Tối −u hoá thành phần phản ứng PCR đơn, PCR phức, tạo thang allele và khảo sát tần suất phân bố allele hai locus TH01 và

Một phần của tài liệu Nghiên cứu nhận dạng pháp y bằng phương pháp hình thái học và phân tích ADN một số locus STR ở người Việt (Trang 25 - 27)

thang allele và khảo sát tần suất phân bố allele hai locus TH01 và D16S539 ở ng−ời Việt (Kinh) sử dụng trong nhận dạng cá thể.

2.1. Đã tối −u hoá đ−ợc thành phần và điều kiện PCR đơn locus

Với nồng độ dNTP 0,2mM; buffer1X; MgCl2 1,5 mM; Taq DNA polymerase 1U; mồi 0,2μM; ADN khuôn từ 10 - 50 ng trong tổng thể tích 25 μl. Nhiệt độ gắn mồi của locus TH01 là 65,6oC trong 1 phút, nhiệt độ gắn mồi của locus D16S539 là 64 - 66oC trong 1 phút; số chu kỳ phản ứng 33 - 35 chu kỳ.

2.2. Đã tối −u hoá đ−ợc thành phần và điều kiện PCR phức hợp hai locus trong 1 phản ứng

Với nồng độ dNTP 0,3 mM; buffer 1,5 - 2X; MgCl2 3 - 4 mM; Taq DNA polymerase 1,5 - 2U; mồi D16S539 là 0,2μM và TH01 là 0,3 - 0,4 μM; ADN khuôn 25 - 50 ng trong tổng thể tích 25 μl. Nhiệt độ gắn mồi là 65 và 66oC.

2.3. Đã sản xuất đ−ợc thang chỉ thị allele 2 locus TH01 và D16S539 Thang chỉ thị allele TH01 gồm 7 allele, từ allele số 5 đến số 11. Thang chỉ thị allele D16S539 gồm 8 allele, từ allelel số 8 đến số 15. Đã

phát hiện đ−ợc các alen hiếm: allele 5 của locus TH01 và allele 15 của locus D16S539.

2.4. Đã khảo sát đ−ợc tần suất phân bố allele hai locus TH01, D16S539 ng−ời Việt

- Locus TH01 có tần suất phân bố từ allele số 5 đến số 11 lần l−ợt là 0,54%; 17,50%; 28,75%; 9,46%; 32,86%; 10,18% và 0,71%, trong đó allele số 9 có tần suất cao nhất (32,86%), allele số 5 có tần suất thấp nhất (0,54%).

- Locus D16S539 có tần suất phân bố từ allele số 8 đến số 15 lần l−ợt là 0,72%; 17,92%; 13,08%; 30,82%; 24,01%; 10,57%; 2,33% và 0,54%, trong đó allele số 11 có tần suất cao nhất (30,82%), allele số 15 có tần suất thấp nhất (0,54%).

Kiến nghị

- Cần nghiên cứu các đặc điểm hình thái và đặc điểm mô mềm đầu mặt của ng−ời Việt Nam phục vụ cho công tác nhận dạng.

- L−u trữ hồ sơ và các mẫu sinh phẩm của nhóm đối t−ợng lập thành tàng th− ADN.

- Nghiên cứu và khảo sát thêm locus ADN hình sự ở các nhóm ng−ời thuộc các dân tộc khác nhau trên lãnh thổ Việt Nam để xây dựng đ−ợc bảng phân bố tần suất allele phục vụ giám định nhận dạng cá thể.

Danh mục Các công trình đ∙ công bố của tác giả có liên quan đến luận án

1. Nguyễn Văn Lợi, Nguyễn Trọng Toàn, Nghiêm Xuân Dũng

(2003), “Tối −u hoá điều kiện PCR và khảo sát sơ bộ tần suất

allele locus TH01”, Những vấn đề nghiên cứu cơ bản trong khoa

học sự sống, Báo cáo khoa học Hội nghị toàn quốc lần thứ hai - Huế, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, tr. 952 - 955.

2. Nguyễn Văn Lợi, Nguyễn Trọng Toàn, Nghiêm Xuân Dũng

(2006), “Tối −u hoá điều kiện PCR phức hợp mồi của 2 locus

TH01 và D16S539”, Tạp chí y d−ợc học quân sự, (Đặc san), tr.

61 - 65.

3. Nguyễn Văn Lợi (2007), “Nghiên cứu chế tạo thang allele cho

locus di truyền TH01 bằng kỹ thuật PCR”, Tạp chí y học quân

sự, Cục quân y, (Chuyên đề), tr. 80 - 82.

4. Nguyễn Văn Lợi, Nguyễn Trần Chiến (2008), “Đề xuất quy

trình giám định nhận dạng pháp y từ một tr−ờng hợp giám định cụ thể”, Tạp chí y học quân sự, Cục quân y, (1), tr. 54 - 56.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu nhận dạng pháp y bằng phương pháp hình thái học và phân tích ADN một số locus STR ở người Việt (Trang 25 - 27)