Tiến hănh định lượng Ravonoid toăn phần trong phần trín mặt đất vă riíng phần lâ. Cắn Flavonoid toăn phần trong lâ gọi lă Fj.
Cđn chính xâc khoảng 15g dược liệu, cho văo túi lăm bằng giấy lọc, đặt văo bình Soxhlet. Chiết bằng ether dầu hoả trong 12 giờ. Dịch chiết cất thu hồi dung môi dưói âp suất giảm, để bay hoi ở nhiệt độ phòng đến cắn D. Lấy túi dược liệu ra khỏi bình Soxhlet để bay hoi hết dung môi ether dầu hoả rồi đặt lại văo bình. Chiết tiếp bằng MeOH 90° cho đến khi dịch chiết trong suốt không mău. Dịch chiết đem cất thu hồi dung môi dưód âp suất giảm, tiếp tục bay hơi trín nồi câch thuỷ đến khô thu được cắn E. Hoă tan cắn E văo nước nóng, lọc vă trâng nhiều lần để loại tạp. Để nguội, gộp dịch lọc văo bình gạn, lắc với EtOAc đến khi dịch chiết EtOAc trong suốt không mău. Gộp dịch chiết EtOAc, cất thu hồi dung môi dưói âp suất giảm, bay hoi trín nồi câch thuỷ đến khô được cắn F. Sấy cắn F ở nhiệt độ lOPC đến khối lượng không đổi, lấy ra đặt văo bình hút ẩm 30 phút rồi cđn (Hình 2.8). Hăm lượng Flavonoid toăn phần trong dược liệu được trình băy ở bảng 7, bảng 8.
Hăm lượng Flavonoid toăn phần dược liệu được tính theo công thức: X(%) = --- ---xl 00 (*)
M(lOO-a) Trong đó:
X: hăm lượng phần trăm Flavonoid toăn phần (%). m: khối lượng cắn thu được (g).
M: khối lượng dược liệu dùng để chiết (g). a: độ ẩm của dược liệu (%).
Bảng 7: Kết quả định lượng Flavonoid toăn phần trong phần trín mặt đất. 'IT Khối lượng dược liệu (g) Đô ẩm dươc iiệu (%) Khối lượng cắn F (g) Hăm lượng Flavonoid (%) 1. 15,0096 6 ,0 2 0,1105 0,78 2. 15,1051 6 ,0 2 0,1115 0,79 3. 14,9815 6 ,0 2 0,1005 0,71 4. 14,8975 6 ,0 2 0,0911 0,65 5. 15,0312 6 ,0 2 0,1017 0,71 TB 0,73 ±0,06
Bảng 8: Kết quả định lượng Flavonoid toăn phần trong lâ.
TT Khối lượng dươc liíu (fí) ’ Độ ẩm dược iiệu (%) Khối lương cắn Fi (g) Hăm lượng Flavonoid (%) 1. 15,0096 6 ,0 2 0,0975 0,69 2. 15,1051 6 ,0 2 0,1135 0,80 3. 14,9815 6 ,0 2 0,0925 0 ,6 6 4. 14,8975 6 ,0 2 0,0895 0,64 5. 15,0312 6 ,0 2 0 ,1 0 0 1 0.71 'IB 0,70±0,06
Nhận xĩt: được tính theo phương phâp thống kí cho hăm lượng Flavonoid toăn phần ttong phần trín mặt đất lă: 0,77 ± 0,05 % vă trong lâ lă: 0,70 ± 0,06 %.
Tóm tắt quâ trình chiết xuất Flavonoid theo sơ đồ sau:
Hình 2.8; Sơ đồ tóm tắt quâ trình chiết xuất Flavonoid toăn phần trong dược liệu.
2.2.6. Định ỉượng Saponin toăn phần trong dược liệu XHLH.
Cđn chính xâc khoảng 15g dược liệu, cho văo túi bằng giấy lọc, đặt văo bình Soxhlet, chiết bằng ether dầu hoả cho đến khi dung dịch trong bình trong suốt không mău. Lấy túi dược liệu ra khỏi bình, để bay hoi hết ether dầu hoả. Đặt lại túi dược liệu văo bình, chiết bằng MeOH 80® đến khi dịch chiết trong suốt không mău. Dịch chiết cất thu hồi dung môi dưói âp suất giảm, bốc hơi
trín nồi câch thuỷ cho bay hơi hết cồn. Thím 20ml H2O nóng, lọc lần lượt qua một phễu lọc có lót bông vă giấy lọc, lọc nhiều lần để loại hết tạp. Dịch chiết nước lại đem lắc với ether dầu hoả, lấy lớp nước. Dịch nước đem lắc với n- BuOH bêo hoă nước đến khi lớp n-BuOH trong suốt không mău. Dịch chiết đem cất thu hồi dung môi dưới âp suất giảm đến cắn. Hoă tan cắn trong một lượng tối thiểu MeOH. Thím văo gấp 10 lần thể tích Aceton để kết tinh Saponin. Lọc lấy tủa (G). Dịch lọc tiếp tục lăm như trín tói khi không còn tủa. Tủa G đem sấy ở 70°c đến khối lượng không đổi, đặt văo bình hút ẩm 30 phút rồi đem cđn ngay (Hình 2.9). Kết quả xâc định hăm lượng Saponin toăn phần được trình băy trong bảng 9.
Hăm lượng Saponin toăn phần được tính theo công thức (*).
Bảng 9: Kết quả định lượng Saponin toăn phần trong XHLH.
TT Khối lượng dược liệu (g) Độ ẩm dược liệu (%) Khối lượng cắn (g) Hăm lượng Saponin (%) 1. 15,0096 6 ,0 2 0 ,1 2 0 1 0,85 2. 15,1051 6 ,0 2 0,1251 0 ,8 8 3. 14,9815 6 ,0 2 0,1124 0,80 4. 14,8975 6 ,0 2 0 ,1 1 2 1 0,80 5. 15,0312 6 ,0 2 0,1234 0,87 TB 0,84 ±0,04
Nhận xĩt: Kết quả được tính theo phương phâp thống kí cho hăm lượng Saponin toăn phần lă 0,84 ± 0,04 %.
Tóm tắt quâ trình chiết xuất Saponin:
Hình 2.9: Sơ đồ tóm tắt quâ trình chiết xuất Saponin toăn phần.
2.3. BĂN LUẬN.
Cho đến nay, người ta thấy rằng tâc dụng của thuốc cổ truyền lă do thănh phần hoâ học của nó mang lại. Ví dụ: Hoăng liín có tâc dụng đối với bệnh viím đại trăng lă do thănh phần Berberin; Bình vôi có tâc dụng an thần lă do thănh phần L- tetrahydropalmatin; Ma hoăng có tâc dụng dên cơ trơn lă do có Ephedrin; Đại hoăng có tâc dụng nhuận tẩy do có Anthra glycosid ... Do vậy việc nghiín cứu về thănh phần hoâ học của dược liệu lă hết sức quan trọng nhất lă đối với câc cđy thuốc dđn gian. Đối với cđy XHLH lă cđy thuốc mói được sử dụng trong phạm vi nhđn dđn. Hiện nay, vói những tăi liệu tham khảo mă chúng tôi có, chưa tìm thấy tăi liệu năo công bố về thănh phần hoâ học của cđy XHLH. Việc nghiín cứu về thănh phần hoâ học của cđy XHLH mới chỉ lă bước đầu, tuy nhiín cũng đê xâc định được trong cđy có: Flavonoid, Saponin, Sterol, Tanin, đường khử, acid hữu cơ, chất bĩo. Chúng tôi nghĩ rằng, tâc dụng của XHLH theo kinh nghiệm dđn gian chủ yếu chữa câc bệnh đường tiíu hóa; Viím đại trăng, viím ruột, chảy mâu ... Do vậy đương nhiín tâc dụng năy sẽ lă tâc dụng của những thănh phần hóa học của cđy XHLH. Qua phđn tích câc thănh phần hoâ học của dược liệu XHLH (bộ phận trín mặt đất vă phần lâ), thấy rằng ở cả 2 bộ phận năy đều có câc thănh phần tương tự nhau. Đđy chủ yếu lă thănh phần Flavonoid vă Saponin. Chúng ta đê biết thănh phần Flavonoid thường đưa lại tâc dụng lăm bền mao mạch, tăng tính thấm của thănh mạch (Rutin). Trín thực tế XHLH được dùng với công dụng chữa chảy mâu, nhất lă chảy mâu đường tiíu hoâ. Như vậy tâc dụng năy có thể liín quan đến thănh phần Flavonoid.
PHẦN 3: KẾT LUẬN VĂ ĐỂ XUĐT.
3.1. KẾT LUẬN.
Sau thòi gian nghiín cứu về thănh phần hoâ học, từ mục tiíu ban đầu chúng tôi đê thu được câc kết quả sau:
- Kết quả định tính câc nhóm chất bằng phưoĩng phâp hoâ học cho thấy trong cđy vă riíng phần lâ XHLH có Flavonoid, Saponin, đường khử, acid hữu cơ, Sterol, tanin.
- Định tính Flavonoid bằng SKLM vói hệ dung môi I xâc định trong cđy có 6
vết chất, hệ dung môi III có 5 vết chất, hiện mău dưới đỉn tử ngoại ở bước sóng 245 nm.
- Định tính Saponin vói hệ dung môi III cho thấy có 7 vết chất hiện mău dưói đỉn tử ngoại ở bước sóng 254 nm vă 365 nm.
- Định lượng câc phđn đoạn chiết trong cđy thu được cắn A (trong CHCI3) vói hăm lượng lă; 3,55 ± 0,07 % vă cắn c (trong EtOAc) vói hăm lượng lă: 0,58 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
+ 0,04 %.
- Dịnh lượng Flavonoid toăn phần trong phần trín mặt đất lă 0,73 ± 0,06 % vă ttong lâ lă: 0,70± 0,06 %. Hăm lượng Saponin toăn phần lă: 0,84 ± 0,04 %.
- SKLM điều chế Sterol từ dịch chiết ether dầu hoả đê tâch được 2 vết chất hiện mău dưới đỉn tử ngoại ở bước sóng 365 nm, có Rf X 100 lă; 32 vă 47.
3.2. ĐỂ XUẤT.
Cđy XHLH qua sử dụng lăm thuốc trong dđn gian đê cho thấy đđy lă một cđy thuốc có nhiều triển vọng. Do thời gian có hạn chúng tôi mới chỉ bước đầu nghiín cứu về thănh phần hoâ học của cđy. Vì vậy chúng tôi đề nghị tiếp tục nghiín cứu sđu hơn về cđy thuốc năy để nđng cao giâ tn sử dụng của cđy thuốc, đồng thời góp phần lăm phong phú thím nguồn dược liệu của nước ta:
• về hoâ học:
+ Định lượng Saponin toăn phần trong lâ để so sânh vói Saponin trong bộ phận trín mặt đất.
+ Phđn lập, xâc định cấu trúc một số nhóm chất trong dược liệu: Flavonoid vă Saponin.
TĂI LIỆU THAM KHẢO
• Tăi liệu tiếng Việt.
1. Bộ môn dược liệu - Trường Đại học Dược Hă Nội (2004), Băi giảng dược liệu, Tập 1,
2. Bộ môn dược liệu - Trường Đại học Dược Hă Nội (1998), Thực tập dược liệu - Phẩn hoâ học.
3. Nguyễn Tiến Bđn (1997), cẩm nang tra cứu vă nhận biết câc họ thực vật hạt kín ở Việt Nam, NXB Nông nghiệp.
4. Võ Văn Chi (1997), Từ điển cđy thuốc Việt Nam, NXB Y học, trang 1353. 5. Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, NXB KH&KT, Tập 2,
trang 2052.
6. Lí Đình Bích, Trần Văn ơn (2005), Thực vật học, Trung tđm thông tin- thư viện Đại học Dược Hă Nội, trang 305 - 307.
7. Nguyễn Văn Đăn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương phâp nghiín cứu hoâ học cđy thuốc, NXB Y học Tp.HCM.
8. Phạm Hoăng Hộ (2000), Cđy cỏ Việt Nam, NXB Trẻ, Tập 3, trang 6 8 - 70. 9. Trần Công Khânh, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Thị Thanh Nhăi vă cs, Góp
phẩn nghiín cứu về thực vật, thănh phần hoâ học vă tâc dụng sinh học của cđy Xuđn hoa, Tạp chí Dược liệu, Tập 3, Số 2/1998, trang 37 - 42.
10.Nguyễn Đức Minh (1975), Tính khâng khuẩn của cđy thuốc Việt Nam,
11. Thđn Thị Kiều My (2005), Nghiín cứu thănh phần hoâ học của hoa cđy Vọng Câch, Luận văn ĐH 2000 - 2005.
12.Trần Công Khânh, Sự thật về một cđy thuốc kỳ diệu: Cđy ]ảiđn hoa, Tạp chí Thuốc & Sức khoẻ, Số 101/1997, trang 10-11.
13. Nguyễn Thị Thanh Nhăi (1997), Góp phần nghiín cứu về thực vật, thănh phần hoâ học vă tâc dụng sinh học của cđy Xuđn hoa, Luận văn ĐH 1992 -
1997.
l
14. Lí Thị Lan Oanh vă cs, Khảo sât một số chỉ tiíu sinh hoâ vă tâc dụng thuỷ phần Protein của lâ Xuđn hoa, Tạp chí Dược liệu, Tập 4, Số 1/1999, trang
13-17.
15. Phạm Xuđn Sinh (2004), Nghiín cứu phương thuốc Nhị trần thang gia giảm điều trị hen suyễn, Đề tăi nghiín cứu cấp bộ.
16. Ngô Văn Thu (1990), Hóa học Saponin, Trường Đại học Y Dược Tp HCM, trang 109 - 160.
17. Nguyễn Thị Kim Thoa (2006), Nghiỉn cứu đặc điểm thực vật, thănh phần hoấ học vă tâc dụng sinh học của lâ Bạch đồng nữ, Luận văn ĐH 2001- 2006. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
18. Nguyễn Thị Minh Thu (1999), Góp phần nghiín cứu về thực vật, thănh phần hoâ học vă tâc dụng sinh học của cđy Xuđn hoa, Luận văn thạc sỹ. 19. Nguyín Thị Minh Thu, Trần Công Khânh, Nguyễn Văn Hùng, Góp phần
nghiín cứu thănh phần hoâ học trong lâ Ỵuđn hoa, Tạp chí Dược liệu, Tập 5, SỐ 6/2000, trang 163- 167.
20. Nguyễn Thị Minh Thu, Trần Công Khânh vă cs, Thử độc tính cấp diễn vă bảo vệ tế băo gan của cđy Xuđn hoa, Tạp chí Dược học, Số 9/ 1999, trang
15-17.
21. Viện dược liệu (2004), Cđy thuốc vă động vật lăm thuốc ở Việt Nam, NXB KH&KT, Tập 2, trang 1128 -1130.
• Tăi liệu tiếng nước ngoăi.
22. NAPRALERT database, Information on the psenderanthemum genus.
23. Raymond Benoist, in M.H. Lecomte (1935), Flore gĩnĩrale de V Indo - chine, Paris Masson et c® E’diteurs, 4, p.716 - 718.
24.
(SỞ nghiín cứu dược liệu - Viện khoa học y học Trung Quốc (1972), Tập 1,
Nghiín cứu thănh phần hữu hiệu Trung thảo dược: Chiết xuất, phđn ỉy, kiểm định vă định lượng, NXB Nhđn dđn vệ sinh, trang 221).
PHỤ LỤC Biín bản định tín khoa học cđy XHLH.
nTỀN ■'Kf dîI'îh t ễ n c,Ky Ì Ĩ Ỉ OKI I ì ia ọ c o ò '”Ô»1 tirỪDi r l i í ỉ t h i ệ u ì P h n n X u đ a
lỉf:ă v ; 2 0 /" ì/ 2 0 0 6 (NliQtn c ' ' l ồ u Chủ r .h ñ t l 9 ' ' 3 / ? n o 6 > 17 Gi'^ •
Tổu ncừ đỉ đưa niaü : i'inuyon Ohi uonnh*
Cíhứo v ụ : h ọ c v l e n CC'O h ọ c c ủ a BỘ n ó n j->ươc liọ c c o t r u y ồ n
Tôn c n v : IIoòu nr.ọc đ ỏ .
r i i tr ồ n r : : T h â i DỈ Iỉ>'
■'Hir dụi.r : thuố'' ''i ría v lô r , đ ạ i trăiir?.
f’-'í riAu : H a t . r đ v tưcll n ó i t r o r . r ■■'Óo t-.iio tlia o . ' ) ă i I: o.-ỉiic
i t-'- «~.-i 0 ’i0 " ' n ’■'o' ^ ô i , ''ì.iili r ỉ â r , d.^i. 1"^' r't^: . ro iic •? ló 1
c^ iin . hxtih mũi r-^nc ,r i« t d ứ đ i n lig t hrtr trăt trồn..GiiT:: t'oa tửiiH '^ụn. íĩêv còn mnt, >ma . t r a n r fin i l . ; j om. nâiĩh
TS.I l i ệ u TIIAM '^HẤO :
1 . 7o Vfiii c t i i TỪ đ lỡ iỉ t'n/rï ■'rẶt thônirr tât» <s nhă x u ấ t baii IrUon 'lọư vò Irỹ t l m g t - 20u^ - i'ratifî 2 0 5 2 : PSEúDSKAriTriEỈTĨV tncidlk ÌÌỌ ổ r ô . i c a i i t U a c o n o .
pPour^orantlioT^ur c a r r u t ! : o r e i i ( S 0 Q V , ' > v j i i i l l a u n i i î vat..ntro-nur-Durpur
Cj-ull,) to.sliorr: - A,unii lioa fío
pFouđorniitlior.iut?i f t r a c i l i f l o r u n i ( if o o s ) <uđr. hoa mânli
Pñouderantlioraum ’^ a l a t i f o r u r i (jN0 08)K.':irilir~ Ạniî )!on, iiOẲi« jiüÌ'ù, iihạt iiGuySu ,x u l i n h , wđy con k h i i i r ì c nê xhciu t ự đ iic l i n h , o đ y mặt o u ý , l ó đ ỉ o n , c đ y n ớ i đẩiiG*
f'IiìTn •loătì.r; tiỏ u ô v >.:ỏ v i ò t fjart, y¿uyou i l l nhă x u ấ t bân x r ó - 20C'0 - trai'.n ÓV* /9-5’/ P~i;r.7'-’';ranthoffmní c a r r u t l i o - a i i (Seom-j) ừ u i l l . var<
r.itro-nurTỉureur ( B u l l . ) Koob, Xuò.n hoa đ ổ . ' ơ a t i . f o l i a n (i.sror»Fromvi‘J^r) vũn» (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
no u' i n a t l s s i >^'ur ï'in , Kuai! '>oa 1)1',ỌÌI f ỉ'rri''t.oatuTn I r - la y Auaii líon l ó hoa
/U/1 •'ronDlntutn ( j u ,,íđ l. )k. lỉotiĩ
¡'aiir /'ý/? . í^bo-rharHtlt K.ñon, T>c»l*tỉforuni Itadllt.
n o i l a u o i i ỉ .B o n . 7 9 / 5 . p» r o t i c u l a t u m UodlTt. ri-aỉìí7 yO. / 9 y ồ * p . t o i i k ỉ n o n e e H .ê e n v
■. Jny tlm n o vă iộnr; v a t l ă n t h u o c đ v l ậ t 1'inr. vđw ĩ l nhă x u h t bâr. M\on học vă kỹ t l i u ộ t i siOCH - rraiip 112Õ BO v ’] 0 . X\ĩni'. hoa ppi^^u^^orantỉionur T)CTlati ■'^•'ỡruTn ' iíOOp) Ko'^lTr. noòn nrọc Iiruyot , tu l i n h , criy COI'. ÍT1\Ỉ , t
t r ọ c nă vtliaii t ự đ iic l i n h , c a y r,ăt aủy^ ĩ h o o «a.ynĩond J ío tio ie t 1 9 / 9 c ộ / l o ò ỉ
iií: u y o n l Ì G ỉ i Wnn I v v / 1 0 l o ă ỉ »
i'ừ •*v'iò'. .«ncii 'lu'o 'tírtc K9r;l.ví99 ~ t r a u n So 20 Xuau 'loa PscU'^<?T'riv.- tl'.e’TiUT'ii ' ‘•iroFî’JKaHItTt iif'ăiỊ tỉnọc, tu l i n h .
h.ot ouâ đ ị n h t o il
J.hoo V k i o i ỉ c ú a r l o t i f t t ô i , n a u v ọ t đ ư a đ o u Aci đ ị ì i h t ö n , c o t h o l ă !
8 0 r V r O P a o u r to r a n th o n ü T îi b r a c t o a t u n I t n l a y - x u a n lioci l a h o a ,
Vió c a o 5O-0 O ow í.t Than vntir; đó , c ó c a n h ÿ c ó lo i ip n ị u l ú c Iion
Lâ c ó TsliiÌn t l i o n , t o 5-V 3 - 5 c ó l o n n h a i t n ặ t . ư a n t)hụ 5 - 0 c ặ p , c
r u o jír <1òi ¿ - J OP . p i ' ó t hoo c a o Ö -1 0 nri , Iri hon nlní In t o ‘d X u , y cm
c ó l o r . n n ị u , v ă i ỉ h l i h ỏ , c n o ! , : > c n * t h ù y c a o Q - y nm , t ỉ a u l ì h ị 2 . r i a n c c a o
2ctĩi. r .ó loJift n ị u . i i ú i u in U *
norb ciO c n l i i p h , b r a c t B f i n o l y -DUboscont , c o t o 3 l a 1,*? crn hi/7h.
a ọ 0 r o A c a n t h a c o o o .
t h o o k h ó a t r a n p > 0
1 n n O t k h o u ì «ìọp v ă Ttíiônc c ố c â n ' o h ò ỉ c ử u f ĩ ì.b ầ o t d ọ p v ă c ó o ả n r*lioi t o , o ỉ t n r ĩ
<ib v n ii h t l o i i iTliai klionrr vftt)
¿ c n i î h h o a Cijnh c l i o t i c l o ’i Cifmh ìioa Icliâc
- v/ârj\ h o a t r o n clioi'.n l o II c â n h h o a cqii'.lí ‘(•a văr.li c ó m ot n o i t o
*(-b v ă ỉ ì h l i a i n o i h a y I'.hư đ e u
3 n huonn ¿ noên
5 b buonn cliớa 2 noên
o a v ò n h •? t h ù y h ắ h(7 n h a u , c t h ù y s a u c ó t h o í ì í n h nliat'