- Phép th ử khác gi ố ng đượ c ti ế n hành t ừ ph ầ n h ạ t s ạ ch nh ư quy đị nh ở ph ầ n phân tích độ sạch.
5. XÁC ĐỊNH SỨC SỐNG CỦA HẠT GIỐNG 1 Mục đích
5.1. Mục đích
Dựa vào các phương pháp xác định sức sống của hạt giống, từ đĩ đánh giá được chất lượng hạt giống.
5.2. Vật liệu và thiết bị
- Dung dịch Indigo - Carmin 0,1 %; Dung dịch axit Fucxin 0,1 %
- Bàn đếm hạt, đĩa petrie, khay men, panh, dao con, giấy lọc, cát đã khử trùng, nước - Các lọai hạt giống đã ngâm nước 24 giờ.
5.3. Nội dung
5.3.1. Một số khái niệm
Sức sống của hạt giống là khả năng sống của hạt giống khơng kể hạt đã qua giai
đoạn ngủ nghĩ hay chưa.
Sức sống của hạt giống được biểu thị bằng % số hạt sống so với tổng số hạt kiểm tra.
Hạt giống sau khi thu hoạch, cĩ loại cĩ khả năng nẩy mầm ngay tức là hạt khơng qua giai đoạn ngủ nghỉ; cĩ loại phải thơng qua cất giữ một thời gian mới cĩ khả năng nẩy mầm là hạt giống ngủ nghỉ. Tính ngủ nghỉ dài hay ngắn phụ thuộc vào giống, đặc điểm sinh lý của cây, điều kiện thời tiết trong thời gian chín và điều kiện bảo quản.
Khi đánh giá chất lượng hạt giống khơng nên chỉ giới hạn ở việc đánh giá độ nẩy mầm, sức nẩy mầm mà cịn cần phải đánh giá sức sống của hạt giống
Xác định sức sống của hạt giống đểđịnh thời gian cất giữ và gieo hạt cho đúng.
5.3.2. Phương pháp xác định sức sống của hạt giống
Phương pháp sấy khơ và sấy nĩng hạt giống:
- Xử lý hạt bằng cách sấy khơ và sấy nĩng hạt trước khi gieo là làm tăng khả năng thấm nước và thấm khí của vỏ hạt, tức là làm tăng khả năng trao đổi chất và làm cho hạt qua giai đoạn ngủ nghỉ nhanh hơn. Do khi sấy khơ làm cho giữa các tế bào cĩ khe hở và màng vỏ hạt tách rời lớp a - lơ - ron làm tăng tính thấm nước và hút khơng khí, hạt qua giai đoạn ngủ và cĩ thể nẩy mầm được.
- Phương pháp xử lý:
Lấy hạt giống định thử, trải thành lớp dày 2 cm trên khay men. Cho vào tủ định ơn sấy khơ hoặc sấy nĩng hạt ở nhiệt độ 30 oC trong 3 - 5 ngày.
Sau đĩ tiến hành gieo hạt để xác định sức sống của hạt theo phương pháp xác định độ nẩy mầm.
Sức sống của hạt giống được tính bằng tỷ lệ % số hạt mọc mầm so với tổng số hạt đem gieo mà khơng kểđến trạng thái mầm của nĩ như thế nào.
Một số quy định của phương pháp sấy khơ và sấy nĩng hạt giống
Loại hạt giống Nhiệt độ xử lý oC Thời gian xử lý (ngày)
Lúa, ngơ 30 3 - 5 Bơng 40 1 Đậu tương 30 10 - 12 giờ Các loại rau 30 3-5 Thuốc lá 30 - 35 7 - 10 Cao lương 30 2
214
Phương pháp sinh hĩa (nhuộm phơi bằng Indigo - carmin hoặc axit Fucxin)
- Cơ sở của phương pháp: Nguyên sinh chất của tế bào sống ở phơi khơng hút màu
anilin của Indigo - carmin hoặc axit Fucxin; cịn nguyên sinh chất của tế bào chết ở phơi thì hút màu anilil của các chất trên và nhuộm màu vì nĩ mất khả năng chọn lọc màu anilil của Indigo - carmin hoặc axit Fucxin. Phương pháp này cĩ thể dùng để xác định sức sống của hạt lúa, hạt ngơ, các loại đậu đõ, lúa mì, ....
- Cách định độ hịa tan của Indigo - carmin:
+ Cân 1 gam Indigo - carmin, hịa tan vào 999 cc nước cất, dùng tay lắc đều và đun sơi 30 phút; sau đĩ để nguội và lọc.
Dùng giấy lọc sạch đã được sấy khơ ở nhiệt độ 100 - 105oC; để nguội và cân khối lượng giấy lọc trước khi lọc.
Sau khi lọc xong, sấy khơ giấy lọc ở nhiệt độ trên và cân khi khối lượng giấy lọc khơng thay đổi.
Hiệu số giữa khối lượng giấy sau khi lọc và trước khi lọc chính là khối lượng Indigo - carmin khơng hịa tan. Từđĩ tính được lượng Indigo - carmin nguyên chất cĩ thể hịa tan được trong nước đểđược dung dịch cĩ nồng độ 0,1 %.
+ Cân 1 gam axit Fucxin, hịa tan trong 1000 cc nước cất, sau đĩ đun sơi, để nguội thì được dung dịch cĩ nồng độ 0,1 %.
- Phương pháp tiến hành:
+ Đếm 100 hạt giống cho mỗi lần nhắc lại định kiểm tra (số lần nhắc từ 2-3 lần); hạt giống sau khi đếm tiến hành ngâm nước 24 giờ. Sau đĩ lấy hạt giống ra, đặt trên giấy lọc hoặc trên đĩa petrie.
+ Dùng dao sắc cắt đơi hạt (cắt qua phơi theo chiều dọc ra 2 phần bằng nhau). Mỗi hạt giữ lại 1/2 đem cho vào nước rửa 2 - 3 lần cho sạch. Sau đĩ vớt chúng ra để cho ráo nước rồi cho vào ngâm trong dung dịch Indigo - carmin 0,1 % hoặc axit Fucxin 0,1 % trong thời gian 10 - 15 phút (chú ý: cho dung dịch phủ hạt khoảng 0,5 cm).
+ Các lần nhắc lại cũng tiền hành làm như trên. Mỗi lần cách nhau 10 - 15 phút. + Trong thời gian ngâm, thỉnh thoảng lắc nhẹđể dung dịch ngấm vào mẫu.
+ Sau thời gian quy định, lấy hạt ra rửa cho sạch đến khi nước rửa khơng cịn màu của dung dịch mới thơi.
+ Đặt hạt trên giấy lọc và xác định sức sống của hạt giống.
Kết quả những hạt nào phơi khơng nhuộm màu và đầu rễ phơi nhuộm màu nhạt là những hạt sống. Những hạt nào phơi hồn tồn nhuộm màu là hạt chết.
Số hạt cĩ phơi khơng nhuộm màu Sức sống của hạt giống % = --- x 100 Tổng số hạt được thử nghiệm Một số quy định đối với phương pháp xác định sức sống của hạt giống bằng cách nhuộm màu Điều kiện khi ngâm Tên hạt
giống Nhiệt độ (oC) Thời gian (giờ)
Thời gian nhuộm màu (phút)
Hạt ngơ 20 24 10 - 15
Hạt lúa 20 24 10 - 15
Đậu cơ bơ, đậu Hà Lan 20 15 120 - 180
215 Vừng 20 15 - 20 60 Cao lương 20 18 - 20 10 - 15 Bắp cải, củ cải 20 1 - 3 30 Dưa hấu 25 - 30 20 - 14 60 Dưa chuột, dưa bở 30 5 - 7 60
Ngồi ra, người ta cịn xác định sức sống của hạt giống bằng:
- Dung dịch Letrazol: hạt nào cĩ phơi nhuộm màu đỏ là hạt cĩ sức sống. - Gieo hạt ở nhiệt độ thấp hoặc thay đổi nhiệt độđột ngột.
- Dùng các tia huỳnh quang chiếu qua hạt giống, nếu chúng cịn sống nĩ sẽ ánh lên.
5.4. Phần thực hành:
- Đếm mỗi lần nhắc lại 100 hạt; nhắc lại 3 lần.
- Xác định sức sống cuả hạt giống bằng các phương pháp mà phịng thí nghiệm cĩ. - Tính tốn kết quả. Tường trình, báo cáo kết quả.