
• Lấy vi khuẩn mới hoạt hoá (18-24 giờ) cấy điểm lên thạch đĩa, đặt ở nhiệt độ thích hợp trong 2 ngày để tạo khuẩn lạc rõ rệt.
• Pha thuốc thử Benedict:
CuSO4.5H2O 17,3 g Na2CO3 (khan) 100 g Na-Citrat 173 g
Nước cất thêm tới 1000 ml
Cách pha: hoà Na2CO3 và Na-Citrat trong 600 ml nước cất, lọc trong, sau đó thêm nước tới 850ml. Hoà tan CuSO4 trong 100 ml nước, bổ sung nước cho tới 150 ml. Cuối cùng trộn dung dịch CuSO4vào dung dịch đầu, vừa đổ vừa khuấy.
• Nhỏ thuốc thử Benedict lên khuẩn lạc trên mặt đĩa thạch, để từ 30 phút trở lên ở nhiệt độ phòng.
• Kết quả: nếu quanh khuẩn lạc xuất hiện những kết tủa màu nâu thì là phản ứng dương tính, nếu không thì là âm tính.
• Kết quả: nếu quanh khuẩn lạc xuất hiện những kết tủa màu nâu thì là phản ứng dương tính, nếu không thì là âm tính.
Nước thịt pepton 1000 ml KNO3 1 g pH = 7,0-7,6
Phân môi trường vào các ống nghiệm (4-5 ml/ống), khử trùng ở 121 0C trong 15-20 phút. • Chuẩn bị thuốc thử Griess:
Dung dịch A: Acid sulfanilic 0,5 g Acid acetic loãng (khoảng 10%) 150 ml. Dung dịch B: Alpha Naphtylamin 0,1 g
Nước cất 20 ml Acid acetic loãng (khoảng 10%) 150 ml.
• Chuẩn bị thuốc thử Diphenylamin: 0,5 g Diphenylamin hòa vào 100 ml H2SO4 đặc, thêm 20ml nước cất.
• Cấy vi khuẩn mới hoạt hoá vào môi trường (mỗi chủng cấy 2 ống), đặt ở nhiệt độ thích hợp trong 1,3,5 ngày. Chọn 2 ống không cấy vi khuẩn để làm đối chứng.
• Lấy ống nghiệm sạch và bổ sung lần lượt các dung dịch như sau: Dịch nuôi cấy vi khuẩn (hoặc môi trường ở ống đối chứng) 1 giọt dung dịch A