Tiến hành:
Cân chính xác 100mg mẫu, cho vào bình định mức 100ml. Bổ sung thêm 1ml rượu etylic 95%, thêm 9ml NaOh 1N rồi đun sôi cách thủy tron 10 phút. Làm nguội đến nhiệt độ phòng rồi để yên trong 2h. Định mức hỗn hợp thu được lên 100ml bằng nước cất rồi lấy chính xác 5ml dung dịch vừa định mức cho vào bình định mức 100ml có chứa sẵn 50ml nước cất. Bổ sung thêm 5ml dung dịch NaOH 0,09N, thêm 1ml CH3COOH 2N, thêm tiếp 2ml dung dịch I2 0,2%. Định mức lên 100ml bằng nước cất. Để yên hỗn hợp trong 20 phút rồi tiến hành đo OD ở bước song 620 nm.
* Xây dựng đường cong chuẩn bằng hỗn hợp amiloza với các thành phần khác nhau.
+ Pha chế các dung dịch amyloza (AM) và amylopectin (AP) nồng độ 1g/l: Cân 100mg mẫu (gồm AM và AP) rồi chuyển vào bình định mức 100ml. Thêm 1ml rượu etylic 95%, thêm 9ml NaOH 1N rồi đun sôi cách thủy trong 10 phút. Làm nguội đến nhiệt độ phòng rồi để yên trong 2h. Định mức đến 100ml bằng nước cất, thu được dung dịch AM và AP 1mg/ml.
+ Pha các dung dịch hỗn hợp AM và AP với hàm lượng AM khác nhau dựa trên tỉ lệ dung dịch AM và AP theo bảng sau:
Hàm lượng AM (%) Tỷ lệ thể tích của các dung dịch (ml/100ml) AM (1mg/ml) AP (1mg/ml) NaOH 0.09N 0 0 7.0 3 10 1.0 6.0 3 20 2.0 5.0 3
25 2.5 4.5 3
30 3.0 4.0 3
+ Lấy 5ml dung dịch hỗn hợp AM và AP (với các nồng độ khác nhau) chuyển vào bình định mức 100ml đã chứa sẵn 50ml nước cất. Thêm 5ml dung dịch NaOH 0.09N, 1ml CH3COOH 1N. 2ml I2 0.2% rồi định mức đến 100ml bằng nước cất, để yên trong 20 phút rồi đo OD ở bước sóng 620nm.