Hình 15: C u t o vi th tuy n n c b t c t ngang (X100)
Hình 17: C u t o vi th tuy n mang tai c t ngang (X400)
Hình 18: C u t o vi th tuy n mang tai c t ngang (X400)
Quan sát t ngoài vào trong: là t ch c liên k t d y m ng không u, bao quanh các nang tuy n (nang n c) là các ng Bài xu t, ng m ch và t nh m ch.
M T S TIÊU B N KHÔNG T YÊU C U
Hình 19: D ch hoàn c t dày (X100)
Lý do trong quá trình c t ta i u ch nh c vi c p không thích h p, trong lúc nhu m ta ngâm Hematoxylin th i gian lâu, s l p t bào ch ng nhi u lên nhau nên b t màu m, khó phân bi t.
Hình 20: Bàng quang b rách và gâp n p (X100)
Lý do trong quá trình c t ta s d ng dao c t vi m u không bén (dao c s d ng c t m u nhi u l n).
Ch ng 5
T LU N VÀ NGH 5.1 K T LU N
B ng ph ng pháp tiêu b n c t lát và nhu m kép b ng Hematoxylin và Eosin Y, các m c tiêu c a tài “Th c hi n tiêu b n vi th ng v t trên th ” ã
c th c hi n ó là:
ã kh o sát ph ng pháp th c hi n tiêu b n hi n vi c nh mô ng v t trên th và tìm ra th t th i gian c nh m u thích h p cho t ng lo i t ch c.
Tiêu b n làm ra áp ng c các yêu c u quan sát c u trúc mô h c, có th ph c v t t cho nhu c u nghiên c u, h c t p và gi ng d y.
5.2 NGH
TÀI LI U THAM KH O
D ng Th Kim Lan. 2010. Th c hi n tiêu b n vi th ng tiêu hóa th . Lu n v n t t nghi p i h c C n Th .
ng Ng c Qu nh, 2007. Bài gi ng c th gia súc A, khoa Nông Nghi p và sinh h c ng d ng, tr ng i h c C n Th .
Lâm Th Thu H ng, 2005. Mô phôi gia súc. Nhà xu t b n i h c qu c giaThành ph H Chí Minh.
Lea & Febiger.1974. Atlas of human histology. The United Sates of America Lê Hoàng S , Phan Ng c Anh, 2000. T ch c h c ng v t, i H c C n Th . Nguy n Hoàng Ph ng, 1994. Ph ng pháp th c hi n tiêu b n mô ng v t. Lu n
n t t nghi p. i h c C n Th .
Nguy n Quang Mai, 2004. Sinh lý h c ng v t và ng i, Nhà xu t b n Khoa h c xã h i và k thu t Hà n i
Nguy n Xuân Ho t, Ph m c L , 1978. T ch c h c – Phôi thai h c. Nhà xu t b n ai h c và trung h c chuyên nghi p
PH CH NG
B ng 1: Tr ng i, nguyên nhân và cách kh c ph c khi úc m u
Tr ng i Nguyên nhân Kh c ph c
Block v có nhi u h t Paraffin x u, không tinh khi t
Thay và l c th t k paraffin
M u b t ra kh i block khi c t, trong block có khí
Thao tác úc khuôn ch m úc l i m u, thao tác nhanh n
M u khó c t hay v ra t ng m nh
Paraffin quá c ng Thay paraffin khác m m n
T ch c b co rúm l i Nhi t t m Paraffin cao n 65oC Lo i b m u ó Khó c t, t ch c b t c Paraffin ch a th m hoàn toàn vào t ch c, ch a lo i h t c n và Xylen T m l i paraffin lâu h n, ho c loiaj b m u ó n u có m u d tr
B ng 2: Tr ng i, nguyên nhân và kh c ph c khi c t m u
Tr ng i Nguyên nhân Kh c ph c Các m nh c t có dài không b ng nhau i u ch nh máy c t v i t c không thích h p ng ho c gi m t c quay máy c t. i u ch nh dày, m ng c a máy c t và nghiêng l i dao M nh c t b cu n l i không x p thành b ng M t trên, d i c a khuôn m u và l i dao không song song nhau
i u ch nh khuôn m u cho m t c t song song
i dao
M nh c t b rách, th ng Dao c t b l c, m , d Lau s ch l i dao ho c thay l i dao m i
M u b n t,v n nát M u còn n c, nhi t paraffin lúc t m quá cao, t c tay quay không phù
Chú ý n ng và th i gian ngâm c n và nhi t t s y lúc t m paraffin
h p M nh c t b v t r ng c a và dính vào dao Paraffin m m, nhi t phòng quá nóng C t dày h n, i u ch nh nhi t c a máy l nh xu ng M nh c t dính l i trên khuôn m u Dao d , nghiêng c a dao ch a
Thay dao m i, ki m tra nghiêng c a dao
B ng 3: Tr ng i, nguyên nhân và cách kh c ph c khi t i, h p và nhu m m u
Tr ng i Nguyên nhân Kh c ph c
M u b g p n p c trong ch u t i
không nóng
ng nhi t trong ch u t i
M u b rách Nhi t n c quá cao Gi m nhi t ch u t i b ng cách thêm n c l nh vào
B tu t m u trong lúc nhu m
M nh tay trong lúc nhu m Thao tác nhu m ph i ch m, nh nhàng
Công th c pha ch Formol trung tính 10%:
Formalin (37 – 40%) 100 ml
c c t 900 ml
Sodium phosphat monobasie 4 g
Sodium phosphat dibasie 6,5 g
Ph m nhu m Hematoxylin:
Hematoxylin không có c tính nhu m mà ph i tr i qua quá trình oxy hóa bi n thành Hematein m i nhu m c. S oxy hóa Hematoxylin gây nên do dung d ch nhu m t 6 - 8 tu n d i ánh sáng m t tr i ho c nó có th oxy hóa b ng tác nhân hóa h c nh Iodate Sodium, Formanganat…trong khâu nhu m, s d ng ch t oxy hóa mereuride oxide s oxy hóa Hematoxylin thành Hematein x y ra t c kh c. S oxy hóa liên t c c a Hematein s hình thành m t h p ch t không màu làm cho ph m nhu m không dùng c lâu. Chính vì v y mà m t s ng i cho
Hematoxylin là m t ph m nhu m gián ti p nên c n dùng thêm ch t g n màu là Alumum d i d ng Alum (phèn chua) m i có th n màu vào t ch c. Hematoxylin là m t ph m nhu m baze m nh. Do ó, nó s c nh trên acid nucleic là acid c a nhân t bào nên Hematoxylin dùng nhu m nhân và sau khi nhu m nhân s có màu tím xanh.
Pha ch Hematoxylin theo Harris:
Tinh th Hematoxylin 5g C n tuy t i 50 ml Phèn chua 100 g c c t 1000 ml Moreuride oxyde 2,5 g Ph ng pháp ti n hành:
Hòa tan Hematoxylin trong c n và phèn chua trong n c c t un sôi, mang ra kh i b p và tr n hai dung d ch này l i.
un sôi nhanh không quá m t phút luôn khu y u, t t l a r i cho Moreuride oxyde vào t t , khu y u, un nh l a cho n khi dung d ch có màu tím m.
Mang ra kh i b p cho vào n c l nh làm l nh nhanh, khi dung d ch ngu i l c tr c khi dùng.
u ý: Hematoxylin bi n ch t (có c n, nâu ) s k t t a màu nâu en bên ngoài t bào khi nhu m. ki m tra xem dung d ch Hematoxylin có b loãng và bi n ch t hay không b ng cách nh vài gi t Hematoxylin vào n c m, n u th y gi t ph m nhu m có màu m t lúc sau m i chuy n sang màu tím xanh là ph m nhu m ã loãng và bi n ch t ph i lo i b . N u khi nh gi t ph m nhu m vào có màu tím xanh ngay là còn s d ng c.
Ph m nhu m Eosin:
Eosin d tr : Eosin 1 g
c c t 20 ml
Hòa tan và thêm c n 95o 80 ml Eosin nhu m : Eosin d tr 1 ph n
Hòa tan vào nhau và cho thêm 0.5 ml acide acetic m c cho 100 ml dung d ch tr c khi dùng.