Chiết xuất vitaminA (retinol)

Một phần của tài liệu Định lượng vitamin a bằng phương pháp HPLC (Trang 25 - 27)

• Chuyển lượng chứa trong bình cầu sang ống chiết hình trụ

• Rửa sạch bình cầu hai lần, mỗi lần dùng 25 ml etanol hoặc cồn metyl công nghiệp và chuyển nước tráng sang ống chiết hình trụ.

• Lặp lại việc rửa bình cầu hai lần, mỗi lần dùng 125 ml dầu nhẹ và một phần 250 ml nước ,mỗi lần tráng chuyển nước rửa sang ống chiết hình trụ.

• Đậy nắp ống chiết hình trụ và lắc đều trong 1 min, thỉnh thoảng chú ý giải phóng áp suất.

• Làm nguội ống chiết hình trụ dưới dòng nước lạnh trong khi đợi tách hai pha lỏng, trước khi tháo bỏ nắp.

• Khi đã tách lớp, tháo bỏ nắp, rửa mặt trong nắp bằng một vài mililit dầu nhẹ và chèn ống có thể điều chỉnh ,chỉnh vị trí đầu dưới sao cho chỉ hơi trên mức phân lớp.

• Bằng cách áp dụng một áp lực nhẹ của khí trơ vào ống bên cạnh, chuyển lớp dầu nhẹ phía trên sang phễu chiết 1 lít .

• Thêm 125 ml dầu nhẹ vào ống chiết hình trụ, đậy nắp và lắc đều 1 phút.

• Để tách lớp lại và chuyển lớp trên sang phễu chiết bằng cách sử dụng ống có thể điều chỉnh như trên.

• Thêm tiếp 125ml dầu nhẹ vào ống chiết hình trụ, đậy nắp và lắc đều 1 phút.

• Lại để cho tách lớp và chuyển lớp trên sang phễu chiết bằng cách sử dụng ống điều chỉnh như trên.

• Rửa sạch các dịch chiết dầu nhẹ với bốn phần, mỗi phần 100 ml nước, lúc đầu chỉ nhẹ nhàng đảo ngược sau đó lắc nhẹ để giữ cho việc hình thành nhũ tương ở mức tối thiểu.

• Chuyển dịch chiết đã rửa qua giấy lọc trung bình/nhanh có chứa 60 g natri sulfat khan vào một bình cầu thích hợp để bay hơi chân không.

• Rửa sạch phễu chiết hai lần, mỗi lần dùng 20 ml dầu nhẹ và cho nước rửa qua bộ lọc vào bình cầu làm bay hơi.

• Rửa bộ lọc tiếp hai lần, mỗi lần dùng 25 ml dầu nhẹ và cho nước rửa vào bình làm bay hơi.

• Làm bay hơi dịch chiết dầu nhẹ đến khô dưới chân không ở nhiệt độ không quá 40 0C.

Một phần của tài liệu Định lượng vitamin a bằng phương pháp HPLC (Trang 25 - 27)