Bạng 2: Kêt quạ khử trùng mău baỉng phương pháp đôt, sau 1 tuaăn.
Mău hát lan được gieo vào mođi trường, sau 1 tuaăn khử trùng, mău baĩt đaău có những bieơu hieơn khác nhau:
- Đôi với những mău sông và khođng nhieêm, sau 1 tuaăn, hát daăn daăn thích nghi với mođi trường, baĩt đaău chuyeơn sang màu nađu vàng maơt ong.
- Còn với những mău hát bị ạnh hưởng bởi Ca(OCl)2, và nhieơt đoơ cao, hát chuyeơn sang màu traĩng và nađu đúc, khođng phát trieơn. Kêt quạ ghi nhaơn được ở bạng 1 cho thây:
- Noăng đoơ Ca(OCl)2 7%, thời gian khử trùng là 15 phút tỷ leơ hát sông và khođng nhieêm là 75%, mău khođng bị chêt nhưng tỷ leơ
Sông và khođng nhieêm Chêt và khođng nhieêm Nhieêm N T Noăng đoơ Ca(OCl)2 (%) Thời gian
(phút) Sô lượng Tỷ leơ (%)
Sô lượng Tỷ leơ (%)
Sô lượng Tỷ leơ (%)
1 7 15 12 75 0 0 4 25 2 7 20 15 93,75 1 6,25 0 0 2 7 20 15 93,75 1 6,25 0 0
3 9 15 16 100 0 0 0 0
Khóa luaơn tôt nghieơp – 2005 Kêt quạ – Thạo luaơn
nhieêm cao (25%). Còn với thời gian khử trùng 20 phút, tỷ leơ hát sông khá cao (93,75%), mău hoàn toàn khođng bị nhieêm, nhưng bị chêt (6,25%).
- Khi khử trùng ở noăng đoơ taíng thì tỷ leơ mău bị chêt taíng theo và sô mău nhieêm giạm daăn. Ơû noăng đoơ 9%, thời gian khử trùng là 15 phút, tỷ leơ hát sông rât cao (100%), mău hát gieo hoàn toàn khođng bị nhieêm, khođng chêt. Khi kéo dài thời gian khử trùng 20 phút, thì tỷ leơ mău chêt taíng cao (37,5%).
Khi ngađm quạ lan trong dung dịch Ca(OCl)2, phaăn vỏ beđn ngoài tiêp xúc trực tiêp với dung dịch khử trùng, còn phaăn hát beđn trong khođng bị ạnh hưởng. Khi gieo hát vào mođi trường, hát có khạ naíng phúc hoăi nhanh và naơy maăm. Tuy nhieđn, nêu taíng noăng đoơ và kéo dài thời gian khử trùng, dung dịch sẽ ngâm vào beđn trong vỏ quạ, neđn sau khi gieo vào mođi trường, hát phúc hoăi rât chaơm và có theơ sẽ bị chêt (hóa traĩng).
Như vaơy, với các noăng đoơ Ca(OCl)2 đã được sử dúng trong lốt thí nghieơm, thì noăng đoơ 9% trong thời gian 15 phút là thích hợp nhât. Kêt quạ ghi nhaơn được ở bạng 2 cho thây:
- Khử trùng quạ lan baỉng phương pháp đôt coăn thì mău hát gieo hoàn toàn khođng bị nhieêm. Nhưng nêu tiên hành đôt 2 laăn thì tỷ leơ mău chêt cao (37,5%), tương đương với phương pháp khử trùng baỉng Ca(OCl)2 9%, trong thời gian 20 phút.
- Khi đôt moơt laăn tỷ leơ mău sông là 100%, tương ứng với khi khử trùng baỉng Ca(OCl)2 9% trong thời gian 15phút.
Khi nhúng quạ lan vào coăn 900 và đôt, thì phaăn vỏ quạ beđn ngoài sẽ bị ạnh hưởng trực tiêp cụa nhieơt đoơ cao, đoăng thời sẽ lối bỏ hoàn toàn các tác nhađn gađy nhieêm beđn ngoài vỏ. Nhưng nêu tiên hành đôt 2 laăn, nhieơt đoơ cao cùng với thời gian kéo dài sẽ gađy ạnh hưởng đên hát beđn trong, neđn khi gieo vào mođi trường, mău hát phúc hoăi rât chaơm, hoaịc có theơ hóa nađu, khođng nạy maăm được.
Như vaơy, khi khử trùng quạ lan baỉng Ca(OCl)2 9% trong thời gian 15 phút và đôt coăn moơt laăn, tỷ leơ sông, khođng nhieêm là như nhau. Tuy nhieđn, dùng phương pháp đôt coăn thì hát gieo phúc hoăi và naơy maăm nhanh hơn. Ngoài ra, phương pháp này còn tiêt kieơm nhieău thời gian khử trùng mău, thao tác đơn giạn hơn, kinh tê hơn.
Tóm lái: mău khử trùng là quạ lan Dendrobium còn xanh. Vì mău hát gieo naỉm beđn trong, neđn nêu tiên hành rửa mău kỹ và đôt baỉng coăn 1 laăn thì có theơ lối bỏ hoàn toàn các tác nhađn gađy nhieêm. Hát khođng bị ạnh hưởng và khi gieo vào mođi trường sẽ phúc hoăi rât nhanh.
Khóa luaơn tôt nghieơp – 2005 Kêt quạ – Thạo luaơn II. Thí nghieơm 2:
Các quạ lan sau khi được khử trùng sẽ được gieo vào 4 lối mođi trường khác nhau, được theo dõi sau 4 tuaăn nuođi cây:
Mođi trường Ký hieơu Noăng đoơ BA (ppm) Sô mău hóa nađu (1 tuaăn) % Sô mău nạy maăm (2 tuaăn) % Sô mău hóa xanh (4 tuaăn) % M0 0 100 83,33 93,33 MS M1 1 100 90 100 K0 0 100 50 63,33 KC K1 1 100 43,33 80
Bạng 3: Sự nạy maăm cụa hát lan tređn mođi trường Knudson’C và MS boơ sung 1 ppm BA.
- Moơt tuaăn sau khi gieo vào mođi trường, tât cạ mău hát lan đeău hóa nađu vàng.
- Sau 2 tuaăn, mău baĩt đaău có hieơn tượng naơy maăm và có sự khác bieơt rõ reơt giữa các lối mođi trường khác nhau.
- Sau 4 tuaăn, những hát có màu hơi vàng, daăn chuyeơn sang xanh do có sự tiêp xúc với ánh sáng, táo được dieơp lúc tô.
Dựa vào bạng kêt quạ, chúng tođi nhaơn thây:
- Hát gieo trong mođi trường MS có tỷ leơ naơy maăm rât cao (80- 90%), haău như tât cạ các mău hát đeău có hieơn tượng phình leđn và chuyeơn sang vàng. Trong khi đó, mău hát gieo trong mođi trường Knudson’C, tỷ leơ naơy maăm rât thâp (40-50%). Trong thời đieơm này haău như khođng có sự khác bieơt giữa lối mođi trường có và khođng có kích thích tô. Có theơ trong thời đieơm này, kích thích tô khođng có ạnh hưởng gì mây đôi với khạ naíng naơy maăm cụa hát.
- Sau 4 tuaăn, hát lan hóa xanh. Trong mođi trường MS có boơ sung BA 1ppm, tât cạ mău hát đeău hóa xanh. nêu khođng có kích thích tô tỷ leơ này là 93,33%. Trong mođi trường KC, tỷ leơ mău hóa xanh thâp hơn, ở đađy có sự khác bieơt rõ reơt giữa mođi trường có và khođng có kích thích tô. Mođi trường KC có BA tỷ leơ naơy maăm cao hơn (80%) so với khođng có BA (63,33%). Trong giai đốn này, vai trò cụa kích thích tô đã có bieơu hieơn rõ reơt. Các mău hát
gieo trong mođi trường có kích thích tô, có màu xanh đaơm hơn, hát phình to hơn
Từ các kêt quạ ghi nhaơn được cho thây, ở cùng noăng đoơ kích thích tô, nhưng tređn mođi trường MS có noăng đoơ khoáng cao hơn, thì hát lan naơy
maăm nhanh hơn so với mođi trường Knudson’C.
Vaơy, mođi trường MS có 1 ppm BA cho sự naơy maăm cụa hát lan Dendrobium tôt hơn so với mođi trường Knudson’C.
Khóa luaơn tôt nghieơp – 2005 Kêt quạ – Thạo luaơn III. Thí nghieơm 3:
Các mău hát lan sau khi đã hóa xanh, được cây chuyeăn qua các mođi trường khác nhau đeơ táo protocorm, được theo dõi sau 4 tuaăn nuođi cây:
Tình tráng táo protocorm Mođi trường Ký hieơu Noăng đoơ BA
(ppm) Sau 2 tuaăn Sau 4 tuaăn
M0 0 0 + MS M2 2 + + K0 0 + ++ KC K2 2 ++ +++
Bạng 4: Kêt quạ táo protocorm tređn mođi trường Knudson’C và MS boơ sung 2 ppm BA.
Với
0 : khođng có sự táo protocorm. + : táo thành protocorm rât ít. ++ : táo thành protocorm nhieău. +++ : táo thành protocorm rât nhieău.
- Tuaăn đaău tieđn tređn cạ 4 mođi trường đeău khođng táo protocorm. - Sau 2 tuaăn, hát gieo baĩt đaău biên đoơi táo thành moơt đám tê bào
có màu xanh.
- Sô lượng protocorm ngày càng taíng nhanh sau 3-4 tuaăn, phình to leđn, và có lá maăm.
Dựa vào bạng kêt quạ chúng tođi nhaơn thây:
- Hai tuaăn sau khi cây, mođi trường MS, hát lan khođng có sự biên đoơi rõ reơt, táo thành rât ít protocorm. Sau bôn tuaăn, sô lượng protocorm táo thành nhieău, đường kính nhỏ, màu xanh hơi traĩng, lá maăm dài khoạng 3-4 mm và rât ít .
- Trong khi đó ở mođi trường Knudson’C, sau hai tuaăn tât cạ các hát lan đeău biên đoơi rõ reơt, đường kính protocorm khoạng 2mm, tređn protocorm có lođng hút. Sau 4 tuaăn, sô lượng protocorm trong mođi trường Knudson’C phát trieơn nhanh, màu xanh, lá maăm dài khoạng 5-7 mm.
- Trong mođi trường Knudson’C có chứa BA, maịc dù soẫ lượng protocorm táo ra tương đương với mođi trường khođng chứa BA. Nhưng protocorm phát trieơn tương đôi nhanh hơn, sự taíng trưởng cụa protocorm đoăng đeău với nhau, có nhieău lá maăm khỏe, màu xanh tươi. Trong mođi trường có chứa kích thích tô BA, là moơt cytokinin có khạ naíng kích thích và đieău chưnh sự phađn bào, taíng sự chuyeơn hóa chât dinh dưỡng [10].
Tóm lái:
- Từ những kêt quạ ghi nhaơn được veă thời gian và sô lượng protocorm táo thành ta có theơ kêt luaơn raỉng: sự táo protocorm trong mođi trường Knudson’C có boơ sung kích thích tô BA là tôt nhât.
- Do sự táo thành protocorm trong mođi trường Knudson’C tôt hơn, neđn tât cạ các thí nghieơm veă sau, chúng tođi chư thực hieơn tređn mođi trường Knudson’C.
IV. Thí nghieơm 4:
Các protocorm được táo thành từ hát có chât lượng như nhau được đưa vào các thí nghieơm nhađn protocorm, sau 4 tuaăn theo dõi kêt quạ ghi nhaơn được như sau:
Kích thích tô Noăng đoơ (ppm) Ký hieơu Sô lượng choăi mới Chieău cao choăi (cm) Chieău dài lá (cm) Ghi chú 0 0 K0 0 0 0 Protocorm nhỏ, ít.
1 K1 1-2 1,5-2 0,5-0,7 Protocorm mới xanh,
nhưng ít.
2 K2 4-6 1,5-2,5 0,5-0,7 Protocorm nhieău, to,
xanh, có lođng hút. BA
3 K3 1-2 1,3-1,5 0,5-0,7 Protocorm nhieău
nhưng nhỏ.
0,1 K4 4-6 2-3,5 1,5-2 Protocorm xanh, to,
có lođng hút, nhưng ít 0,5 K5 5-7 3-4 2-3 Protocorm xanh, nhưng ít 2ppm BA + IBA 1 K6 4-5 2-3 1,5-2,5 Protocorm nhỏ, hơi vàng, ít Bạng 5: Kêt quạ nhađn protocorm tređn mođi trường Knudson’C với kích thích tô
khác nhau.
- Sau 2 tuaăn, baĩt đaău xuât hieơn protocorm mới, có lođng hút. Sô lượng và kích thước thay đoơi tuỳ theo mođi trường.
- Sau 3 tuaăn, có moơt sô protocorm baơt choăi mới.
- Sau 4 tuaăn các choăi mới phát trieơn mánh, tuỳ theo mođi trường mà sô lượng và chieău cao choăi mới khác nhau.
Dựa vào bạng kêt quạ chúng tođi nhaơn thây:
- Sau 2 tuaăn, mođi trường K1, khođng thây sự xuât hieơn cụa protocorm mới. Sang đên tuaăn thứ 3, mới xuât hieơn protocorm mới. Sô lượng protocorm mới táo thành rât ít, có màu xanh. Moơt sô protocorm baơt choăi vào giữa tuaăn thứ 4, nhưng sô lượng này rât ít, chư khoạng 1-2 choăi.
- Ơû mođi trường K2, sự nhađn protocorm dieên ra nhanh và mánh. Sau 2 tuaăn, đã xuât hieơn nhieău protocorm mới. Sau 4 tuaăn, sô lượng protocorm mới táo thành rât nhieău, các protocorm này xanh mướt, to, xung quanh có nhieău lođng tơ traĩng mịn. Vào giữa
Khóa luaơn tôt nghieơp – 2005 Kêt quạ – Thạo luaơn
tuaăn thứ 3, có moơt sô protocorm mới baơt choăi, tuy sô lượng choăi nhieău, nhưng chieău cao choăi rât thâp.
- Sô lượng protocorm mới táo thành nhieău ở mođi trường K3, sau 2 tuaăn, đã xuât hieơn những protocorm mới. Sang đên tuaăn 4, sô lượng protocorm đã rât nhieău, tuy nhieđn các protocorm này nhỏ, có moơt sô protocorm có màu traĩng. Haău hêt các protocorm mới đeău khođng baơt choăi.
¾ Trong các mođi trường K1, K2, K3, dưới tác dúng cụa kích thích tô BA, các mău cây đeău táo thành protocorm mới. Các protocorm táo thành càng nhieău khi noăng đoơ kích thích tô taíng leđn, nhưng chât lượng protocorm thì ngược lái (protocorm nhỏ và traĩng). Như vaơy, với noăng đoơ kích thích tô thích hợp sẽ tác đoơng tôt đên sự phađn chia tê bào, nhưng khi noăng đoơ khá cao, thì cũng có theơ gađy đoơc.
- Sau 2 tuaăn, trong các mođi trường K4, K5, K6, đã thây xuât hieơn protocorm mới. Tuy nhieđn, sau 4 tuaăn, sô lượng protocorm này haău như khođng đoơi. Trong mođi trường K5 và K6, các protocorm có màu xanh mướt, to, có lođng hút. Sô lượng protocorm trong mođi trường K6, ít hơn, protocorm có màu xanh hơi vàng, nhỏ. - Sang đên tuaăn thứ 3, các protocorm baơt choăi, sang đên tuaăn thứ
4 các protocorm phát trieơn mánh, giai đốn này haău hêt các mău hán chê táo protocorm mà chư chụ yêu táo choăi. So sánh giữa cacù mođi trường, thì mođi trường K5 táo theđm nhieău choăi mới hơn, các choăi mới có màu xanh mướt, và khi baơt choăi thì choăi xanh tôt và đoăng lốt hơn hai mođi trường còn lái, có moơt sô choăi có reê nhỏ, màu traĩng, dài từ 0,1-0,3 cm.
¾ Có sự khác bieơt rõ reơt veă sô lượng choăi mới, chieău cao choăi và chieău dài lá giữa các mođi trường chư có kích thích tô BA, và các mođi trường có BA và IAA. Ơû các mođi trường chư có BA, sang đên tuaăn thứ 4, các protocorm mới baơt choăi, nhưng sô lượng rât ít, choăi phát trieơn chaơm, và thâp. Các mođi trường này chư chụ yêu táo theđm protocorm mới, ít táo choăi. Trong khi đó, các mođi trường có BA và IAA, các mău cây chụ yêu táo choăi, hán chê vieơc táo thành protocorm. Như vaơy, chúng tođi nhaơn thây, sự kêt hợp giữa BA và IAA thì có lợi hơn cho vieđc táo choăi mới, phát trieơn cađy con đeơ sử dúng cho các thí nghieơm veă sau.
Tóm lái:
- Đôi với thí nghieơm nhađn protocorm, thì sử dúng mođi trường K2
và K5 đeău tôt, nhưng nêu sử dúng mođi trường K5, thì sẽ táo thành nhieău choăi mới hơn, có chieău cao, và thích hợp cho thí nghieơm ra reê sau đó.
- Nêu sử dúng mođi trường K5 cho quá trình nhađn giông thì heơ sô nhađn là:
Cúm choăi ban đaău được tách làm 3, cây chuyeăn sang mođi trường K5. Sau 4 tuaăn, từ moơt cúm choăi, thu được 4 choăi cao 3-4 cm. Như vaơy veă maịt lý thuyêt, ta tính được heơ sô nhađn choăi là 3x412 choăi/naím.
Sau 6 tuaăn, các cađy con có chieău cao 3-4 cm và có 2-3 lá được tách ra đeơ đưa vào thí nghieơm táo reê. Các choăi thâp cũng được tách ra, tiêp túc đưa vào mođi trường K5, đeơ phát trieơn chieău cao. Các protocorm còn lái cũng đựơc tách ra và đưa vào mođi trường K2.
V. Thí nghieơm 5:
Những cađy con trong thí nghieơm 4 có chieău cao từ 3-4 cm, có từ 2-3 lá được cây vào mođi trường ra reê, sau 4 tuaăn theo dõi kêt quạ ghi nhaơn được như sau:
Kích thích tô
Noăng đoơ (ppm)
Ký hieơu Sô lượng reê Chieău dài reê (cm) Tỷ leơ cađy ra reê(%) Ghi chú 0 K0 1-3 0,3-0,7 63,9 Phát trieơn chieău cao. 0,1 KN1 2-4 0,7-2 83,33 Cađy thâp, phát
trieơn khođng đeău.
0,5 KN2 4-6 2-4 94,44 Lá dài, xanh, phát
trieơn tôt và đoăng đeău.
NAA
1 KN3 3-4 1-5 90,22 Thađn ôm, lá và reê
dài.
0,1 KI1 1-3 0,5-1,2 62,5 Ít reê, lá ít và
ngaĩn.
0,5 KI2 2-3 1-4,5 69,44 Phát trieơn tôt,
nhưng khođng đeău, thađn thâp, reê dài. IAA
1 KI3 1-3 1,5-3,5 66,67 Cađy thâp, reê ít, lá
dài.
0,1 KB1 2-4 2-3 77,78 Ít lá, phát trieơn
khođng đeău.
0,5 KB2 1-3 1-2,5 91,67 Lá màu xanh phát
trieơn tôt, đoăng đeău.
IBA
1 KB3 1-3 1-5 72,22 Nhieău lá, thađn
ngaĩn, reê dài. Bạng 6: Kêt quạ thí nghieơm táo reê tređn mođi trường Knudson’C, boơ sung NAA,
IAA, IBA với các noăng đoơ khác nhau (sau 4 tuaăn).
- Hai tuaăn sau khi cây vào mođi trường ra reê, cađy baĩt đaău taíng chieău cao và reê xuât hieơn.
- Sau 4 tuaăn, reê phát trieơn mánh, nhưng tùy theo từng lối mođi trường mà reê, lá và phát trieơn khác nhau.
Khóa luaơn tôt nghieơp – 2005 Kêt quạ – Thạo luaơn
Dựa vào bạng kêt quạ chúng tođi nhaơn thây:
- Trong mođi trường đôi chứng K0 , sau 4 tuaăn, choăi ra reê chaơm, chư có 1-3 reê và chieău dài từ 0,3-0,7 cm.
Trong mođi trường có boơ sung kích thích tô, kích thước cađy và reê có sự biên đoơi rõ reơt tùy theo tùy lối kích thích tô và noăng đoơ.
- Trong mođi trường boơ sung kích thích tô IAA, haău như khođng có