Các mẫu quả sa nhân được thu hái vào tháng 7/2002, kí hiệu: M l, M2, M3, M4, M5, phơi khơ, bảo quản kỹ. Tách riêng phần vỏ quả và khối hạt, nghiền thơ khối hạt bằng thuyền tán, cất tinh dầu khối hạt.
* Cách tiến hành:
- Cân chính xác khoảng 20-30 g bột thơ hạt sa nhân cho vào bình cầu dung tích 500 ml, thêm 200 ml nước. Tiến hành cất kéo hơi nước, thời gian cất 4h/ mẫu cất.
- Song song tiến hành đo độ ẩm dược liệu.
- Kết quả định lượng tính hàm lượng tinh dầu của mẫu theo tỷ lệ % thể tích trên khối lượng dược liệu khơ tuyệt đối theo cơng thức:
F .1 0 4 ^ o /0 = ---
* . ( 1 0 0 - ố) Trong đĩ: x% : Hàm lượng tinh dầu.
V: Thể tích tinh dầu cất được (ml), a: Khối lượng dược liệu đem cất (g). b: Độ ẩm của dược liệu (%).
Kết quả xác định hàm lượng tinh dầu các mẫu quả sa nhân được trình bày trong bảng sau:
Bảng 4: Kết quả xác định hàm lượng tinh dầu (HLTD) các mẫu quả sa nhân.
Mẫu Khối lượng dược liệu (a g) Độ ẩm dược liệu ( b %) Thể tích tinh dầu (V ml) HLTD ( X % ) MI 30,62 12,39 1,12 4,18 M2 28,88 11,39 0,96 3,75 M3 18,52 12,22 0,66 4,06 M4 14,59 11,77 0,40 3,11 M5 30,28 12,61 0,84 3,17
♦ Nhận xét: Các số liệu trong bảng trên cho thấy hàm lượng tinh dầu hạt các mẫu quả sa nhân khá cao ( 3,11%- 4,18%), khẳng định đây là các mẫu
sa nhân cần quan tâm.
3.2.3. Phân tích thành phần hố học tinh dầu hạt các mẫu quả sa nhân:
Chúng tơi đã sử dụng phương pháp GC - MS phân tích thành phần hố học tinh dầu hạt các mẫu quả sa nhân. Kết quả thực nghiệm được trình bày trong bảng sau.
Bảng 5: Kết quả phân tích thành phần hố học tinh dầu hạt các mẫu quả sa nhân. STT Rt T h àn h phần M I (% ) M2 (% ) M3 (% ) M4 (% ) M5 (% ) 1 7,03 a - pinen 0,20 0,11 0,15 Vết 0,11 2 8,20 Camphen 2,10 1,67 2,00 0,81 2,01 3 9,92 Myrcen 1,10 1,00 1,42 0,70 1,13 4 10,60 a - phellandren 0,05 Vết 0,06 Vết Vết 5 11,86 L- lim onen 3,40 3,15 4,22 2,30 3,38 6 11,97 Dihydrocarveol 0,20 0,18 0,14 0,08 Vết 7 12,01 Cineol Vết Vết Vết Vết 0,15 8 15,67 Linalol 0,30 0,40 0,21 0,20 0,23 9 15,95 Nerol 0,10 0,13 0,06 0,07 0,08 10 17,78 Camphor 20,90 24,82 30,04 34,39 35,80 11 18,53 Iso- bomeol 0,60 0,98 0,29 0,21 0,50 12 19,07 Bomeol 3,87 5,51 0,75 0,87 1,00 13 20,14 a - terpineol 0,05 Vết Vết 0,05 Vết
14 21,25 Isobomyl acetat 0,03 0,03 Vết Vết Vết 15 23,84 Bornyl acetat 64,31 58,41 56,72 55,52 52,36 16 27,26 Geranyl acetat 0,30 0,15 Vết 0,15 0,10 17 28,73 P- caryophyllen 0,10 0,09 0,12 0,09 0,08 18 30,09 a - humulen 0,77 0,60 1,00 1,00 0,90 19 31,08 D- germacren Vết 0,04 0,18 0,04 Vết 20 33,74 Cis- nerolidol 1,40 2,69 0,90 2,27 1,74 21 37,27 Juniperol 0,20 0,25 0,70 0,59 0,18
Nhận xét: Qua nhận xét bằng cảm quan, chúng tơi thấy các mẫu quả sa nhân trên đều giống nhau: Quả hình cầu, màu tím hồng, cĩ gai nhỏ phủ bên ngồi, kích thước tương đối đồng đều ( Phụ lục 1). Từ kết quả nghiên cứu về hố học, chúng tơi thấy thành phần chính trong tinh dầu các mẫu quả sa nhân:
M l, M2, M3, M4, M5 đều là camphor và bornyl acetat trong đĩ tỷ lệ bornyl acetat cao hơn camphor.
Như vậy, cĩ thể kết luận các mẫu quả sa nhân trên là quả lồi Amomum ovoideum Pierre ( SM1).
> Phân tích thành phần hố học tinh dầu hạt sa nhân Amomum ovoìdeum Pierre, bằng phương pháp GC- MS, chúng tơi đã xác định được 21 thành phần.
> Thành phần chính trong tinh dầu hạt sa nhân là bornyl acetat và
camphor. Hai thành phần này chiếm tỷ lệ hơn 80%. Đây là một tỷ lệ khá cao.
3.3. Bàn luận
3.3.1. Bàn luận kết quả nghiên cứu về thực vật:
Trong các nghiên cứu về thực vật trước đây, hầu hết chú ý vào mơ tả đặc điểm hình thái thực vật.
Trong phần nghiên cứu của chúng tơi, ngồi mơ tả đặc điểm hình thái thực vật, chúng tơi đã nghiên cứu đặc điểm giải phẫu thực vật của 3 lồi sa nhân mọc hoang tại vùng núi thuộc xã Phước Bình, huyện Ninh Sơn, tỉnh Ninh Thuận. Qua quá trình nghiên cứu, chúng tơi nhận thấy:
♦ Về đặc điểm vi phẫu gân lá: các lồi sa nhân: Amomum ovoideum
Pierre; Amomum vespertilio Gagn. cĩ đặc điểm vi phẫu gần giống nhau, lồi Amomum vespertilio Gagn. Cĩ lơng che chở ở gân lá.
Riêng lồi Amomum unifolium Gagn. cĩ đặc điểm vi phẫu khác hẳn các lồi trên.
Như vậy, nếu dựa vào đặc điểm giải phẫu thực vật cĩ thể nhận biết được các lồi sa nhân trên.
3.3.2. Bàn luận kết quả nghiên cứu hố học:
* Về hàm lượng tinh dầu: Qua nghiên cứu xác định hàm lượng tinh dầu trong hạt lồi sa nhân mọc hoang tại vùng núi thuộc xã Phước Bình, huyện Ninh Sơn, tỉnh Ninh Thuận cho thấy lồi sa nhân Amomum ovoideum Pierre chứa một hàm lượng tinh dầu khá cao, gấp hơn hai lần so với tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam III (tiêu chuẩn quy định là 1,5%). Đây là một phát hiện cĩ ý nghĩa về kinh tế.
5|c Về TPHH tinh dầu hạt: Qua phân tích bằng phương pháp GC-MS, chúng tơi nhận thấy các mẫu quả sa nhân M l, M2, M3, M4, M5 đều của cùng lồi Amomum ovoideum Pierre. Thành phần chính của tinh dầu hạt lồi sa nhân Amomum ovoideum Pierre là bornyl acetat và cam phor, trong đĩ tỷ lệ bornyl acetat cao hơn cam phor. Tỷ lệ của hai thành phần này chiếm 80- 90% . Kết quả này cho thấy đây là loại sa nhân dược dụng, thể hiện ở hàm lượng camphor + bornyl acetat + borneol cao, đạt 80%- 90%. Lồi sa nhân này đã được đưa vào Dược điển Việt Nam III.
Bảng 6: Hàm lượng tinh dầu (HLTD) và tỷ lệ % cam phor + bornyl
acetat + borneol ( c + BA+ B ) trong tinh dầu hạt lồi sa nhân Amomum ovoideum Pierre ở Phước Bình và một số lồi sa nhân mọc ở các địa phương khác.
Tên lồi Nơi thu hái
HLTD (%) Tỷ lệ % ( c + BA+ B ) Amomum ovoideum
Thơn Tam, Tân Lạc, Hồ Bình
2,04 88,70
A.longiligulare Đơng Hà, Đơng Hưng, Thái Bình
1,90 79,90
A.villosum. Var.xanthioides
Mường Mơn, Điện Biên, Lai Châu
2,60 84,50
A. longiligulare Phước Thành, Bắc Ái, Ninh Thuận
3,75 73,38
A. thyrsoideum Phước Thành, Bắc Ái, Ninh Thuận
3,50 81,58
A.ovoideum Phước Bình, Ninh Sơn, Ninh Thuận
3,11-4,18 4,18
87,51-90,78
Từ các số liệu trong bảng trên cho thấy chất lượng sa nhân Phước Bình rất cao. Đĩ là nguồn nguyên liệu cĩ giá trị để khai thác tinh dầu đem lại hiệu quả kinh tế cao.
* Về định tính sơ bộ các nhĩm chất hố học trong vỏ quả sa nhân: Qua nghiên cứu sơ bộ chúng tơi nhận thấy trong vỏ quả sa nhân cĩ chứa một số
nhĩm chất hố học: tinh dầu, saponin, flavonoid, coumarin, tanin, acid hữu cơ, acid amin, đường khử.
PHẦN 4
KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT
Qua một thời gian tiến hành nghiên cứu đề tài, chúng tơi đã thu được các kết quả sau:
1. Về thực vật:
- Quan sát, mơ tả đặc điểm hình thái thực vật 3 lồi sa nhân mọc hoang
ở vùng núi thuộc xã Phước Bình, huyện Ninh Sơn, tỉnh Ninh Thuận.
- Xác định được tên khoa học của 3 lồi sa nhân mọc hoang trên là:
Amomum ovoideum Pierre, Amomum unifolium Gagn., Amomum vespertilio
Gagn., trong đĩ lồi Amomum ovoideum Pierre đã được đưa vào Dược điển Việt Nam III.
- Mơ tả cấu tạo giải phẫu của 3 lồi sa nhân trên cho thấy dựa vào đặc điểm vi phẫu cĩ thể phân biệt các lồi đĩ với nhau.
2. Về hố học:
- Xác định sơ bộ các nhĩm chất hố học cĩ trong vỏ quả lồi sa nhân
Amomum ovoideum Pierre cho thấy trong vỏ quả cĩ chứa một số nhĩm chất hố học: saponin, flavonoid, coumarin, tanin, acid hữu cơ, acid amin, đường khử.
- Xác định hàm lượng tinh dầu hạt lồi Amomum ovoideum Pierre cho thấy hàm lượng tinh dầu rất cao (3,11%- 4,18%), cao hơn tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam III hơn hai lần.
- Phân tích và xác định được thành phần hố học của tinh dầu hạt lồi
Amomum ovoideum Pierre cho thấy thành phần chính là bornyl acetat và cam phor, tỷ lệ các thành phần này chiếm khoảng 90% chứng tỏ chất lượng cao của tinh dầu.
^ Đề xuất: Phát triển cây sa nhân Phước Bình cĩ ý nghĩa lớn đối với việc xố đĩi giảm nghèo cho đồng bào các dân tộc miền núi. Để thực hiện cĩ kết quả điều này trước hết cần tiến hành:
> Tiếp tục thu thập mẫu, nghiên cứu hàm lượng và thành phần hố học tinh dầu, xác định tên khoa học các lồi sa nhân cịn lại.
> Lựa chọn những lồi sa nhân cĩ giá trị cao về kinh tế đưa vào trồng trọt và khai thác.
> Nghiên cứu tạo thị trường tiêu thụ ổn định nguồn sa nhân cho nhân dân.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
^ Tài liệu tiếng Việt.
1. Nguyễn Tiến Bân (1997), cẩ m nang tra cứu và nhận biết các họ thực vật hạt kín ở Việt Nam, NXB Nơng nghiệp, trang 175.
2. Đỗ Huy Bích, Bùi Xuân Chương (1980), s ổ tay cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, trang 381.
3. Bộ mơn dược liệu (1998), Thực tập dược liệu (phần vi học), Trường Đại học Dược Hà Nội.
4. Bộ mơn dược liệu (1998), Thực tập dược liệu (phần hố học), Trường Đại học Dược Hà Nội.
5. Bộ Y tế (1998), Bài giảng dược liệu, tập II, NXB Y học. 6. Bộ y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, NXB Y học.
7. Lê Tùng Châu (1986), Thành phần hố học của sa nhân, NXB Y học, trang 381.
8. Võ Văn Chi (1997), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, trang 1009-
1010.
9. Vũ Văn Chuyên (1991), Bài giảng thực vật học, NXB Y học.
10. Vũ Văn Chuyên (1976), Tĩm tắt đặc điểm các họ cây thuốc, NXB Y học, trang 197-198.
11. Nguyễn Xuân Dũng, Nguyễn Thị Tâm, Đào Lan Phương, Leclercq (1990), " Thành phần hố học của tinh dầu sa nhân Việt Nam ”, Tạp chí Dược học, số 1, trang 17- 19.
12. Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hố học cây thuốc, NXB Y học.
14. Phạm Hồng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam, quyển III, NXB Trẻ TPHCM, trang 435-437.
15. Trần Cơng Khánh (1974), Một s ố kỹ thuật thường dùng trong nghiên cứu thực vật và dược liệu, Trường Đại học Dược khoa.
16. Trần Cơng Khánh (1981), Thực tập hình thái và giải phẫu thực vật, NXB Đại học và trung học chuyên nghiệp.
17. Trần Cơng Khánh, Nguyễn Thị Tâm, Joseph Casanova (1997), “ Gĩp phần nghiên cứu cây sa nhân một lá ” , Tạp chí Dược liệu, 2 (4), trang 8-9.
18. Đỗ Tất Lợi (1999), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, trang 400-402.
19. Vũ Ngọc Lộ, Đỗ Trung Võ, Nguyễn Mạnh Pha, Lê Thuý Hạnh (1996),
Những cây tinh dầu Việt Nam-khai thác, c h ế biêh, ứng dụng, NXB Khoa học kỹ thuật, trang 174-177.
20. Lã Đình Mỡi, Lưu Đàm Cư, Trần Minh Hợi, Trần Huy Thái, Ninh Khắc Bảo (2002), Tài nguyên thực vật cố tinh dầu ở Việt Nam, NXB Nơng nghiệp, tập II, trang 315-330.
21. Đào Lan Phương (1995), Nghiên cứu một s ố lồi mang tên sa nhân ở miền Bắc Việt Nam, Luận án TS dược học.
22. Nguyễn Thị Tâm, Nguyễn Viết Thân, Cao Xuân Quang, Nguyễn Xuân Tuyển, Trần Quang Thuỷ (2001), “ Những nghiên cứu bước đầu về cây sa nhân Ninh Thuận ” , Tạp chí Dược học, Số 11, trang 10-13.
^ Tài liệu tiếng Anh.
23. Chemical abstracts (CA), vol 24, N0 3, 1930, 48062. 24. CA, vol 109, N0 18, 1988, 156045y.
25. CA, vol 112, N0 14, 1990, 12489ỔX.
26. CA, vol 117, N0 1, 1992, 4199d. 27. CA, vol 117, N0 9, 1992, 8899ỔX.
28. CA, vol 118, N0 2, 1993, 209412k. 29. CA, vol 120, N025, 1994, 315406n. 30. CA, vol 122, N0 23, 1995, 286649c. 31. CA, vol 123, N0 7, 1995, 79569g. 32. CA, vol 124, N0 19, 1996, 255766a. 33. CA, vol 127, N018, 1997, 67378x.
34. Evans, W.C; G.E.Trease (1983), Pharmacognosy, 12th edition, Bailỉere Tindall, p.415-417.
35. Holttum, M.E (1950), Zingiberaceae garden, Bulletin s., vol XIII, p.192. 36. Hooker, J.D (1894), Flora o f British India, vol VI, p.233.
37. Index kewensis I-XIX (1990).
38. Normanr Farusworth; Nuntavan Bunyapraphatsara (1992), Thai medicinal plants recommended fo r health care system, Medicinal plant information
Center, Bangkok, p. 48-51.
* Tài liệu tiếng Pháp.
39. Alfred Petelot (1954), Les plantes médicinales du Cambodge, du Laos et du Viêt Nam, vol IV, p.80.
40. Lecomte, H.(1937), La flore générale de ỉ’ Indochine, tome VI, p.102-117.
* Tài liệu tiếng Trung.
41. Thực vật chí Trung Quốc (1980), tập 16, trang 110.
Phụ lục
Phụ lục 1 Anh các mẫu quả sa nhân M l, M2, M3, M4, M5. Phụ lục 2 Sắc kí đồ tinh dầu hạt mẫu M l.
Phụ lục 3 Sắc kí đồ tinh dầu hạt mẫu M2. Phụ lục 4 Sắc kí đồ tinh dầu hạt mẫu M3. Phụ lục 5 Sắc kí đồ tinh dầu hạt mẫu M4. Phụ lục 5 Sắc kí đồ tinh dầu hạt mẫu M5.
D aiíu N.D07 02/09/16 14:25:57 ■Sar.’.plc : 124
Sample Amount : 0 O perator : Ngoan
U c 3 Dal;' : N.D05 02/09/13 15:55:25 s«” "iple : 125 Sample Amount : 0 O perator : Ngoan TIC 118 110438764; 13 9 0 16 1J2V- l Ạ ị 17 23 19 20 2,122 24 10 15 20 25 30 35 40
i ỊA ụ luc. *r Dai.' : N.D04 02/09/13 15:05:31 Sample : 126 Sample Amount ' 0 O perator : Naoan TIC 3 93947141
p(u4 Luo, 5 Data* N.D03 02/09/13 14:16:03 •San,pie : 127 Sample Amount : 0 O perator : Nsoari TIC 4 139401276; I 7 J _ 10 9 10 13 15 20 20 1H2 1143^71819 25 21 22 2,3 24 —r - 30 516 35 27 2Ĩ9 40
P&JJỊ l u c . (o D a ta : N.D01 02/09/13 12:3-1:06 Sample : 128 Sample Amount : 0 O perator : Neoan 7 8 9 13 17 4022131 I 16 15 \ 10 11 12 141 20 11 22 18 19 j I I L IV I II A wUu-wJ 'v j A J U v**—^ ‘•j 10 15 20 25 30 35 4-0