Tinh bột từ những nguồn khác nhau chứa hàm lượng amilose và amilopectin khác nhau . Những thành phần này ảnh hưởng đế tính chất vật lý như khả năng tạo gel, tạo bọt, hấp thụ nước và cả độ nhớt của dịch bột. Vì những lý do này mà hàm lượng amilo cần phải xác định chính xác. Những nghiên cứu trước đây đã cho thấy rằng phương pháp đo màu (dựa trên sự hình thành phức của Iod và amilose) bị ảnh hưởng bởi chiều dài của chuổi amilopectin, chiều dài của chuổi amilopectin là khác
nhau ở những nguồn thực vật khác nhau. Ví dụ chuổi amilopec tin trong tinh bột khoai tây là dài hơn so với bột ngủ cốc điều này làm tăng độ hấp thu dẫn tới hàm lượng amilose được tính toán là lớn hơn.
Nguyên tắc xác định amilose trong tinh bột bao gồm các bước như sau:
+ Loại béo ra khỏi tinh bột
+Hòa tan tinh bột bằng DMSO
+ Xác định độ hấp thu ở bước sóng 600nm của dịch tinh bột sau khi hòa tan
+ Xây dựng đường chuẩn cho dãy có hàm lượng amilose tương ứng từ 0% đến 100% của hổn hợp gồm amilose và amilopectin
+ Tính toàn hàm lượng amilose từ phương trình đường chuẩn
Mẫu Cân 5 g Túi màng celluloseChận bông thủy tinh
+ 170ml propanol 80% Chiết Soxhlet 850C
7h
Sấy ở 300C trong vòng 12h
Mẫu tinh bột loại béo
Quá trình loại béo
Mẫu tinh bột loại béo Cân 20mg Chuẩn amilo và Amilopectin
0% - 20%-40%- 60% -80%- 100% Amilose (20mg) Hút Hút 8ml DMSO 90% 8ml DMSO 90% 850C 850C 15 phút 15 phút Để nguội Để nguội + H2O + H2O Vđm= 25ml Vđm=25ml Hút Hút Vxđ= 1ml Vxđ= 1ml + 40ml H2O + 40ml H2O + 1ml I2 + 1ml I2 Vđo= 50ml A0,A1, A2,A3,A4…Ax Quá trình định lượng