Máy khối phổ sử dụng một chùm electron bắn vào một lƣợng nhỏ chất thử, phá chúng thành nhiều mảnh ion mang điện dƣơng. Các mảnh ion này nhờ một bộ phận phát hiện và ghi thành pic với cƣờng độ khác nhau tƣơng ứng với lƣợng khối của mỗi ion, đó là khối phổ. Đa số ion phân tử (ion mẹ) bị phá rất nhanh từ 10-10 đến 10-3 giây để hình thành các mảnh ion mang điện dƣơng, những ion này lại tiếp tục bị phá thành những ion nhỏ hơn. Chỉ có một số ít ion phân tử chƣa kịp bị bắn phá di chuyển đến bộ phận tập hợp và thể hiện thành pic ion phân tử trên phổ, pic này sẽ cho ta biết khối lƣợng phân tử của chất thử. Giá trị lớn của khối phổ là việc ứng dụng các mảnh ion tạo nên để phân tích cấu trúc các hợp chất hữu cơ. Vì vậy, kết quả phân tích khối phổ cho chúng ta khối lƣợng phân tử của hợp chất và cấu trúc sơ bộ của chúng.
SV. Nguyễn Thị Tâm 23 K40C – Hóa học
CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG THỰC NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Mẫu thực vật
Mẫu Đu đủ rừng Trevensia palmata (Robx. ex Lindl.) Vis. đƣợc thu hái ở Hà Giang vào tháng 7/2017. Mẫu đƣợc giám định bởi TS. Bùi Văn Thanh, Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật. Tiêu bản đƣợc lƣu trữ tại phòng Nghiên cứu cấu trúc, Viện Hóa sinh biển.
2.2. Phƣơng pháp phân lập các hợp chất.
2.2.1. Sắc kí lớp mỏng ( TLC)
Sắc ký lớp mỏng (TLC) đƣợc thực hiện trên bản mỏng tráng sẵn DC- Alufolien 60 F254 và RP18 F254 (Merck-Đức). Các vết chất đƣợc phát hiện bằng đèn tử ngoại ở hai bƣớc sóng 254 và 368 nm hoặc dùng thuốc thử là dung dịch H2SO410% phun đều lên bản mỏng rồi sấy ở nhiệt độ cao cho đến khi hiện màu.
2.2.2. Sắc kí lớp mỏng điều chế
Sắc kí lớp mỏng điều chế thực hiện trên bảng mỏng tráng sẵn Silica gel 60G F254 (Merck, kí hiệu 105875), phát hiện vệt chất bằng đèn tử ngoại hai bƣớc sóng 254 nm và 368 nm, hoặc cắt rìa bản mỏng để phun thuốc thử là dung dịch H2SO4 10%, hơ nóng để phát hiện vệt chất, ghép lại bản mỏng nhƣ cũ để xác định vùng chất, sau đó cạo lớp Silicagel có chất, giải hấp phụ bằng dung môi thích hợp.
2.2.3. Sắc kí cột
Sắc ký cột (CC) đƣợc tiến hành với chất hấp phụ pha thƣờng (Silica gel 240-430 mesh, Merck). Silica gel pha đảo ODS hoặc YMC (30-50) μm, FuJisilisa Chemical Ltd.).
SV. Nguyễn Thị Tâm 24 K40C – Hóa học