Vi khuẩn E. coli sau khi được tăng sinh trên môi trường NA, ta tiến hành kiểm tra đặc tính sinh hóa của vi khuẩn E. coli trên các môi trường KIA, Simmons Citrate, VP, MRVP và Peptone.
Môi trường KIA dùng để kiểm tra sựlên men đường glucoz, lactoz, sinh hơi và sinh H2S của vi khuẩn.
Nếu vi khuẩn chỉ lên men đường glucoz thì phần thạch nghiêng của môi trường có màu đỏ và phần thạch đứng có màu vàng. Nếu lactoz được sử dụng thì cả hai phần thạch đứng và thạch nghiêng đều vàng cả.
Sự sinh hơi được ghi nhận bởi bọt khí hay sự bể nát của cột thạch. Nếu vi khuẩn sản sinh H2S thì môi trường sẽ có màu đen.
Môi trường Simmons Citrate Agar dùng đểkiểm tra khả năng sử dụng citrate thay nguồn cacbon của vi khuẩn. Trên môi trường này, vi khuẩn cho kết quả dương tính khi màu của môi trường chuyển từ xanh lục sang xanh dương.
Môi trường VP dùng để kiểm tra tính di động và tính sinh aceton của vi khuẩn.
Vi khuẩn có khả năng di động sẽ làm đục môi trường cấy. Ngược lại, vi khuẩn không có khả năng di động thì chỉ thấy vi khuẩn mọc theo đường kim cấy, môi trường xung quanh trong.
Môi trường MR - VP dùng để kiểm tra tính sử dụng đường của vi khuẩn. Nhỏ lên bề mặt môi trường ít giọt thuốc thử Methyl Red, phản ứng dương tính sẽ có vòng đỏ xuất hiện trên bề mặt môi trường.
Môi trường Peptonedùng để kiểm tra tính sinh Indol của vi khuẩn. Trên môi trường này, sau khi nhỏ thuốc thử Kowac vào nếu trên bề mặt môi trường xuất hiện vòng đỏ thì phản ứng dương tính.
Bảng 1 Đặc tính sinh hóa của vi khuẩn E. coli
Vi khuẩn Lên men đường Sinh H2S Sinh hơi Citrate Di động Sinh aceton MRVP Sinh Indol E. coli Vàng/vàng - + - + - + +
Hình 4 Kết quả sinh hóa của vi khuẩn E. coli