PHẦN III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập các chủng Bacillus subtilis từ tương Nam Đàn
3.5. Kết quả tối ưu điều kiện nuôi cấy chủng Natto
* Kết quả tối ưu nhiệt độ
Tiến hành khảo sát khả năng sinh trưởng phát triển và sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở các
Hình 10: Khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 30oC
(Tham khảo bảng P – 3)
Qua khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 30oC nhận thấy, chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất là 78,47% ở pha phát triển lũy tiến.
Hình 11: Khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 35oC
Qua khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 35oC nhận thấy, chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất là 78,47% ở cuối pha phát triển lũy tiến.
Hình 12: Khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 40oC
(Tham khảo bảng P – 5)
Qua khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 40oC nhận thấy, chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất là 82,23% ở cuối pha phát triển lũy tiến.
Hình 13: Khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 45oC
(Tham khảo bảng P – 6)
Qua khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở 45oC nhận thấy, chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất là 57,68% ở pha cân bằng.
Kết luận:
Qua kết quả khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α- glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở các nhiệt độ khác nhau, nhận thấy chủng Natto thường cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao ở cuối pha phát triển lũy tiến. Trong đó, chủng Natto cho hoạt tính ức
chế α-glucosidase thấp nhất ở 45oC (57,68%), cao nhất ở 40oC (82,23%). Điều đó cho thấy nhiệt độ có ảnh hưởng khá lớn đến tốc độ sinh trưởng, phát triển và khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase.
Chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất ở 40oC nên chọn nhiệt độ tố ưu là 40oC.
* Kết quả tối ưu pH
Hình 14: Khảo sát ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto
(Tham khảo bảng P – 7, P – 8, P – 9, P – 10, P – 11, P – 12, P – 13) Kết luận:
Qua khảo sát ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto ở dải pH 4 – 9, nhận thấy ở các pH khác nhau chủng Natto đều có hoạt tính ức chế α-glucosidase. Trong đó, chủng Natto cho hoạt tính ức chế α-glucosidase thấp nhất ở pH 9 (71,48%), cao nhất ở pH 5 (83,73%). Điều đó cho thấy chủng Natto có khả năng phát triển trong khoảng pH rộng. Tuy nhiên, pH ít có ảnh hưởng đến hoạt tính ức chế α-glucosidase. Qua kết quả thu được, chọn pH tối ưu là 5.
* Kết quả tối ưu nồng độ cơ chất
Hàm lượng Nitơ tổng có trong cơ chất (đậu tương, đậu đen, đậu xanh) được xác định bằng phương pháp Kjendahl. Kết quả thể hiện trong
Bảng 4. Hàm lượng Nitơ tổng có trong cơ chất
Cơ chất Hàm luợng Nitơ tổng
Đậu xanh 32%
Đậu đen 28%
Đậu tương 34%
Peptone 14%
Cao nấm men 74%
- Tiến hành khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto sử dụng các cơ chất: đậu đen, đậu xanh, đậu tương với hàm lượng Nitơ tổng 1,5%.
Hình 15: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ cơ chất đến khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase
(Tham khảo bảng P – 14, P – 15, P – 16)
Qua khảo sát ảnh hưởng của nồng độ cơ chất đến hoạt tính ức chế α-glucosidase từ chủng Natto, nhận thấy sử dụng cơ chất đậu tương cho
hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất (70,60%). Vì vậy, chọn đậu tương làm cơ chất để tiếp tục tiến hành nghiên cứu.
- Tiến hành khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto sử dụng cơ chất đậu tương.
Hình 16: Khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto sử dụng cơ chất đậu tương
(Tham khảo bảng P – 17, P – 18, P – 19, P – 20, P – 21) Kết luận:
Qua khảo sát khả năng sinh tổng hợp chất ức chế α-glucosidase từ canh trường nuôi cấy của chủng Natto sử dụng cơ chất đậu tương với hàm lượng Nitơ tổng là 5% cho hoạt tính ức chế cao nhất là 85,75%.