ðể xỏc ủịnh vị trớ gõy hại của rệp xơ trắng trờn cõy mớa chỳng tụi tiến hành thu thập cỏc lỏ cú rệp và phõn theo tuổi lỏ: lỏ non, lỏ bỏnh tẻ, lỏ già. ðếm số lượng rệp ở cỏc pha trờn tổng số lỏ thu thập của từng tuổi lỏ.
3.3.1.6. Phương phỏp xỏc ủịnh ảnh hưởng của yếu tố thời tiết khớ hậu tới sự biến ủộng mật ủộ rệp xơ trắng. sự biến ủộng mật ủộ rệp xơ trắng.
Xỏc ủịnh ảnh hưởng của lượng mưa: Dựa vào dự bỏo khớ tượng ủểủịnh ngày ủiều trạ ðiều tra mật ủộ rệp xơ trắng (con/cõy) trước khi mưa và sau khi mưa một ngày, xỏc ủịnh lượng mưa ủể phõn tớch ảnh hưởng của mưa tới mật ủộ rệp xơ trắng hại mớạ
3.3.2. Phương phỏp nghiờn cứu trong phũng thớ nghiệm
3.3.2.1. Phương phỏp nuụi rệp xơ trắng (C. lanigera) trờn mớa trong phũng thớ nghiệm. thớ nghiệm.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 20
Chuyển vào mỗi hộp nuụi 10 rệp mẹ mới lấy từ ngoài ruộng mớa về, trong hộp cú sẵn lỏ mớa sạch ủược ủặt trờn giấy thấm nước ủể giữẩm, cho rệp ủẻ, quan sỏt sau khi rệp ủẻ, dựng bỳt lụng tỏc ủộng thật nhẹ nhàng vào cuối cơ thể rệp tuổi 1, chuyển rệp mới ủẻ vào riờng từng hộp (mỗi hộp 1 con) cú sẵn lỏ mớa ủặt trờn giấy thấm nước.
Thớ nghiệm ủược tiến hành với 30 con, ghi lại ngày rệp ủẻ ra và bắt ủầu tiến hành nuụi, ủỏnh số thứ tự hộp nuụi, hàng ngày tiến hành bổ sung nước 1 lần, bỏ xỏc rệp ủể xỏc ủịnh tuổi rệp, hoặc bắt rệp non mới ủẻủể xỏc ủịnh nhịp ủiệu sinh sản, khả năng sinh sản của rệp mẹ (ở giai ủoạn rệp bắt ủầu ủẻ) 2 ngày thay lỏ mớa một lần (nếu trời nắng núng thỡ thay lỏ một lần /ngày sử dụng lỏ bỏnh tẻ ủể nuụi rệp). Chỳng tụi sử dụng lỏ mớa giống Roc 22 làm nguồn thức ăn cho rệp .
Thu thập số liệu nuụi sinh học theo cỏc chỉ tiờu: - Thiết lập bảng nuụi theo phụ lục 1 từủú xỏc ủịnh. + Ngày rệp lột xỏc qua cỏc tuổị
+ Ngày rệp bắt ủầu ủẻ ra cỏc rệp non, ngày rệp chết sinhlý.
+ Số lượng non ủược rệp ủẻ ra từng ngày, tổng số rệp non ủược ủẻ ra của từng cỏ thể rệp mẹ.
+ Xỏc ủịnh vũng ủời và ủời của 30 cỏ thể nuụi rệp xơ trắng.
3.3.2.2. Phương phỏp xỏc ủịnh hiệu lực của thuốc BVTV trong phũng thớ nghiệm nghiệm
Thớ nghiệm ủược bố trớ với 4 loại thuốc và 1 ủối chứng với 5 cụng thức khỏc nhau mỗi cụng thức ủược nhắc lại 3 lần, cụng thức ủối chứng khụng phun thuốc.
Phương phỏp tiến hành:Ở mỗi cụng thức dựng 3 hộp nhựa, trong hộp cú lỏ mớa tươi ủặt 10 cỏ thể rệp tuổi 3-4, lỏ ủược ủặt trờn giấy thấm nước giữ ẩm. Dựng bỡnh phun cầm tay phun vừa ướt lỏ. Theo dừi lượng rệp sống ở mỗi
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 21
cụng thức ủể xỏc ủịnh hiệu lực của thuốc sau 1giờ, 6giờ, 12giờ, 18giờ, 24giờ, 48giờ xử lý và ghi chộp số liệu vào bảng số liệu gốc, tớnh hiệu lực thuốc theo cụng thức Abbott.
3.3.2.3. Khảo sỏt ảnh hưởng của thuốc BVTV ủến một số loài thiờn ủịch chớnh ở trong phũng thớ nghiệm. chớnh ở trong phũng thớ nghiệm.
- Chỳng tụi tiến hành thử nghiệm trờn 2 ủối tượng bắt mồi là bọ rựa 2 mảng ủỏ, bọ cỏnh mạch nõụ
- Nguồn thiờn ủịch thớ nghiệm ủược thu trực tiếp ngoài ruộng sản xuất. - Thớ nghiệm ủược tiến hành theo phương phỏp của Hassan (1985) [31]. (dẫn theo Lờ Thị Kim Oanh (2003)[9].
* ðối với bọ rựa 2 mảng ủỏ và bọ cỏnh mạch nõu (2 loài này cú mức ủộ phổ biến cao trờn ruộng mớa nghiờn cứu)
Nhỳng lỏ mớa vào dung dịch thuốc ủó pha theo nồng ủộ khuyến cỏo của từng loại trong 20 giõy (ủối chứng ủược nhỳng trong nước ló). ðể lỏ khụ tự nhiờn, sau ủú cắt lỏ ủặt vào ủĩa petri sao cho lỏ phủ kớn mặt ủỏy của ủĩạ Thả vào mỗi ủĩa 10 bọ rựa non và thớ nghiệm nhắc lại 3 lần. Theo dừi và xỏc ủịnh tỷ lệ chết sau 1h, 6 h, 12h, 24h, 48 h, và 72 h.
Mức ủộảnh hưởng của thuốc trừ sõu ủến thiờn ủịch ủược xỏc ủịnh bằng cụng thức Abbort. Cấp ủộc của cỏc loại thuốc ủối với thiờn ủịch ủược ủỏnh giỏ theo phõn cấp của tổ chức ủấu tranh sinh học Quốc tế (IOBC, 1985) [31].
Cấp 4 (thuốc ớt ủộc): Tỷ lệ giảm quần thể < 50% Cấp 3 (thuốc ủộc nhẹ): Tỷ lệ giảm quần thể≥50% - <80% Cấp 2 (Thuốc ủộc trung bỡnh): Tỷ lệ giảm quần thể 80-99% Cấp 1 (thuốc ủộc cao): Tỷ lệ giảm quần thể > 99% 3.3.2.4. Phương phỏp bảo quản mẫu * Bảo quản mẫu ướt: ðối với cụn trựng bắt mồi ăn thịt và một số loài sõu hại trờn mớa ủược ngõm trực tiếp vào cồn 70o cú ghi rừ ngày thỏng và ủịa ủiểm thu mẫụ
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 22
* Bảo quản mẫu khụ: Một số trưởng thành thuộc bộ cỏnh cứng, cỏnh nửa, cỏnh ủều, cỏnh vảy cho nhịn ủúi ủến chết hoặc cho vào lọ ủộc hay ộp mẫu cốủịnh, căng cỏnh bằng kim cắm, sấy khụ rồi cho vào hộp kớn ghi nhón và ủịa ủiểm thu mẫụ
- Mẫu sõu hại và thiờn ủịch ủược cỏc thầy cụ trong bộ mụn Cụn trựng - ðHNN Hà Nội ủịnh loạị
3.4. Cụng thức tớnh toỏn
* ðối với sõu hại và thiờn ủịch:
Tổng số sõu ủiều tra (con) Mật ủộ sõu (con/m2) =
Tổng diện tớch ủiều tra (m2) Tổng số sõu ủiều tra (con) Mật ủộ sõu (con /cõy, lỏ) =
Tổng số cây (lá) điều tra Tổng số lần bắt gặp cỏ thể loài Mức ủộ bắt gặp (%) = Tổng số lần điều tra x 100 Trong ủú: - > 50% số lần bắt gặp nhiều, ký hiệu +++ - >25 - 50% số lần bắt gặp trung bỡnh, ký hiệu ++ - >5 - 25% số lần bắt gặp trung bỡnh, ký hiệu + - Từ 0 - 5% số lần bắt gặp rất ớt, ký hiệu - * ðối với rệp xơ trắng: Tổng số cú cõy rệp Tỷ lệ cõy cú rệp (%) = Tổng số cõy ủiều tra x 100 Tổng số rệp ủếm ủược (con) Mật ủộ rệp (con/lỏ) = Tổng số lá điều tra
Tổng số rệp con ủược sinh ra Khả năng sinh sản (con/♀) =
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 23 * Thời gian phỏt dục (ngày) X = N Xini n i ∑ =1 X: Thời gian phỏt dục trung bỡnh
Xi: Thời gian phỏt dục của cỏ thể trong ngày thứ i ni: Số cỏ thể cú cựng thời gian phỏt dục với cỏ thể thứ i N: Tổng số cỏ thể theo dừi
* Xỏc ủịnh hiệu lực của thuốc trừ sõu trong phũng thớ nghệm ủược tớnh theo cụng thức Abbott. C - T E (%) = C x 100 Trong ủú: E (%): Hiệu lực của thuốc C: Số lượng rệp sống ở cụng thức ủối chứng T: Số lượng rệp sống ở cụng thức thớ nghiệm
* Hiệu lực của thuốc sõu ngoài ủồng ruộng ủược tớnh theo cụng thức của Henderson - Tilton. Hiệu lực (%) = ì ì − Tb Ca Cb Ta 1 x 100 Trong ủú:
Ta: Số rệp sống ở cụng thức thớ nghiệm sau khi phun Tb: Số rệp sống ở cụng thức thớ nghiệm trước khi phun Ca: Số rệp sống ở cụng thứcủối chứng sau khi phun Cb: Số rệp sống ở cụng thứủối chứng trước khi phun
•••• Xử lý số liệu thống kờ: cỏc chỉ tiờu ủược xử lý thống kờ theo chương trỡnh IRRSTAT.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ……… 24