3. Tách chiết Colchicine từ cây bả chó (Colchicum autumnale) 1.Tổng quan
3.3.4.2. Tiến hành tách chiết:
Trong quá trình tách chiết, CO2 lỏng được đưa vào bồn và được tăng đến mức áp suất 244 atm (để đạt mức nồng độ mong muốn) và được trả về mức áp suất khí quyển bằng cách sử dụng van giảm áp suất để tiến hành lưu thông dịch chiết vào bình thu nhận sản phẩm. Modifier methanol 3% được đưa vào nhờ máy bơm HP 1050 series được tích hợp vào máy tách chiết trước khi hệ thống đẩy CO2 ở trạng thái siêu tới hạn vào trong bình đựng mẫu. Lượng alkaloid thu được sẽ được hòa tan trong dung dịch methanol 3%, trong khi đó CO2 khi được trả về áp suất khí quyển sẽ bốc hơi và đi vào ống dẫn và được làm lạnh và nén trở lại dạng lỏng và tái sử dụng, quay trở lại quy trình.
1000mg bột khô được đưa vào và lấp đầy dung tích cho phép chiết xuất trong bình đựng mẫu. Quá trình tách chiết được tiến hành với các thông số kỹ thuật như sau:
Mức áp suất đưa CO2 lên siêu tới hạn 244 atm Nhiệt độ đưa CO2 lên siêu tới hạn 35oC
Tốc độ dòng chảy 1.5 mL/phút
Modifier Methanol 3%
Mức áp suất đưa CO2 về trạng thái khí 1 atm
Thời gian trích tĩnh 25 phút
Thời gian trích động 30 phút
25 phút trích tĩnh sẽ được thực hiện trước, sau đó sẽ là 30 phút trích động. Van giảm áp suất để lưu thông dịch chiết sẽ được giữ lại trong 25 phút trong suốt quá trình trích tĩnh và được mở ra để tiến hành quá trình trích động. Quá trình chiết sẽ được lặp lại một lần, tổng cộng là hai lần tách chiết.
Các thông số kỹ thuật được sử dụng từ bài báo cáo của Ellington và các cộng sự (Ellington et al., 2003). Các thông số trên đã được chứng minh trong bài báo cáo. Chất lượng của sản phẩm sẽ được đánh giá lại bằng cách sử dụng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để định lượng Colchicine và các sản phẩm hợp chất phụ.