Phân tích hàm lượng Atractylenolide III trên 3 mẫu dược liệu Việt Nam và Trung Quốc bằng phương pháp đã xây dựng. Kết qu ả được trình bày trong bảng 10 và so sánh sắc ký đồ hai mẫu bạch truật Việt Nam truật và Trung Quốc dưới hình 8.
Bảng 10: Kết quả xác định hàm lượng Atractylenolide III trong mẫu bạch truật Việt Nam và Trung Quốc.
Mẫu
Mẫu Việt Nam Mẫu Trung Quốc
B A
Hình 7: Sắc ký đồ phân tíchAtractylenolide III trong mẫu Bạch truật bằng HPLC- DAD trong đó A- Bạch truật Việt Nam, B- Bạ ch truật Trung Quốc.
Hình 8: Phổhấp thụUV củathành phần khác trongmẫu bạch truật Việt Nam.
Nhận xét: Dựa vào kết quả cho thấy trong bạch truật trồng tại Việt Nam và Trung Quốc có hàm lượng Atractynolide III lần lượt là 0,06 và 0,08%, tương ứng. So sánh phổ đồ, trong bạch truật Việt Nam xuất hiện một số pic khác (UV trong hình 8), điều này cho thấy, bạch truật Việt Nam cần một số nghiên cứu khác về thành phần hóa học. Điều này lý giải tại sao áp dụng điều kiện chạy dược điển Hồng Kông lại thất bại trên mẫu dược liệu Việt Nam.
CHƯƠNG 4 - BÀN LUẬN
Trong nghiên cứu này, phương pháp định lượng Atractylenolide III trong thân rễ cây bạch truật được xây dựng và thẩm định. Trong đó, điều kiện pha động HPLC-DAD là MeOH :H2O có tỷ lệ 43 :57. Độ chính xác của phương pháp đạt sau khi thẩm định theo hướng dẫn của ICH.
Kết quả áp dụng phương pháp vừa xây dựng cho thấy Atractynolide III trong mẫu trồng tại Việt Nam thấp hơn Trung Quốc. Do mẫu thu thập bị giới hạn số lượng, vẫn cần nghiên cứu với cỡ mẫu lớn hơn để khẳng định chắc chắn sự khác biệt. Tuy nhiên, giá trị thu được cao hơn nhiều lần yêu cầu của dược điển Hồng Kông yêu cầu là 0,019%. Chứng tỏ, bạch truật thu hái tại Việt Nam có đủ điều kiện thâm nhập thị trường dược liệu Hồng Kông, nơi cửa ngõ giao thương bên ngoài vào Trung Quốc cũng như đi nhiều nơi khác trên thế giới.
Bên cạnh đó, hai phổ đồ thu được thể hiện rõ sự khác biệt về peak phụ. Điều này cho thấy tiềm năng sinh học cũng như thành phần hóa học của cây trồng tại Việt Nam chưa được khám phá hết. Mặt khác, chính điều này gây khó khăn không thể áp dụng dược điển Hồng Kông trong phân tích mẫu Bạch truật tại Việt Nam. Phương pháp phân tích vừa xây dựng có thể áp dụng tốt cho đối tượng Dược liệu nguồn gốc từ Trung quốc.
Từ đó, chúng tôi đề nghị tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học cũng như tác dụng dược lý của bạch truật tại Việt Nam. Và các nghiên cứu sau tập trung tăng số lượng mẫu để đưa ra giới hạn hàm lượng Atractynolide III trong tiêu chuẩn cơ sở của bạch truật trồng tại Việt Nam.
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT
Điều kiện phân tích HPLC của Atractynolide III trên mẫu bạch truật như sau: - Hệ dung môi: ACN: nước (43: 57)
- Cột sắc ký pha đảo: Supleco C-18(5µm, 250 x 4,6mm) - Thể tích tiêm mẫu: 20 µl
- Bước sóng cực đại: 220 nm - Thời gian sắc ký: 30 phút
Bạch truật thu hái tại Việt Nam có hàm lương Atractynolide III là 0,06% trong khi Trung Quốc là 0,08%. Phổ đồ của Bạch Truật Việt Nam có quan sát thấy khác biệt với Trung Quốc về peak phụ.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt
[1]Bộ Y Tế (2009), Dược điển Việt Nam Bạch truật IV, Nhà xuất bản Y học, pp. 693 - 694.
[2]Bộ Khoa học và công nghệ (2007), Thực vật chí Việt Nam họCúc tập 7,
Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật, pp. 523 – 524.
[3] Trường Thụ Sinh (2012) , Trung Dươc Lâm Sàng, Nhà xuất bản Y học, pp. 314
– 316.
[4]Viện Dược Liệu (1993), Tài nguyên cây thuốc Việt Nam Bạch truật,
Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật liệu, pp. 360 – 382.
[5]Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực ph ẩ m (2010), Thẩm định phương pháptrong phân tích hoá học và vi sinh vật, NXB Khoa học và Kỹthuật, pp.10- 59.
Tiếng Anh
[6] Bilal Yilmaz, Emrah Alkan (2015), “Spectrofluorometric and Spectrofluorometric and UV Spectrofluorometric Methods for the Determination of Flurbiprofen in Pharmaceutical Preparations”, Journal of Pharmaceutical Analysis, 4(4).
[7]Bo Zhu (2018), “The traditional uses, phytochemistry, and pharmacology of Atractylodes macrocephala Koidz”,Journal of ethnopharmacology.
[8]Brian A. Bidlingmeyer (1992), Practical HPLC Methodology and
Applications, Wiley Series in Engineering and Technology Management, pp. 67 – 103.
[9]Danilo Corradini (2016), Handbook of HPLC second edition, Chromatographic science series, pp. 207 – 232.
[10] Chinese Pharmacopoeia Commission (2015), Pharmacopoeia of the peoples republic of China – English Edition(2015), Chemical Industry Press, pp. 524 –526.
[11] Elsevier Science (2017), “Application of Atractylodes
Macrocephala Koidz Extract in Methicillin - Resistant Staphylococcus Aureus”, Procediaengineering, 174, pp. 410 -415.
[12] George Lunn, Norman R. Schmuff (2000) - HPLC Methods forPharmaceutical Analysis, Wiley-Blackwell, pp. 232
– 250.
[13] Hao Kai (2012), “Study on chemical fingerprinting of crude and processed Atractylodes macrocephala from different locations in Zhejiang province by reversed-phase high-performance liquid chromatography
coupled with hierarchical cluster analysis”, Pharmacognosy magazine, 8(32).
[14] Hildebert Wagner, Chromatographic Fingerprint Analysis of HerbalMedicines: Thin-layer and High Performance Liquid
Chromatography of Chinese Drugs, Springer Science & Business Media, pp. 113 - 123.
[15] Hson-Mou Chang(1986), Pharmacology and Applications of Chinese Materia Medica, World Scientific, pp. 349 - 353.
[16] Kokane Vikrant (2014), “Formulation and evaluation of topical flurbiprofen gel using different gelling agents”, World Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences, 3(9), pp. 654 - 663.
[17] Jiaju Zhou (2003), Traditional Chinese Medicines: Molecular Structures,Natural Sources and Applications, Wiley, pp. 235 - 242 . [18] Joel K. Swadesh (2000), HPLC: Practical and Industrial Applications, SecondEdition CRC Press, pp. 25 - 35.
[19] Lena Ohannesian (2001), Handbook of Pharmaceutical Analysis, CRC Press, pp. 9 – 12.
[20] Monika Waksmundzka-Ha nos, Joseph Sherma (2010), High
[21] Murray, Kermit K., et al (2013), "Definitions of terms relating to mass spectrometry (IUPAC Recommendations 2013)", Pure and Applied Chemistry, 85(7), pp. 1515-1609.
[22] The Europaean Pharmacopieal Commission (2010),
Pharmacopoeia Europaea7th Edition vol 2, Maisonneuve, pp, 1047–1050. [23] The government of Hong Kong Special Administrative region (2002),
HongKong Chinese Materia Medica Standards, Chinese medicine division, pp. 265
– 273.
[24] Toshihiko T Hanai (2007), HPLC: A Practical Guide, Royal Society of Chemistry, pp. 11 – 29.
[25] United States Pharmacopoeial Convention (2010), United States Pharmacopoeia 35th Edition, United States Pharmacopeial Convention, pp.970 – 973.
[26] Xu, Shizao (2018), “UPLC-MS/MS of Atractylenolide I, Atractylenolide II, Atractylenolide III, and Atractyloside A in Rat Plasma after Oral Administration of Raw and Wheat Bran-Processed Atractylodis Rhizoma”, Morecules, 23(12), pp. 3234.
[27]Weici Tang, Gerhard Eisenbrand (2013), Chinese Drugs of Plant Origin: Chemistry, Pharmacology, and Use in Traditional and Modern Medicine, Springer Science & Business Media, pp.199–201