Các số liệu thu được được xử lý bằng Microsoft Excel. Giá trị trung bình TB: Hàm AVERAGE.
Độ lệch chuẩn SD: Hàm STDEV.
Độ lệch chuẩn tương đối: RSD(%) = SD
TB * 100
Xây dựng đường tuyến tính bằng tính năng Charts trong Excel, kết quả đo độ hấp thụ quang áp dụng vào phương trình tuyến tính để tính nồng độ các chất.
18
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 3.1. Phân lập emodin và physcion bằng sắc ký lớp mỏng điều chế
Tiến hành điều chế cao toàn phần từ bột cốt khí củ như mục 2.3.1, làm 3 lần,
kết quả được thể hiện trong Bảng 3.1
Bảng 3.1. Khối lượng cao toàn phần thu được từ dịch chiết bột cốt khí củ. Khối lượng
dược liệu (g)
Khối lượng cao sau cô đặc (g)
Tỷ lệ % cao chiết thu được (%)
Lần 1 50,05 8,69 17.36
Lần 2 50,08 8,34 16.65
Lần 3 50,07 7,21 14.40
Trung bình 16.12
Để lựa chọn dịch chấm sắc kí thích hợp cho việc phân lập emodin và physcion
bằng sắc ký lớp mỏng, tiến hành khảo sát các tỷ lệ của cao : dung môi như Bảng
3.2 bằng sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi Toluen: EtOHtđ: Acid aceticbăng
(8:2:0.5), kết quả cho thấy ở tỉ lệ 1:10 (1g cao: 10ml EtOH) cho sắc kí đồ có các
vết tách rõ nét nhất và dịch chiết có thể chất tốt (Hình 3.1), vì vậy tỉ lệ này được
chọn để chuẩn bị dịch chiết cho quá trình sắc ký lớp mỏng.
Bảng 3.2. Khảo sát tỉ lệ khối lượng cao chiết và dung môi
Tỉ lệ 5:1 4:1 3:1 2:1 1:1 1:2 1:3 1:4 1:5 1:6 1:7 1:8 1:9 1:10 mcao (g) 0.5 0.4 0.3 0.2 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 VEtOH (ml) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0
19
Hình 3.1. Sắc kí đồ khảo sát tỉ lệ cao:dung môi
(Tỉ lệ dung môi tăng dần như bảng 3.2 theo thứ tự từ trái sang phải) Để lựa chọn dung môi thích hợp, chúng tôi tiến hành chuẩn bị dịch chiết theo tỉ lệ 1:10 với 2 loại dung môi là EtOH và MeOH (1g cao hòa tan trong 10ml EtOH và 1g cao hòa tan trong 10ml MeOH) rồi tiến hành sắc ký lớp mỏng với với hệ
dung môi Toluen: EtOHtđ:: Acid aceticbăng (8:2:0.5) . Kết quả cho thấy dịch chiết
EtOH cho dịch, trong hơn, độ nhớt thấp hơn MeOH, sắc kí đồ rõ nét hơn. Vì vậy chúng tôi lựa chọn EtOH là dung môi hòa tan cắn để tiến hành sắc ký lớp mỏng điều chế emodin và physcion.
Tiến hành sắc ký lớp mỏng với dịch chiết ethanol tuyệt đối của cao toàn phần
20
Hình 3.2. Sắc kí đồ của cao toàn phần cốt khí củ (366nm)
Sau khi triển khai sắc kí, cạo vết, phản hấp phụ, cô loại dung môi thu được emodin và physcion, tiến hành quét phổ UV để kiểm tra.
Hình 3.3. Phổ hấp thụ UV của emodin phân lập từ cốt khí củ bằng sắc ký lớp mỏng
Hình 3.4. Phổ hấp thụ UV của physcion phân lập từ cốt khí củ bằng sắc ký lớp mỏng
21
Hình 3.5. Sơ đồ quy trình phân lập emodin và physcion từ cốt khí củ bằng sắc ký lớp mỏng
22