- Tiện lợi khi sử dụng
o Các phương pháp: Cắt nhuyễn; Ép nhuyễn; Tách bằng màng lọc
Phương pháp cắt nhuyễn
Phương pháp cắt nhuyễn
Phương pháp ép nhuyễn
Phương pháp ép nhuyễn
Phương pháp tách bằng rây
Phương pháp tách bằng rây
Màng lọc 70µm Phân tách tế bào qua rây
Thu nhận tế bào từ gan thai chuột Thu nhận tế bào từ gan thai chuột
Thu nhận thai Thu nhận gan thai
Bổ sung PBS; Tách tế bào bằng syringe
Ly tâm thu cặn tế bào Đếm tế bào
Thu nhận tế bào từ tủy xương chuột Thu nhận tế bào từ tủy xương chuột
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
Huyết thanh
Tế bào đơn nhân
Tiểu cầu Hồng cầu Ly tâm 2000v/ph
Tế bào trung mô máu cuống rốn A: Vừa thu nhận
B: Sau 5 ngày nuôi cấy
• “Tế bào quan tâm là tế bào a. Tế bào này nằm trong 1 khối mô rắn cùng với 3 loại tế bào khác là b, c và d.
• Các tế bào có tỉ trọng như sau:
– a = 1,070 g/cm3
– b = 1,077 g/cm3
– c = 1,067 g/cm3
– d = 1,080 g/cm3”.
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
• c = 1,067 g/cm3 > a = 1,070 g/cm3 > b = 1,077 g/cm3 > d = 1,080 g/cm3
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
Phân tách tế bào trung mô máu cuống rốn bằng cách ly tâm theo gradient đẳng tỉ trọng
Phương pháp tách tế bào dựa vào marker bề mặt tế bào
Phương pháp tách tế bào dựa vào marker bề mặt tế bào
Nuôi cấy tế bào
Nuôi cấy tế bào
Phương pháp xác định số tế bào sống/chết bằng buống đếm hồng cầu
Phương pháp xác định số tế bào sống/chết bằng buống đếm hồng cầu
Đếm tế bào bằng buống đếm hồng cầu
Đếm tế bào bằng buống đếm hồng cầu
10-1 cm 10-1 cm 10-2 cm
Công thức tính mật độ tế bào (tb/ml):
A =
Tổng số tế bào Số ô lớn
* Hệ số pha loãng* 104
Ví dụ: Một sinh viên tiến hành đếm số lượng tế bào sống trong 500 microlit dịch tế bào (Không tiến hành pha loãng với PBS).
Anh ta đếm được 120 tế bào trong 3 ô lớn
Phân tách tế bào đơn
Phân tách tế bào đơn
Tách tế bào đơn
Tách tế bào đơn
Tách cơ học
Tách cơ học Tách hóa họcTách hóa học - Phương pháp cắt nhuyễn - Phương pháp cắt nhuyễn - Phương pháp ép nhuyễn - Phương pháp ép nhuyễn - Phương pháp lọc bằng màng lọc - Phương pháp lọc bằng màng lọc - Trypsin ấm, lạnh - Trypsin ấm, lạnh - Collagenase - Collagenase
So sánh nuôi phương pháp tách tế bào đơn bằng cơ học và enzyme
So sánh nuôi phương pháp tách tế bào đơn bằng cơ học và enzyme
Giống nhau: