Sơ đồ quy trình đánh giá khả năng diệt khuẩn của màng nano ZnO được thể hiện trên (hình 2.2). Các mẫu kính (phủ và không phủ nano ZnO) đều được tiệt trùng ở 121 ℃ trong vòng 15 phút để loại bỏ hết vi sinh vật đã có sẵn trên bề mặt.
Chuẩn bị môi trường cho VSV: cân 0,6500 g Nutrient broth (Himedia, Ấn Độ) hòa tan vào trong 50 mL nước cất tiệt trùng dùng đũa thủy tinh khuấy đến khi tan hoàn toàn. Thêm 1,1000 g Agar (Duy Mai, Việt Nam) vào dung dịch và đem tiệt trùng ở nhiệt độ 121℃ trong vòng 15 phút.
Mẫu kính đã chuẩn bị được đặt vào đĩa petri. 20 μL huyền phù E.coli có nồng độ 104 CFU/mL (Phòng thí nghiệm Vi sinh Khoa Công nghệ Hóa học và Thực phẩm) được trải đều trên mặt mẫu kính (mỗi nhóm mẫu kính được lập lại 3 lần) và sấy ở
20
nhiệt độ 37 ℃ trong vòng 8 giờ. Sau đó, mẫu được đem ra và phủ một lớp môi trường dinh dưỡng cho VSV đã chuẩn bị từ trước rồi đem ủ ở nhiệt độ 37 ℃ trong vòng 24 giờ. Mẫu được đem đi quan sát bằng máy đếm khuẩn lạc (Selecta, Digital S, Tây Ban Nha).
Quy chuẩn ký hiệu mẫu được thể hiện theo bảng 2.1.
Bảng 2.1. Trình tự các điều kiện chuẩn bị mẫu.
STT Ký hiệu mẫu Điều kiện thí nghiệm Nhiệt độ
1 Mo Mẫu kính phủ CMC 37 ℃
2 Mo- Mẫu kính phủ CMC + vi khuẩn E. coli 37 ℃
3 Mo+ Mẫu kính phủ CMC + nước cất tiệt trùng 37 ℃
4 M1 Mẫu kính + nano ZnO nồng độ 0,5 mg/ml 37 ℃
5 M2 Mẫu kính + nano ZnO nồng độ 1 mg/ml 37 ℃
Mẫu thủy tinh
Mẫu được hấp tiệt trùng
Cấy VSV với nồng độ cho trước
Ủ ở 37 ℃ trong 8 giờ Đổ môi trường NB/ Agar lên mẫu
Ủ ở 37 ℃ trong 24 giờ Quan sát
21
6 M3 Mẫu kính + nano ZnO nồng độ 2,5 mg/ml 37 ℃
7 M4 Mẫu kính + nano ZnO nồng độ 5 mg/ml 37 ℃
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ NHẬN XÉT